생식용 씀바귀의 섭취의 일환으로 생즙의 생리활성을 검색하기 위하여 본 실험을 실시하였다. DPPH free radical 소거법에 의한 항산화활성을 검정한 결과 에칠아세테이트 분획물이 RC$_{50}$값이 28$\mu\textrm{g}$/mL로 강한 활성을 나타내었다. 항미생물 활성 실험에서는 곰팡이 균주에 대해서는 생즙 농축액이 분획물에 비하여 우수한 활성을 나타냈으며, Hypocrea nigri-cans에 대해서는 대조구보다 우수한 활성을 나타낸 반면세균 균주에 대해서는 에칠아세테이트 분획물이 우수한 활성을 나타내었다. 또한 각 균주에 대하여 씀바귀 생즙이 독성을 나타내지 않는 범위에서 직접 돌연변이원(MNNG, ANQO)과 간접 돌연변이원(B(a)P, Trp-P-1)에 대하여 실험을 실시한 결과 강력한 발암물질로써 직접 변이원으로 사용된 MNNG(0.4$\mu\textrm{g}$/plate)의 경우 S. typhimurium TA100균주에서 시료농도과가 나타냈으며, 4NQO(0.15 $\mu\textrm{g}$/plate)에 대한 S. typhymur-ium TA98 균주에서는 에칠아세테이트 분획층이 74.21%로 가장 높은 억제 효과를 나타냈으며, TA100 균주의 경우에는 부탄올 분획물(75$\mu\textrm{g}$/plate)에서 73.11%로 가장 높은 억제 효과를 나타내었다. Trp-P-1(0.15 $\mu\textrm{g}$/plate)을 사용한 S. typhimur-ium TA98 균주에서는 시료농도 100 $\mu\textrm{g}$/plate에서 물 분획물(75 $\mu\textrm{g}$/plate)에서 83.09%의 가장 높은 억제 효과를 보였고, TA100 균주의 경우, 시료농도 100 $\mu\textrm{g}$/plate에서 부탄올 분획물에서 68.88%의 가장 높은 억제 효과를 보였고, B(a)P(10$\mu\textrm{g}$/plate)에서는 TA98 균주 100$\mu\textrm{g}$/plate의 시료농도에서는 에칠아세테이트 분획물이 78.83%로 가장 높은 억제 효과를 보였으며, TA100 균주 100$\mu\textrm{g}$/plate의 시료농도에서는 핵산 분획물이 75.96%로 가장 높은 억제 효과를 보였다. 각종 암세포주(A549, Hep3B, MCF-7)에 대한 증식 억제 효과를 실험을 한결과, 폐암세포주인 A549세포에서는 부탄올 분획물 (375$\mu\textrm{g}$/mL)이 93.75%로 가장 높은 억제 효과를 나타내었고, 간암세포주인 Hep3B에서는 핵산 분획물(500$\mu\textrm{g}$/mL)이 84.91%로 가장 높은 억제 효과를 보였다. 또한, 유방암 세포주인 MCF-7에서도 핵산 분획물(500$\mu\textrm{g}$/mL)이 58.56%의 높은 억제 효과를 보였다. 씀바귀 추출물은 인간 정상 간세포 293에서 시료 농도에 따른 증식 억제 효과를 보였다. 1000$\mu\textrm{g}$/mL 시료 첨가시 암세포에 대하여 대부분 60% 전후의 성장 억제를 하였고, 정상인 293세포에 대해서는 32% 이하로 생육을 억제하였다. 이는 씀바귀 추출물이 암세포의 성장억제 대한 높은 효과에 비해 정상세포에 대해서는 비교적 낮은 독성을 나타냄을 알 수 있었다.
씀바귀 80% 에탄올 추출물의 추출 수율은 12.6%를 나타내었으며, 추출물에 함유된 총 페놀 및 플라보노이드 함량은 각각 $4.01{\pm}0.63$ GAE mg/g 와 $0.05{\pm}0.01$ RE mg/g을 나타내었다. 3가지의 항산화 측정 모델(DPPH, ABTS, reducing power)을 통하여 씀바귀 추출물의 항산화 활성을 측정한 결과 씀바귀 추출물은 동일 농도에서 양성대조군으로 사용된 ascorbic acid보다는 낮은 항산화 활성을 가진 것으로 생각된다. 씀바귀 에탄올 추출물의 50, 100, 200 및 $400{\mu}g/mL$ 농도범위에서 세포독성을 측정한 결과, 대조군과 유의적인 차이가 없었으므로(p<0.05) 씀바귀 에탄올 추출물을 50, 100, 200 및 $400{\mu}g/mL$ 농도로 하여 항비만 활성을 평가한 결과 씀바귀 추출물을 처리한 지방세포는 모든 농도 범위에서 대조군과 비교하여 Oil red O 시약에 의하여 염색된 지방구는 유의적으로 적은 것으로 나타났다(p<0.05). 이상의 결과로부터, 씀바귀 추출물은 항산화 활성 및 지방세포 분화억제 효능을 갖으며, 천연물 유래 항산화제로써 활용가능성이 높은 것으로 기대된다.
Park, Eun-Kyung;Sung, Jin-Hee;Trinh, Hien-Trung;Bae, Eun-Ah;Yun, Hyung-Kwon;Hong, Seong-Sig;Kim, Dong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권2호
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pp.308-313
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2008
Ixeris dentata (ID, family Asteraceae), called Seumbakuy in Korea, was fermented with lactic acid bacteria (LAB) and their antiallergic activities were investigated. Fermentation of ID with Bifidobacterium breve or Lactobacillus acidophilus increased its inhibition of degranulation in RBL-2H3 cells induced by the IgE-antigen complex. Oral administration of these extracts to mice inhibited the passive cutaneous anaphylaxis (PCA) reaction induced by the IgE-antigen complex and scratching behaviors induced by compound 48/80. The fermented ID more potently inhibited the PCA reaction and scratching behaviors than the non-fermented one. These extracts also inhibited mRNA expression of TNF-${\alpha}$ and IL-4, as well as NF-${\kappa}B$ activation in RBL-2H3 cells induced by the IgE-antigen complex. These findings suggest that LAB fermentation improves ID-mediated inhibition of IgE-induced allergic diseases such as rhinitis and asthma, and that ID works by inhibiting degranulation and NF-${\kappa}B$ activation in mast cells and basophils.
Blood glucose and total lipid levels in rats with streptozotocin-induced diabetes were determined after intraperitoneal administration of methanolic extract of Ixeris dentat whole plants and its main component, cynaroside (=luteolin 7-O--$\beta$-D-glucoside). From the data obtained, it was concluded that intraperitoneal administration of the methanolic extract produced a significant hypoglycemic effect. Total blood lipids were also decreased. Cynaroside in the streptozotocin-diabetic rats failed to exhibit hypoglycemic effect but a significant hypolipemic activity was observed. Thus, it is suggested that this methanolic extract may contain one or more hypoglycemic and hypolipemic principles including the main flavone glucoside, cynaroside, which can significantly reduce the levels triglyceride and total cholesterol in streptozotocin-diabetic rats.
본 연구는 인체유방암세포인 MDA-MB-231세포를 이용하여 IDE를 처리하였을 때 세포사멸에 미치는 영향을 세포화학적 방법으로 확인하였다. IDE를 각각 0, 20, 30 및 $40{\mu}g/mL$ 첨가하여 24시간 배양한 후, 세포증식 억제, 막투과성, 세포내 ROS 분석 및 세포사멸 단계의 특성을 FACS 분석하고, RT-PCR에 의한 사멸관련 유전자 중 Bax/Bcl-2 ratio 분석을 통하여 IDE의 항암작용의 조절작용을 밝히고자 하였다. MTT의 세포 증식 억제는 첨가된 IDE의 농도에 따라 유의적으로 감소하였다(p<0.05). 이와 동시에, trypan blue에 대한 염색성과 DCF-DA 형광 분석의 결과는 각각, 막투과성과 세포내 ROS 농도가 모두 농도 의존적으로 증가됨을 보였다(p<0.05). 이와 같은 IDE 농도에 따른 세포화학적 변화 중에서 세포의 초기사멸에서 후기사멸 과정으로 급격한 사멸단계의 변화가 특히, IDE 농도 30과 $40{\mu}g/mL$에서 일어났다. RT-PCR 분석에 의한 Bax/Bcl-2 ratio도 IDE 농도 30과 $40{\mu}g/mL$에서 급격히 증가하였다(p<0.05). 이와 같은 세포화학적 결과와 RT-PCR 결과를 종합해 볼 때, IDE의 유방암세포(MDA-MB-231)에 대한 세포사멸작용은 막 투과성의 증가와 ROS 증가를 통하여 세포에 점진적인 손상을 일으키며, 이는 세포의 생화학적 변화도 초래하여 세포 증식 억제를 감소시켜, 결국 세포내의 사멸관련 유전자 지표인 Bax/Bcl-2 ratio를 크게 변화시키는 일련의 세포사멸을 점진적으로 유도시켜 항유방암의 효과의 가능성을 제시하였다.
씀바귀뿌리를 이용하여 침출차를 제조하고자 건조온도 및 처리조건을 달리하여 유리당, 유기산, cynaroside 및 총폴리페놀성물질 함량, 유리아미노산, 색도 및 관능적 특성을 검토하였다. 총유리당, 유기산, 유리아미노산 및 cynaroside 의 함량은 천일건조한 것이 가장 높았으며 총폴리페놀성 함량은 열풍건조 후 볶음 처리한 것이 가장 높았다. 건조한 씀바귀뿌리의 유리당 중 sucrose, glucose, fructose 및 galactose는 열풍건조에 의하여 감소하였고 천일건조 시 검출되지 않았던 maltose가 열풍건조에 정량되었으며 증숙 후 열풍건조 시 1.67%의 높은 함량을 보여주었다. 씀바귀뿌리 내에 함유되어있는 유리아미노산함량 중 arginine이 669.2 mg%으로 가장 높았고 뒤이어 serine이 379.9 mg%으로 높은 함량을 보여주었다. 씀바귀뿌리 건조분말의 색도는 열풍건조 후 볶음처리를 한 것이 밝기, 적색도 및 황색도 모두 가장 높았으나 열수침출 후의 색도는 적색도와 황색도는 타처리구에 비하여 가장 높았지만 밝기는 가장 낮게 나타났다. 씀바귀뿌리를 이용한 침출차의 관능검사결과 열풍건조 후 볶음처리한 처리구가 가장 높은 점수를 보였다.
씀바귀뿌리를 이용하여 침출차를 제조하고자 건조온도 및 처리조건을 달리하여 생리활성을 검토하였다. 각각의 씀바귀뿌리 침출차의 침출액에 대한 생리활성을 측정한 결과, 전자공여능은 증숙처리 후 열풍건조한 것이 98%로 가장 높았고 뒤이어 천일건조>열풍건조 후 볶음처리>열풍건조의 순으로 높았으며, 침출액의 SOD유사활성은 열풍건조 후 볶음 처리한 씀바귀뿌리 추출물에서 $35.61{\pm}0.67%$의 활성을 보였다. ACE저해활성은 천일건조한 것이 44.60%로 가장 저해활성이 가장 높았고, 증숙 처리 후 열풍건조한 처리구가 가장 낮아 28.89%의 저해활성을 보였고, tyrosinase 저해활성은 천일건조한 것이 44.61%로 가장 높았고 열풍건조>열풍건조 후 볶음처리>증숙처리 후 열풍건조의 순으로 저해 활성을 나타내었으며, 아질산염 소거능은 pH가 낮을수록 효과가 있었으며, 특히 열풍건조 후 볶음처리를 한 씀바귀뿌리 침출차의 침출액이 모든 pH 구간에서 가장 효과적인 것을 볼 수 있었다.
Kim, Jin Kyu;Woo, Hyun Jung;Kim, Ji Hyang;Yoon, Yang Dal
환경생물
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제22권4호
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pp.543-549
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2004
Ixeris dentata is a typical oriental herb. It is a widely distributed perennial in Korea, Japan and China, which belongs to the Compositae Family. The whole plant of I. dentata has been used for the treatment of pneumonia, contusion, tumor and hepatitis. It has also been used for the treatment of allergic diseases as a folk therapy in Korea. I. dentata is known to have aliphatics, triterpenoids and sesquiterpene glycosides in its composition. The present study was designed to explore the protective effects of water- and ethanol- extracts from I. dentata on irradiated rodents. For oral administration (twice per day), the extractive powder of I. dentata and the positive control (ascorbic acid) were dissolved at a concentration of 0.5 and 250mg $ml^{-1}$ in saline, respectively. Thirty days after irradiation, the ratio of the weight of the testis to the body weight was lower than 50% in the radiation groups than the control group. The ALP concentrations in the group treated with the water-extracts of the leaf were $79.68\pm{1.39%}$ (p<0.05) of those of the radiation control. Both of the SGOT and SGPT in the group treated with the ethanol-extract of the root were $72.68\pm{0.95}\;and\;77.87\pm{5.74}$ (p<0.05) of those of the radiation control, respectively. The levels of DNA damage induced by gamma radiation decreased in the experimental group to which the extracts of I. dentata were administered before irradiation. In conclusion, these results indicate that the extracts of I. dentata have an excellent ability to reduce the radicals and they have a protective effect on DNA breakage caused by radiation.
Human skin is the first line of defense for the protection of the internal organs of the body from different stimuli. Ultraviolet B (UVB) irradiation induces skin damage and inflammation through the secretion of various cytokines, which are immune regulators produced by cells. To prevent the initiation of skin inflammation, keratinocytes that have been irreversibly damaged by radiation must be removed through the apoptotic mechanism. Ixeris dentata (family: Asteraceae) is a perennial medicinal herb indigenous to Korea. It has been used in Korea, China, and Japan to treat in digestion, pneumonia, diabetes, hepatitis, and tumors. To gain insight into the anti-inflammatory effects of I. dentata, we examined its influence on UVB-induced pro-inflammatory cytokine production in human keratinocytes (HaCaT cells), by observing cells that were stimulated with UVB in the presence or absence of I. dentata. In the present study, pro-inflammatory cytokine production was determined by performing enzyme-linked immunosorbent assay, reverse transcription polymerase chain reaction, and western blot analysis to measure the activation of mitogen-activated protein kinase (MAPKs). I. dentata inhibited UVBinduced production of the pro-inflammatory cytokine interleukin (IL)-6 in a dose-dependent manner. Further, I. dentata inhibited the UVB-induced expression of cyclooxygenase (COX)-2. Furthermore, I. dentata inhibited the phosphorylation of c-Jun NH2-terminal kinase and p38 MAPKs, suggesting that it inhibits the secretion of the pro-inflammatory cytokines IL-6 and IL-8, and COX-2 expression, by blocking MAPK phosphorylation. These results suggest that I. dentate can potentially protect against UVB-induced skin inflammation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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