• 생명과학회지
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• 제17권10호
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• pp.1321-1329
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• 2007

사슴뿔은 동물세계에서 가장 빨리 성장하는 조직이다. 따라서 성장중인 사슴뿔은 뼈 성장을 촉진하는 인자가 풍부하게 포함된 것으로 생각된다. 이들 성장인자들 중 IGF-1은 뼈를 자라게 하는 조골세포의 대사에 중요한 역할을 한다고 알려져 있어 이를 정제하고자 하였다. IGF-1의 정제는 상대라고 불리는 신선한 사슴뿔을 유안침전, DEAE-Sepharose CL-6B 이온교환수지, CM-Sepharose CL-6B 양이온교환수지, Sephadex G-50의 순차적인 방법으로 할 수 있었다. 각 과정마다 IGF-1의 거동을 HPLC, SDS-PAGE, Dot blot, 그리고 western blot으로 분석하였다. IGF-1의 정량은 ELISA기술로 재조합 인간 IGF-1을 이용하여 계산되었으며, 최종 분별 액은 두 개의 단백질을 보였으나, Western-blot에서 작은 분자량인 12 kDa으로 최종 판명할 수 있었다. 정제된 단백질은 HPLC에서 retention 시간 8분만에 검출되었으며, 총 농도는 2910 ng/ml 이고 중량은 0.291 g 이었다.

• 분석과학
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• 제10권6호
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• pp.403-407
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• 1997

Anchor group으로서 1,7,13-trioxa-4,10,16-triazacyclooctadecane($N_3O_3$)을 가지고 있는 이온교환수지를 사용하여 $^6Li$와 $^7Li$의 분리인자를 측정하였다. 가벼운 동위원소 $^6Li$는 액상에, 무거운 동위원소 $^7Li$는 이온교환수지상에 농축되었다. 2.0M 염화암모늄 용액을 용리액으로 사용한 컬럼 [0.9cm(내경)${\times}$20cm(높이)] 크로마토그래피에 의하여, 1.009의 분리인자, ${\alpha}$, $(^7Li/^6Li)_{resin}$/$(^7Li/^6Li)_{solution}$값을 얻었다. 이 값은 용리곡선과 동위원소비로부터 Glueckauf 이론을 적응하여 얻은 것이다.

• 분석과학
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• 제15권5호
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• pp.410-416
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• 2002

본 연구에서는 LC - MS/MS를 이용해 혈장과 뇨중에서 반코마이신을 신속하게 정량분석하는 방법을 개발하였다. 크로마토그래피는 $C_{18}$ XTerra MS 컬럼 ($2.1{\times}30mm$, $3.5{\mu}m$)을 사용하여 분석하였다. 이동상으로는 0.25% 초산이 섞인 10% 아세토니트릴 용액을 사용하였으며, 유속은 $250{\mu}L/min$이다. 반코마이신과 카페인 (내부표준물질)은 multiple reaction monitoring (MRM) 방법을 사용하여 검출하였으며 반코마이신은 precursor ion m/z 725.0 ( $[M+2H]^{2+}$)와 product ion m/z 100.0을 사용하였다. 혈장에서 반코마이신의 검출한계는 1 nM이며 좋은 정확성과 정밀성을 보여주었다. 또한 혈장중에서 반코마이신의 정량범위는 $0.01{\mu}M$ - $100{\mu}M$이다. 혈장과 뇨중에서 반코마이신을 정량하는 이 분석방법은 약물동력학연구 및 관련연구에 성공적으로 적용되었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제17권10호
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• pp.1459-1464
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• 2004

The purpose of this research was to investigate the potential use of cheese whey protein (CWP), a cheese by-product. The physiological activity of calcium-binding peptides in CWP may be used as a food additive that prevents bone disorders. This research also examined the characteristics of calcium-binding peptides. After the CWP was heat treated, it was hydrolyzed by trypsin. Then calcium-binding peptides were separated and purified by ion-exchange chromatography and reverse phase HPLC, respectively. To examine the characteristics of the purified calcium-binding peptides, amino acid composition and amino acid sequence were analyzed. Calcium-binding peptides with a small molecular weight of about 1.4 to 3.4 kDa were identified in the fraction that was flowed out from 0.25 M NaCl step gradient by ion-exchange chromatography of tryptic hydrolysates. The results of the amino acid analysis revealed that glutamic acid in a calcium-binding site took up most part of the amino acids including a quantity of proline, leucine and lysine. The amino acid sequence of calcium-binding peptides showed Phe-Leu-Asp-Asp-Asp-Leu-Thr-Asp and Ile-Leu-Asp-Lys from $\alpha$-LA and Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys and Val-Tyr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys from ${\beta}$-LG.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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• pp.401.3-402
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• 2002

Enalapril (ENP) maleate is effective drug for the treatment of renivascular hypertension and heart failure. ENP acts as inhibitor of the enzyme angiotensin-convertase (ACE-inhibitor) and metabolized to enalaprilat (ENPT), which is the active metabolite that is really responsible for the therapeutic action. In the present study, a sensitive and rapid liquid chromatography/ electrospray ion trap tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) method combined with high-throughput solid phase extraction (SPE) has been developed and validated for the simultaneous quantitative determination of ENP and ENPT in human plasma. (omitted)

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권5호
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• pp.440-446
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• 1989

Penicillium sp. CB-20의 polygalacturonase 생성을 위한 최적조건은 탄소원으로 펙틴을 사용하여 16 시간 배양시 최대 활성을 나타내었으며, Sephadex G-25, G-75 및 G-150을 사용한 gel filtration과 DEAE-cellulose, DEAE-Sephadex A-50에 의 한 ion exchange chromatography를 통하여 이 효소를 약 30배 가량 정제할 수 있었고, 수율은 2.31%였다. 정제효소는 polyacrylamide gel electrophoresis에 의하여 단일 밴드로 확인 되었으며, 분자량은 SDS PAGE에 의하여 21,000 정도로 측정되었다. 효소의 결정구조는 마름모꼴을 형성하고 있었으며 아미노산 조성은 17종류로써 glutamic acid, glycine, hlstidine의 함량이 비교적 많았다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제40권3호
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• pp.178-183
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• 1997

한국재래간장으로 부터 분리한 Bacilius subtilis CCKS-111이 생성하는 proteae를 분리 정제하였다. 황산암모늄 염석, DEAE cellulose ion-exchange chromatography, Sephades G-100 및 HPLC를 이용한 겔여과법에 의해 비활성도 24.3 unit/mg, 정제배수 50.6배로 효소를 정제하였으며 high performance liquid chromatography (HPLC)에 의하여 단일 단백질임을 확인하였다 정제효소의 분자량은 HPLC에 의하여 분자량 28,000 정도의 monomer로 추정되었고, 본 효소의 아미노산 잔기수는 251.3으로, 분해되기 쉬운 threonine, serine, glycine을 제외한 아미노산 잔기수는 Bacillus subtilis subtilisin DY 잔기수(274)와 유사한 것으로 나타났다. 아미노산 조성은 alanine, serine, glycine 및 arginine의 함량이 많았다. Reverse phase (RP)-HPLC로 분리한 주 peak로 N-말단에서 32번 까지 아미노산 배열을 확인한 결과 Bacillus subtilis subtilisin DY와 동일하였다.

• 분석과학
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• 제14권2호
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• pp.109-114
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• 2001

담배에 포함된 향료 성분을 headspace solid phase microextraction(SPME)를 이용하여 gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS)의 selected ion monitoring(SIM)방법으로 분석하였다. 본 연구에서 사용한 담배향과 관련된 성분은 estragole, pulegone, trans-anethole, safrole, piperonal, eugenol, methyleugenol, coumarin, trans-isoeugenol, trans-methylisoeugenol 및 myristicin 등 11종이며 분석결과 모든 담배에서 한가지 또는 그 이상의 담배향 성분을 $0.001-1.3{\mu}g/g$ 검출할 수 있었으며 회수율은 89.1-102.9%로 나타났고 상대표준편차는 2.6-25.2%를 얻었다.

• 분석과학
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• 제8권2호
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• pp.139-159
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• 1995

몇 가지 종류의 corticosteroid에 대하여 액체 크로마토그래피-질량분석법으로 양이온 질량 스펙트럼을 얻었다. 화학구조에 따라 수소 첨가된 분자이온 [$MH^+$], 암모늄 첨가이온 [${MNH_4}^+$], 또는 ($MH^+-60$) 이온이 base peak였고 [$MH^+-18$] 또는 [${MNH_4}^+-18$] 이온 등이 특성적으로 나타났다. Methylprednisolone acetate를 male Sprague-Dawley rat에 경구투여한 다음 24시간 동안 배설된 뇨로부터 유리상태 또는 접합상태의 대사물질들을 가수분해, 추출 및 농축하고, thermospray LC/MS를 사용하여 양이온과 음이온 질량토막이온을 분석하였다. Methylprednisolone acetate의 C-21 위치에서의 탈아세틸화(deacetylation), C-20 위치에서 C=0의 -CHOH로의 환원, C-11 위치에서 CHOH의 C=0로의 산화 또는 C-17과 C-20 사이의 bond cleavage등에 의해 생성되는 것으로 추정되는 10여종의 대사물질을 검출하였다. 그 중에 20-hydroxymethylprednisolone(20-HMP), methylprednisolone(MP), methylprednisone(11-KMP)등은 표준물질과 비교 확인하였다.

• 한국식품과학회지
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• 제20권6호
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• pp.780-786
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• 1988

본 실험은 Staphylococcus aureus로부터 생성되는 enterotoxin A의 분리를 위하여 각종 분리방법을 조사하였고 그 특성들을 상호 비교하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Amberlite 수지는 배지로부터 처음 toxin을 분리 하는 데에는 간편한 수지이나 정제도에 있어서는 약 70%수준으로 다른 방법들에 비해 낮은 편이었다. CM-cellu-lose수지는 0.2M phosphate buffer로 용출했을 때 75% 정도의 정제도를 가진 toxin을 분리할 수 있었으나 stepwise법으로 용출했을 때에는 80% 이상으로 정제도를 높일 수 있었고 Amberlite 수지와 함께 사용했을 때에는 90%정도의 toxin을 얻을 수 있었다. Amberlite나 CM-cellulose수지로 정제한 후 gel filtration을 실시하면 정제도를 더 높일 수 있었다. FPLC는 분리도와 정제도에서 가장 우수하였으며 FPLC의 결과에 따라 Amberlite 수지는 toxin 분획을 중심으로 앞의 분획을 그리고 CM-cellulose 수지는 뒤의 분획을 주로 제거 하는 특징을 가진다. 따라서 위의 column중 하나만 사용한 후 FPLC를 사용하면 95%이상의 toxin을 분리하는 것이 가능하였다.