본 연구에서는 천연 항균제 CFSE를 이용하여 적절한 온도 하에서 당근과 시금치의 저장성 향상에 대한 효과를 보았다. 먼저, $70^{\circ}C$ 및 $90^{\circ}C$에서의 당근과 시금치의 열처리에 대한 영향과 아울러 GFSE 첨가시의 효과에 대한 예비 실험을 실시한 결과, 당근과 시금치의 경우 CFSE첨가에 관계없이 $70^{\circ}C$에서 2 분간 열처리하였을 때 비교적 정상적인 색상과 texture유지 및 미생물의 생육억제 가능성을 나타내었다. 이들 예비실험으로부터 이후 열처리는 $70^{\circ}C$에서 고정하고 GFSE의 농도별 영향을 실시한 결과, GFSE를 10 ppm 이상 첨가한 경우 당근이나 시금치 모두 $4^{\circ}C$에서 저장 17일까지 호기성세균 및 yeast의 성장을 억제하는 효과를 보였으며 특히 50 ppm 이상에서는 뚜렷한 억제 효과를 보였다. 당근과 시금치의 다양한 농도의 GFSE 첨가와 아울러 $70^{\circ}C$ 2 분간 처리는 이미 1차 실험에서와 같이 색상 및 조직의 연화에는 영향이 없었다. 그러므로 잔류독성 문제가 대두되고 있는 화학 항균제가 아닌 천연 항균제 GFSE를 활용한 과일과 채소류의 저장성을 높인 상품을 개발함으로서 소비자들에게 호응을 얻을 수 있는 식품으로써의 개발이 가능할 것이다.
말의 뇌화연증(equine leukoencephalomalacia)과 돼지의 폐수종(porcine pulmonary edema)은 Fusarium에 오염된 옥수수로 인하여 발생되는 것으로 추정되어 왔다. 1988년에 F moniliforme에서 2차 대사산물인 fumonisin $B_1(FB_1)$이 동정되면서 오염된 옥수수와 순수 분리된 $FB_1$으로 두질병이 실험적으로 재현되었고, 말과 돼지 이외의 다른 가축에 대해서도 독성 연구가 진행되고 있다. fumonisins(FBs)는 모든 종에서 간에 독성을 나타내나 종에 따라 주요 독성 장기가 각기 다름이 밝혀지고 있다. FB의 독성 기전에 대해서는 잘 알려지지 않았으나 FB가 sphingolipid 생성과정을 차단함으로써 장기 및 혈중에 sphinganine(SA) : sphingosine(SO)를 증가시키는 것으로 알려졌다. 이는 증가된 SA : SO가 FB 독성의 진단기준이 될 수 있음을 시사하는 것이다. 최근 진행 중인 연구에 의하면, 저용량의 $FB_1$ 급식 투여가 돼지에서 혈중 입자(blood-born particle)에 대한 폐혈관 대식 세포(pulmonary intravascular macrophage)의 탐식 능력을 저하시켜, 세균 감염에 대한 감수성이 증가될 수 있음을 시사하고 있다. Fusarium 속균은 전세계적으로 생산되는 옥수수에서 발생되고 있으며, 우리나라는 사료에 사용되는 옥수수의 절대량을 수입에 의존하고 있는 점을 고려할 때, 허용기준 및 무해용량 등에 대한 관리가 절실하다. 이 논문에서는 최근 연구된 FB에 의한 가축 독성에 대하여 기술하고자 한다.
Background: Sepsis still has a high mortality rate despite adequate supportive care. Newer therapeutic modalities have been developed but they have generally ended in failure. Recently, insulin was reported to have an anti-inflammatory effect by inhibiting the $I{\kappa}B/NF-{\kappa}B$ pathway, and may have therapeutic potential in sepsis. However, the precise mechanism of the anti-inflammatory effect of insulin is unclear. This study examined the role of insulin in activating $I{\kappa}B/NF-{\kappa}B$ in macrophage. Methods: Raw 264.7 cells, a murine macrophage cell line, were used in this experiment. Western blotting using $I{\kappa}B$ Ab and phosphor-specific $I{\kappa}B$ Ab was performed to evaluate the degradation and phosphorylation of $I{\kappa}B$ cells. For the $I{\kappa}B$ Kinase (IKK) activity, an immune complex kinase assay was performed. The level of interleukin-6 (IL-6) was measured by ELISA to determine the level of proinflammatory cytokine. Results: $I{\kappa}B{\alpha}$ degradation began 30 min after lipopolysaccharide (LPS) treatment. However, an insulin pretreatment suppressed the $I{\kappa}B{\alpha}$ degradation caused by the LPS treatment. The phosphorylation of $I{\kappa}B{\alpha}$ and IKK activity was also inhibited by the insulin pretreatment. Finally, the insulin pretreatment showed a tendency to suppress the induction of IL-6 by LPS. Conclusion: Insulin might have an anti-inflammatory effect though partial inhibition of the $I{\kappa}B/NF{\kappa}B$ pathway in macrophage cell lines.
Objectives: Preservatives are commonly used in pharmaceuticals, cosmetics and other products to extend the expiration date and prevent the growth of microorganisms. Preservatives are generally effective in controlling mold and inhibiting yeast growth, and against a wide range of bacterial attacks as well. They also adversely affect the quality of sperm and cause precocious puberty in children. This study was performed to analyze seven preservatives used in pharmaceuticals and personal care products. Methods: Five kinds of pharmaceuticals and personal care products (PPCPs) were examined for analysis with a high performance liquid chromatography-diode array detector. Each sample was homogenized and the targeted compounds were extracted with methanol. The suspended particulate was removed by syringe filter. Next, the sample was injected into an HPLC system. The separation of the seven preservatives was achieved with a C18 column and gradient mode. The accuracies were between 73% and 120% and precision was lower than 11.58% (RSD). Results: All of the calibration curves showed good linearity with a coefficient of determination ($r^2$) over 0.999. Among the PPCP samples, the detection rate of preservatives was 32.5% for pharmaceuticals, 44.8% for toothpaste, 76.9% for mouthwash, 40.0% for body lotion and 56.0% for wet tissues. The average concentrations of the preservatives in PPCPs were BA 1141.0 mg/kg, MP 709.8 mg/kg, EP 624.9 mg/kg, PP 216.9 mg/kg, BP 167.8 mg/kg, and TCS 538.2 mg/kg. The most frequently detected preservatives in pharmaceuticals and personal care products were BA, MP and PP. The concentrations of preservatives exceeded Korean regulatory standards in 11 samples of medicines, three of mouthwash and two of body lotion. Conclusion: We found that most of the PPCP samples contained various preservatives. It is necessary to identify which preservatives were used and to determine the level of preservatives in PPCPs and to assess the health risk to susceptible populations such as children.
Tumors have evolved numerous mechanisms by which they can escape from immune surveillance. One of these is to produce immunosuppressive cytokines. Transforming growth factor-${\beta}$(TGF-${\beta}$) is a pleiotropic cytokine with a crucial function in mediating immune suppression, especially in the tumor microenvironment. TGF-${\beta}$ produced by T cells has been demonstrated as an important factor for suppressing antitumor immune responses, but the role of tumor-derived TGF-${\beta}$ in this process is poorly understood. In this study, we demonstrated that knockdown of tumor-derived TGF-${\beta}$ using shRNA resulted in dramatically reduced tumor size, slowing tumor formation, prolonging survival rate of tumor-bearing mice and inhibiting metastasis. We revealed possible underlying mechanisms as reducing the number of myeloid-derived suppressor cells (MDSC) and $CD4^+Foxp3^+$ Treg cells, and consequently enhanced IFN-${\gamma}$ production by CTLs. Knockdown of tumor-derived TGF-${\beta}$ also significantly reduced the conversion of na$\ddot{i}$ve $CD4^+$ T cells into Treg cells in vitro. Finally, we found that knockdown of TGF-${\beta}$ suppressed cell migration, but did not change the proliferation and apoptosis of tumor cells in vitro. In summary, our study provided evidence that tumor-derived TGF-${\beta}$ is a critical factor for tumor progression and evasion of immune surveillance, and blocking tumor-derived TGF-${\beta}$ may serve as a potential therapeutic approach for cancer.
Objective: Apoptosis of ovarian granulosa cells (GCs) affects mammalian follicular development and fecundity. This study aimed to explore the regulatory relationship between microRNA-26a (miR-26a) and the 3β-hydroxysteroid-Δ24-reductase gene (DHCR24) gene in porcine follicular granular cells (pGCs), and to provide empirical data for the development of methods to improve the reproductive capacity of pigs. Methods: The pGCs were transfected with miR-26a mimic, miR-26a inhibitor and DHCR24-siRNA in vitro. The cell apoptosis rate of pGCs was detected by the flow cytometry. The secretion levels of estradiol (E2) and progesterone (P) in pGCs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. Double luciferase validation system was used to detect the binding sites between miR-26a and DHCR24 3'-UTR region. Qualitative real-time polymerase chain reaction and Western blotting were used to verify the DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs, respectively, after transfecting with miR-26a mimic and miR-26a inhibitor. Results: Results showed that enhancement of miR-26a promoted apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. Meanwhile, inhibition of DHCR24 also upregulated the Caspase-3 expression, reduced the BCL-2 expression, promoted pGCs apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. There were the binding sites of miR-26a located within DHCR24 3'-UTR. Up-regulation of miR-26a inhibited DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs. Conclusion: This study demonstrates that miR-26a can promote cell apoptosis and inhibit E2 and P secretion by inhibiting the expression of DHCR24 in pGCs.
Rue잎을 물과 에탄올로 추출하여 항균활성과 생리활성 효과를 탐색하였다. 그 결과 각 추출물의 총페놀 함량은 물 추출물에서 16.39 mg/g 알콜 추출물에서 17.07 mg/g로 나타났다. Helicobacter pylori에 대한 disc 방법에서 $200\;{\mu}g/mL$의 폴리페놀 첨가 시 물과 알콜 추출물은 각각 12 mm, 13 mm의 직경을 나타내어 항균활성이 있음을 알 수 있었으며, 2-fold dilution 방법으로 항균활성 검증 결과 물 추출물보다 알콜 추출물에서 더 높은 항균활성을 나타내었다. 물과 알콜 각 추출물의 ABTS radical decolorlization과 antioxidant protection factor(PF)를 살펴 본 결과 ABTS는 물 추출물이 약 $96\%$로 높은 저해율을 나타내었으며 PF는 알콜 추출물에서 1.2로 물 추출물 0.8보다 높게 나타났다. DPPH에 대한 전자공여능은 물 추출물이 89.38로 알콜 추출물 $86.90\%$보다 높게 나타났으며 활성 산소중 지방산화를 일으키는데 주요한 역할을 하는 hydroxyl radical에 대한 각 추출물의 영향은 알콜 추출물이 binding능력이 탁월하여 물 추출물에 비해 낮은 TBARS 값을 나타내었다. Angiotensin converting enzyme과 xanthine oxidase 저 해 활성은 알콜 추출물이 물 추출물보다 더 높게 나타났고, HPLC에 의한 페놀 분석 결과 rosemarinic acid의 함량이 알콜 추출물에서 가장 많았으며 다음으로 qurcetin 함량이 높게 나타났다.
선행연구에서 김치발효 후기의 우점종으로 알려진 Lactobacillus sakei의 생육을 저해하는 Leuconostoc 속 23균주와 Weissella 속 45 균주를 김치로부터 분리, 동정하였다. 발효 후기까지 생존할 수 있는 김치발효용 hetero 발효형 종균 선발을 위하여 이들 균주에 대한 내산성을 평가한 결과, Lc. mesenteroides CK0128, W. cibaria CK0633, W. cibaria KK0797 균주가 acetic acid와 lactic acid 혼합용액을 이용하여 pH를 4.3으로 조정한 MRS broth에서 상대적으로 높은 생존율을 보였고, 다량의 세포 외 다당류를 생산하였다. 세균주가 생산하는 항균물질의 분자량은 3,000 Da 이하로 추정되며 Staphylococcus aureus와 Lb. sakei에 대한 생육저해를 나타내었다. 분획한 3,000 Da 이하의 조항균물질 모두가 $121^{\circ}C$, 15분의 열처리에도 항균활성을 유지함으로써 항균물질의 열에 대한 높은 안정성이 확인되었다. pH의 감소에 따른 항균활성의 증가가 pH 5 이하의 산성조건에서 확인되어, 이들 항균물질은 pH 5 이하의 산성조건에서 활성을 갖는 것으로 추정된다. ${\alpha}$-amylase, lipase, pepsin, proteinase K 처리가 항균활성에 아무런 영향을 미치지 않는 것으로 보아 이들 균주가 생산하는 항균물질은 탄수화물, 지질을 포함하지 않으며, 비단백질성 물질로 추정된다. 또한, 선발균주가 생산하는 비단백질성 항균물질은 식중독균의 생육을 효과적으로 저해하였다.
식물 유래 naphthoquinone계 juglone의 신규 제초제 작용점 KAPAS에 대한 in vitro 및 in vivo에서의 활성 평가를 통해 천연물 유래 제초제로서의 가능을 검토하였다. Juglone은 농도의존적인 반응으로 KAPAS를 효과적으로 저해하였으며, 50% 저해농도는 $9.5{\mu}M$이었다. 바랭이(Digitaria sanquinalis)에 대한 경엽처리에서 juglone 125, 250, 500 및 $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 농도에서의 활성정도는 각각 70, 95, 100 및 100%이었다. 또한, 8종의 화본과 및 광엽잡초에 대한 juglone 2,000 및 $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 농도에서의 살초력은 완전하였으며(100%), $500{\mu}g\;mL^{-1}$에서도 90~100%이었다. Juglone을 처리했을 때 나타나는 주요 증상은 고사(desiccation) 또는화염상(burndown)이었다. Juglone 처리에 의한 전해물질 누출은 광조건에 관계없이 농도의존적으로 일어났으나, 엽록소 함량 감소 정도는 광조건에서도 경미한 수준이었으며, 암 조건에서는 전혀 일어나지 않았다. Juglone에 의해 억제되었던 애기장대 종자의 발아율은 biotin 공급에 의해 뚜렷하게 회복되었다. 이상의 실험에 결과에 의하면 천연 naphthoquinone계 juglone은 신규 제초제 작용점 KAPAS를 효과적으로 저해하는 친환경적인 천연물 유래 제초제로서의 가능성을 확인하였다.
목적 : PAN-induced nephrosis 쥐 모델에서 HMG-CoA reductase inhibitor로 작용하여 콜레스테롤을 낮추는 약제로 알려진 atorvastatin을 투여함으로써, 지질대사에 대한 효과와 지질대사의 변화가 쥐 모델의 신장 변화에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 수컷 Sprague-Dawley 흰쥐를 사용하여 대조군(I군), PAN 단독 투여군(II군), PAN과 atrovastatin 동시 투여군(III군) 3군으로 나누었으며, PAN은 체중 100 gm 당 2 mg을 첫 피하 주사한 후 1, 3, 5, 7, 9주에 반복하여 피하 주사하였으며, atorvastatin은 체중 100 gm당 5 mg을 물에 녹여 매일 경구 투여하였다. 실험 개시 후 11주에 24시간 소변과 혈액을 채취한 다음 신장을 적출 하였으며, 소변의 protein과 creatinine 그리고 혈청의 albumin, BUN, creatinine, lipid profiles를 측정하고, 신장의 형태학적 변화를 관찰하였다. 결과 : 혈청 총 콜레스테롤은 II군이 $291{\pm}173\;mg/dL$, III군이 $167{\pm}72\;mg/dL$, LDL은 II군이 $57{\pm}53\;mg/dL$, III군이 $27{\pm}12\;mg/dL$로 II군 보다 III군에서 감소하였으나 통계학적으로 유의하지는 않았다. 광학 현미경 검사상 사구체 경화의 빈도는 II군이 26.2%, III군이 13.3%로 II군보다 III군에서 적게 나타났다. 결론 : Atorvastatin을 puromycin과 같이 투여한 경우 총 콜레스테롤과 LDL을 낮추었으며 사구체 경화의 빈도도 감소시킨 것으로 보아 고지혈증이 사구체 경화성 변화에 중요한 원인 중의 하나로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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