Kim, Young-Ho;Lee, Young-Ok;Nou, Ill-Sup;Shim, Ill-Yong;Toshiaki Kameya;Takashi Saito;Kang, Kwon-Kyoo
Plant Resources
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제1권1호
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pp.6-12
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1998
The Fp1 gene, originally isolated from red pepper seedlings, encode the iron storage protein, and have a high homology with ferritin genes at DNA and amino acid level. In order to determine ferritin protein expression in vegetative tissue. Fp1 gene was constructed in plant expression vector(PIG12IHm) and introduced in red pepper(var. Bukang, Chungyang and Kalag-Kimjang 2) via Agrobacterium tumefaciensmediated transformation. After selection on MS media containing Kanamycin(Km), putatively selected transformants were confirmed by amplification of selectable marker gene(Fp1 and NPII) by polymerase chain reaction. Northern blot showed that transcripts of Fp1 gene were detected in mature leaves of the plants. In A6, A7 and A8 and A14 of transgenic plants, transcript of Fp1 gene was increased seven-fold to eight-fold than other transgenic plants. Also the proteins obtained from leaves of transgenic plants were immunologically detected by Western blot using rabbit anti-ferritin polyclonal antibody. The expression protein appeared as strong band of apparent mass of 23.5kDa. suggesting the iron accumulation in transgenic red pepper plants.
Explants of Lactuce sativa cultivar, chungchima, were co-cultivated with Agrobacterium tumefaciences LBA4404, EHA101 strains containing nptll gene and ferritin gene encoding iron storage protein from soybean for transformation. Through initial selection of regenerated explants by culturing on a kanamycin and carbenicillin containing MS medium, multiple shoots were obtained after 2 months of culture. For a complementary step of selection, putative transgenic shoots were transferred to 1/2 MS basal medium supplemented with 100 mg/L kanamycin and 500 mg/L carbenicillin. The selected shoots were tested with PCR analysis using nptll, ferritin specific primers whether ferritin gene was introduced to genome of the plants. These results confirmed that produced the specific PCR bands in the putative transgenic lines. Additionally the Northern blot showed that transcripts of ferritin gene were detected in mature leaf of the transgenic lines. These results suggest that ferritin gene be successfully integrated and transcribed in the putative transgenic lettuce plants.
Kim, Ho-Young;Lee, Young-Ok;Noh, Ill-Sup;Kang, Hee-Wan;Kameya, Toshiaki;Saito, Takashi;Kang, Kwon-Kyoo
Plant Resources
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제1권1호
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pp.13-21
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1998
A cDNA Fragment encoding iron storage protrin generated by polymerase chain reaction(PCR) using highly conserved regions of ferritin related genes were used to sereen a red pepper cDNA library. cDNA clone was designated as Fp1. Fp1 clone contatines a 5' nontranslated region of 51dp containing stop conds. Down stream from 5' UTP. an open reading frame of 750bp was observed. followed by a 3' UTR of 272bp. The deduces amino acid sequence of red pepper protein(Fp1) showed 84%, 48% and 36% identity with soybean(SolC). human(HuL H) and horse spleen(HoS-L) ferritin mRNA accumulation in response to iron. Ferritin mRNA accumulation was transient and particularly abundant in leaves. reaching a maxmum at 12h. The level of ferritin mRNA in roots was affected to a lesser extent than in leaves.
Iron intake and nutritional status of 99 female college students of Chungnam Natiional Unive-rsity were estimateed with dietary survey and measurement of hematological indices including the level of serum ferritin Food intake was measured using the weighing method and iron availability per meal was calculated according to Monsen and Hallberg. The average daily intakes of protein vitamin C. total iron and also total available amount of iron were higher than the Korean R.D.A. The blood indices for iron status however showed that iron status of the subjects was inade-quate. Furthermore the serum ferritin levels indicated marginal iron storage in 75% of the subjects.
To improve the iron content of red pepper, we have transferred the entire coding sequence of the ferritin gene(Fpl) into Capsicum annuum (L. cv. Chungyang and Bukang) by Agrobacterium mediated transformation. Transformants were found to contain the Fp1 gene at up to three loci, increased distinct iron content changes. In transgenic plants, iron content was as much as 7-fold to 8-folds greater than that of their untransformed counterparts. Furthermore, the Rl progenies from transformant(A7, A8) co-segregated into a 15:1 ratio for both Kanamycin resistance and genotype of high iron.
The purpose of this study was to estimate the iron availability and to analyze dietary factors which influence hematological indices of 130 female adolescents with iron deficiency anemia. Intakes of iron and other nutrients were estimated using a self-administrated questionnaire combined with the 24-hour recall mehtod and iron availability was calculated by Monsen's method. Mean daily intakes of calorie, protein and vitamin C were 1631.0kcal(77.7% of RDA), 54.7g(84.2% of RDA) and 45.7mg(83.0% of RDA), respectively. In terms of iron, mean daily intake was 8.7mg(48.3% of RDA) and heme iron intake was 3.0mg which correspond to 34% of total iron intake. The amount of total absorbable iron was 1.5mg and the estimated bioavailability of dietary iron was 17.2%. In summary, intake of several nutrients for most of the subjects were under RDA. Dietary factors affecting hematological indices were analyzed by stepwise multiple regression. Intake of vitamin C was a major determinant of Hb level, while both intake of enhancing factor and iron availability were major determinants of serum ferritin level. In conclusion proper nutritional education and guidance for iron deficiency anemic female adoalescent needs to be developed and to improve their iron storage should be increased intakes of enhancing factors, female adoalescents.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제4권2호
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pp.163-168
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2002
We report for the first time the cDNA sequence encoding a ferritin subunit from the spiders Araneus ventricosus. The complete cDNA sequence of A. ventricosus ferritin subunit comprised 516 bp with 172 amino acid residues. The A. ventricosus ferritin subunit cDNA contained a conserved iron responsive element sequence in the 5 untranslated region. An alignment of the deduced protein sequence of the A. ventricosus ferritin subunit gene to that of other heavy chain ferritin molecules showed that A. ventricosus ferritin subunit is most similar to the great pond snail, Lymnaea stagnalis, ferritin with 70.2% of protein sequence identity.
배경: 만성 적혈구 수혈 환자에서 철과잉 여부를 알아보기 위해 페리틴 검사를 시행하는데, 페리틴은 체내 저장철의 양을 반영하지만, 염증, 감염 등에서도 비특이적으로 증가할 수 있다. 본 연구에서는 고페리틴혈증을 보이는 환자에서 페리틴이 증가한 원인을 분석하고 적혈구제제 수혈과의 연관성을 알아보고자 하였다. 방법: 2017년 1월부터 12월까지 본 의료기관에 내원하여 페리틴 검사를 시행한 환자들의 의무기록을 후향적으로 검토하였다. 시행한 페리틴 검사에서 1,000 ng/mL이상의 결과를 보인 경우를 고페리틴혈증으로 정의하고 연구대상으로 정하였다. 페리틴 검사와 함께 시행된 혈청 철, TIBC (Total iron bind capacity), CRP (C-reactive protein) 검사결과와 진단명 등 의무기록을 조사하여 고페리틴혈증의 원인을 분석하였다. 결과: 해당 기간 동안 고페리틴혈증 결과를 보인 건은 238명 환자에서 417건이었다. 질환별로는 혈액종양질환이 31명에서 125건(30.0%)으로 가장 많았으며, 감염질환이 두번째로 많았다. 철과잉이 의심되는 경우는 33명 환자에서 119건이었으며, 이 중 검사 시행 전 1년 동안 적혈구제제수혈이 8단위를 초과한 경우는 12명(76건)이었다. 결론: 고페리틴혈증을 보이는 환자에서 실제 철과잉으로 판단되는 경우, 기저질환의 영향이 있었고 만성 적혈구제제 수혈과도 연관이 있었다. 체내 철 저장 상태를 정확히 파악하기 위해서 페리틴 외에 CRP, 철 포화도를 함께 측정하는 것이 도움이 된다. 습관적인 철분제제 처방, 잦은 수혈 처방시에 철과잉 발생 여부에 주의를 기울여야 한다.
Ferritin is an iron storage protein found in most living organisms as a natural assembled macromolecule. For studying the functional ability of the ferritin assembly, human H- and L-ferritins were expressed and purified from Pichia pastoris strain GS115. The recombinant H- and L-ferritins showed a globular form with transmission electron microscopy. The rate of iron uptake for H-ferritin was significantly faster than that for the L-ferritin in vitro. By gel permeation chromatography analysis, recombinant ferritins were confirmed as multimeric subunits with high molecular weight and it was indicated that assembled subunits were able to store iron in vivo.
Ferritin is an iron storage protein found in most living organisms. For expression and industrial use, human light chain ferritin (L-ferritin) was cloned from human liver cDNA library and expressed in Pichia pastoris strain GS115. The recombinant L-ferritin in Pichia pastoris was glycosylated. In a fed-batch culture, the cell mass reached about 57 g/l of dry cell weight, and the L-ferritin in the cell was increased to about 95 mg/l after 150 h. In an atomic absorption spectrometry analysis, the intracellular content of iron in the L-ferritin transformant was measured as $1,694{\pm}85\;\mu\textrm{g}g/g$, which is 5.4-fold more than that of the control strain. This L-ferritin transformant could serve as iron-fortified nutrients in animal feed stock.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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