본 연구는 꿀벌 꽃가루 추출물(BPW)의 면역 활성에 관하여 알아보기 위하여, 선천면역계의 대표적인 수지상세포와 후천면역계의 대표적인 비장세포에 BPW를 처리 하여 면역세포의 활성능을 관찰하였다. 수지상 세포에 BPW를 처리하여 세포 생존율, 산화질소(II)와 사이토카인($TNF-{\alpha}$, IL-6과 $IL-1{\beta}$) 분비능과 세포 표면분자를 관찰 하였다. 세포 생존율은 수지상 세포에 BPW를 처리하였을 때, 세포 독성을 일으키지 않았으며 주요 면역 활성 인자인 산화질소(II) 분비능을 관찰한 결과, 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 또한 사이토카인의 분비능을 관찰한 결과, $TNF-{\alpha}$, IL-6과 $IL-1{\beta}$의 함량이 농도 의존적으로 증가하는 것으로 관찰되었다. 또한 활성화된 면역세포의 세포 표면에서 발현되는 CD80과 CD86의 발현과 항원제시에 밀접한 관련이 있는 MHC class I, II의 발현이 유의적으로 증가하는 것으로 관찰되었다. 또한 후천면역에서 중요한 역할을 수행하는 면역 T 세포가 다량 분포하는 지라 세포를 분리하여 BPW를 처리 하였을 때 Th1 세포가 분비하는 사이토카인의 함량이 농도 의존적으로 증가되는 것으로 나타났다. 이러한 결과로 미루어 볼 때 BPW는 선천면역뿐만 아니라 후천면역에 관여하는 다양한 면역세포의 활성화에 직간접적으로 관여하는 것으로 사료된다.
최근 산삼근의 배양이 실험실에서 가능해짐에 따라 산삼에 대한 많은 연구가 이루어지고 있다. 본 연구에서는 산삼 배양근으로부터 다당을 분리하여 보체계 및 macrophage에 대한 면역자극활성을 측정하였다. 산삼 배양근을 열수 추출한 뒤, 80% ethanol 침전을 통하여 조다당을 추출하여 특성을 검토한 결과, 산삼 배양근 조다당체(WGAR-CP)의 neutral sugar 함량은 64.77%였고, uronic acid 함량은 34.32%이었다. WGAR-CP의 구성당 조성을 확인한 결과, glucose를 높은 비율로 함유하고 있었으며, rhamnose, arabinose, galactose, glucose를 미량 함유하고 있었다. Uronic acid에서는 galacturonic acid를 높은 비율로 함유하고 있었다. 한편, WGAR-CP는 인체 초기 면역반응에 있어 중요한 역할을 담당하는 보체계에 대하여 농도 의존적인 활성을 나타냈다. WGAR-CP를 0.1, 1, 10, 50, $100{\mu}g/m{\ell}$ 농도로 mouse peritoneal macrophage에 처리하여 면역자극을 유도한 후, NO 생성 및 cytokine 분비활성을 평가하였다. 그 결과 WGAR-CP의 NO생성은 저농도에서는 유의적인 활성을 보이지 않았으나, 50, $100{\mu}g/m{\ell}$에서 농도별로 유의적인 차이를 보였다. 또한 50, $100{\mu}g/m{\ell}$ 용량에서 IL-6 생성을 농도 유의적으로 증가시켰고, 10, $50{\mu}g/m{\ell}$에서 농도 유의적으로 IL-12의 생성을 증가시켰다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, WGAR-CP는 자연면역계를 구성하고 있는 보체계와 macrophage의 활성인자로 작용할 수 있음이 확인되었고, WGAR-CP에 의해 활성화된 macrophage는 NO 및 IL-6, IL-12와 같은 염증성 cytokine의 분비를 유도함으로써 체내 면역기능을 증강시킬 수 있는 가능성이 있을 것으로 사료되었다.
Purpose : To investigate the effects of the lavender, lemon and eucalyptus oil mixture on the atopy dermatitis skin lesions induced on NC/Nga Mice by dinitrochlorobenzene (DNCB). Material and Method : For this purpose, we fabricated the oil mixture blending three essential oils (lavender, lemon, eucalyptus : ELL) with one carrier oil (jojoba) and apply it on the atopic dermatitis skin lesions of NC/Nga Mice. Atopic dermatitis in NC/Nga Mice was induced by DNCB treatment on the dorsal skin of mice for 8 weeks. The mixture of ratio of each essential oil drop was 1 (eucalyptus) : 2 (lemon) : 2 (lavender) and this mixture was blended with jojoba oil 50ml (0.025%). The ELL-ointment was supplied for 8 weeks. We evaluated the effects of ELL on cell viability of mouse lung fibroblast, clinical skin features and severity, the level of serum Immunoglobulin (Ig) E & Ig G1, Interleukin (IL)-4, IL-13 and Interferon (IFN)-$\gamma$. Results : ELL showed safety on the cell viability of mouse lung fibroblast compared with control group. The cell viability was measured by SRB method. The effects of ELL on clinical skin features and severity in DNCB-induced dermatitis model of NC/Nga mice was significant compared with control group. EEL also showed significant effects on clinical symptom score compared with control group. Serum IgE & IgG1 level and development of atopy dermatitis skin lesions were evaluated. Serum IgE & IgG1 production was significantly down-regulated in EEL group compared with control group. ELL also down-regulated the levels of IL-4 and IL-13, and up-regulated the level of IFN-$\gamma$ compared with control group significantly. Conclusion : ELL was effective on atopy dermatitis by modulating Th2 related factors.
Objective : Oriental medicines have been combined oriental medical theory which based on the seven modes of emotions. Notopterygium incisum (N. incisum) and Clematis manshurica (C. manshurica) have been used as an anti-rheumatic and analgesic medicine for the treatment of rheumatism, headache, cold, etc. In this study, we evaluate the synergistic anti-inflammatory effect of N. incisum and C. manshurica. Method : To evaluate the synergistic anti-inflammatory effect of a herbal mixture N. incisum and C. manshurica, we examined the changed ear thickness in 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate (TPA)-induced mouse ear edema model after topical application of herbal mixture. In addition, the levels of markers for inflammation, such as tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, prostaglandin $G_2$ ($PGE_2$), and nitric oxide (NO) were measured by ELISA assay and Griess reagent in lipopolysaccharide-stimulated Raw 264.7 cells. Results : Our results showed that aqueous extracts of N. incisum and C. manshurica combination significantly inhibited the mouse ear edema induced by TPA. Moreover, the aqueous extracts of N. incisum and C. manshurica combination exhibited synergistic effects in down-regulating TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, $PGE_2$ level, but not NO. Conclusions : This study suggested that combined treatment of N. incisum and C. manshurica, based on seven methods in prescription compatibility, has a synergistic effect in down-regulating inflammatory response both in vitro and in vivo models.
본 연구에서는 생 들깨와 볶은 들깨의 염증매개물질 감소 효과를 RAW 264.7 대식 세포와 궤양성 대장염이 유도된 마우스를 이용하여 비교 분석하고자 하였다. LPS 처리에 의해 활성화된 RAW 264.7 대식세포에서 들깨의 에탄올 추출물은 볶음 여부와는 관계없이 NO, IL-6, TNF-${\alpha}$와 같은 염증매개물질 수준을 유의적으로 감소시키는 효과(대조군 대비 45-85% 수준)가 있었다. 반면 DSS 처리에 의해 궤양성 대장염이 유도된 마우스 모델에서는, 볶은 들깨 식이(1%)만이 대장의 $PGE_2$, $LTB_4$와 같은 염증매개물질 수준을 유의적으로 감소시키는 효과(각각 대조군 대비 34%, 58% 수준)가 있었다. 이와 같은 연구 결과를 종합하여 보면, 볶은 들깨는 in vitro 항염성 뿐 아니라 in vivo 항염성을 가지는 것으로 판단된다. 앞으로 들깨의 볶음 과정에서 생성된 항염 기능 성분들을 분리 동정하는 연구와 볶은 들깨의 항염성과 관련된 기전에 관한 후속 연구가 지속적으로 이루어진다면 볶은 들깨가 대장염을 포함한 여러 염증관련 질병 예방에 유용한 소재로 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
보리는 높은 비율로 식이섬유를 함유하고 있어, 일반적으로 영양학적으로는 전곡 형태로의 섭취가 추천되고 있지만, 조직감과 소화율을 고려하여 발효물 형태의 소비가 바람직한 것으로 판단되고 있다. 본 연구는 효소당화 후, 효모 및 유산균 발효를 거쳐 조제한 보리발효물로부터 조다당 BF-CP를 분리하고, 대식세포에 대한 면역증강 효과 및 세포 내 신호전달을 규명하여 기능성 소재로의 이용방안을 모색하기 위해 계획되었다. BF-CP 획분의 일반화학적 특성을 분석한 결과 70.7% 글루코스 11.4% 자일로스 및 9.0% 아라비노스를 포함하여 91.1%의 중성당으로 이루어진 중성다당이었다. BF-CP는 RAW 264.7 대식세포주에서 농도의존적으로 IL-6, $TNF-{\alpha}$와 같은 사이토카인 및 NO의 생산능을 유도하는 등 높은 대식세포 활성능을 나타냈다. 또한 qPCR 분석을 통해, BF-CP 획분을 대식세포주에 처리하였을 때, 처리 농도에 비례하여 IL-6, $TNF-{\alpha}$ 및 iNOS의 mRNA 유전자 발현을 증가시킴을 확인할 수 있었다. 한편 Western blot을 활용한 신호전달 단백질 추적실험에서 BF-CP 획분을 대식세포주에 처리하였을 때, JNK, ERK 및 p38과 같은 MAPK 경로와 $NF-{\kappa}B$ 경로의 관련 단백질을 인산화시킴이 확인되었으며 그 활성은 BF-CP 농도에 의존적이었다. 이상의 결과로부터 보리발효물 유래 다당 BF-CP는 MAPK와 $NF-{\kappa}B$ 경로를 통해 대식세포를 활성화시키며, 이를 통하여 NO, IL-6 및 $TNF-{\alpha}$와 같은 면역활성화 관련 물질의 생산을 높은 비율로 유도시킨다는 것을 최종 확인할 수 있었다.
Li, Zheji;Yi, Ganfeng;Yin, Jingdong;Sun, Peng;Li, Defa;Knight, Chris
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제21권2호
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pp.252-261
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2008
Two experiments were conducted to compare the effects of feeding organic acids and antibiotic growth promoters in weaned pigs. In Exp. 1, 96 nursery pigs (Large White$\times$Landrace; initial weight $7.80{\pm}0.07kg$) were randomly allotted into one of four dietary treatments. Pigs in treatment 1 were fed a complex starter diet. Treatments 2 to 4 were the same as treatment 1 but supplemented with antibiotics (200 ppm chlortetracycline plus 60 ppm Lincospectin), 0.5% potassium diformate or 0.5% dry organic acid blend ACTIVATE Starter DA (ASD). During the 4-week post-weaning period, pigs fed ASD or antibiotics had better gain (p = 0.03) and feed efficiency (p = 0.04) than pigs fed the control diet. On d 14 post-weaning, pigs fed the control diet had the lowest fecal lactobacilli count among all dietary treatments (p = 0.02), whereas pigs fed ASD or antibiotics had a trend for lower fecal E. coli count compared to the control pigs (p = 0.08). Serum insulin-like growth factor-1 (IGF-1) of pigs fed ASD did not differ from pigs fed the control diet (p>0.05) at d 14 after weaning. In Exp. 2, 24 weaned pigs (Large White$\times$Long White; initial weight $5.94{\pm}0.33kg$) were allotted into four groups and housed individually. Pigs were fed a control diet or diets supplemented with antibiotics (100 ppm colistin sulfate, 50 ppm Kitasamycin plus 60 ppm Olaquindox), 0.5% or 1% ASD. All pigs were orally challenged with E. coli $K88^+$ on d 5. During d 5 to 14 after challenge, pigs fed antibiotics, 0.5% or 1% ASD had better gain (p = 0.01) and feed efficiency (p = 0.03) than pigs fed the control diet. On d 14, compared to the control pigs, pigs fed 0.5% ASD had higher lactobacilli in the duodenum and pigs fed 1% ASD and antibiotics had a trend for higher lactobacilli in the ileum (p = 0.08). Pigs fed antibiotics, 0.5% or 1% ASD diets tended to have decreased ileal E. coli count compared to those fed the control diet (p = 0.08). Serum interleukin-6 and cortisol and digesta pH values were not affected by treatment or time. These results indicate that feeding ASD can improve the growth performance of weaning pigs, mainly via modulating intestinal microflora populations without affecting gastrointestinal pH or immune indices.
A rise in the occurrence of allergic diseases is attributed to the dysregulated balance of type 1/type 2 immunity, where type 2 T-helper (Th2) cells predominate over type 1 T-helper (Th1) cells, leading to an abnormally increased production of IgE in response to unharmful antigens. Kimchi, a traditional Korean fermented food, is a rich source of beneficial lactic acid bacteria. In this study, we investigated the ability of Enterococcus faecium FC-K derived from kimchi to induce type I immunity in the presence of Th2 polarizing conditions in vitro and in vivo. Stimulation of mouse peritoneal macrophages with E. faecium FC-K induced the production of tumor necrosis factor alpha, interleukin (IL)-6, and IL-12. Under the in vitro Th2 conditions in which splenic T cells were activated in the presence of IL-4, E. faecium FC-K enhanced the ability of T cells to produce interferon $(IFN)-{\gamma}$. Using the ovalbumin (OVA)-induced allergy model, male BALB/c mice receiving E. faecium FC-K reduced the serum level of total IgE, but not that of OVA-specific IgE. Furthermore, the population of activated splenic B cells during OVA immunization was decreased in E. faecium FC-K-treated mice, accounting for a reduction of total IgE in the serum. Restimulating splenocytes from OVA-immunized mice with OVA ex vivo resulted in an increased production of $IFN-{\gamma}$, with no effect on IL-4, in E. faecium FC-K-treated mice. These observations provide the evidence that E. faecium FC-K can be a beneficial probiotic strain that can modulate the Th2-mediated pathologic response.
The immunomodulatory effects of Aureohasidium pullulans SM-2001 exopolymers containing $\beta$-1,3/1,6-glucan were evaluated in cyclophosphamide (CPA)-treated mice. To induce immunosuppression, 150 and 110 mg/kg of CPA were intraperitoneally injected 3 days and 1 day, respectively, before beginning administration of the test material. Exopolymers were delivered subcutaneously or orally, four times, in a volume of 10 ml/kg at 12-h intervals beginning 24 h after the second CPA treatment. Changes in thymus and spleen weights, splenic amounts of tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-10, and numbers of CD3+, CD4+, CD8+, and TNF-$\alpha+$ thymus and spleen cells were monitored in CPA-treated mice. As a result of CPA treatment, dramatic decreases in the number of CD3+, CD4+, CD8+, and TNF-$\alpha+$ cells were detected in the thymus and spleen, along with decreases in thymus and spleen weights. In addition, splenic TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$, and IL-10 contents were also decreased on observation with flow cytometry. However, oral and subcutaneous treatments with exopolymers effectively reduced the immunosuppressive changes induced by CPA. Therefore, it is concluded that exopolymers of A. pullulans SM-2001 can effectively prevent immunosuppression through, at least partially, the recruitment of T cells and TNF-$\alpha+$ cells or enhancement of their activity, and can provide an effective component of prevention or treatment regimens for immunosuppression related to cancer, sepsis, and high-dose chemotherapy or radiotherapy.
Kim, Jong-Tae;Chung, Dong-Sup;Kwak, Seung-Won;Han, Young-Min;Park, Young-Sup;Kim, Moon-Chan
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제38권2호
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pp.126-131
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2005
Objective : The choice of tumor antigen for dendritic cell[DC]-loading has still been an unresolved problem in the DC-based vaccine strategies against malignant gliomas that has not been found well-characterized tumor specific antigens. In this study, we compare tumor-specific T cell response induced by glioma apoptotic body[GAB]-pulsed DCs to response induced by glioma cell lysate-pulsed ones quantitatively. Methods : DCs generated in the presence of granulocyte macrophage-colony stimulating factor and interleukin[IL]-4 from peripheral blood mononuclear cells[PBMCs] of HLA-A2 positive healthy donors were cultured. Each GABs and glioma cell lysate generated from HLA-A2 positive T98G glioblastoma cells were co-incubated with DCs. $CD8^+$ T lymphocytes isolated from PBMCs of same donors were cultured in media containing IL-2 and either stimulated by GAB- or lysate-pulsed DCs three times at a weekly interval. The interferon[IFN]-${\gamma}$ concentrations of each cell culture supernate were measured by enzyme immunoassay technique. Cytolytic activity of the generated cytotoxic $CD8^+$ T cells either stimulated with GAB- or lysate-pulsed DCs was determined by a standard 4-h $^{51}Cr$-release assay. Results : IFN-${\gamma}$ production and cytolytic activity of effector T cells stimulated by GAB-pulsed DCs were significantly higher than those of T cells stimulated by lysate-pulsed ones. Conclusion : These results indicate the choice of antigen is a critical determinant in the induction of antitumor immunity against malignant glioma. Antigen preparations from GABs represent a promising alternative to glioma cell lysate in DC-based glioma vaccine strategies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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