본 연구에서는 ursolic acid의 위의 보호효과를 위한 실험을 실시하였다. 위장 질병에 대한 ursolic acid의 효과를 확인하기 위해서 급성, 만성위염은 각각의 HCl ethanol과 indomethacin에 의해 유도된 위염 동물 모델을 사용하여 관찰하였다. 대표적인 공격인자인 위산에 관해서는 PPI activity를 통해서 확인하였고, 위의 손상에 대한 보호인자에 관해서는, $PGE_2$를 정량적으로 분석하였다. 항균활성 실험은 만성위염, 위궤양, 위암에 원인인자로 잘 알려진 H. pylori로 실험하였다. AGS cell를 이용하여 DAPI 염색, Flow cytometry assay를 통하여 ursolic acid가 위암세포의 apoptosis에 관여하는지를 확인하였다. 그 결과 ursolic acid는 HCl ethanol과 indomethacin에 의해 유도된 급성, 만성에 대한 위손상을 억제하였다. Ursolic acid는 위산분비의 마지막 단계인 위염분비효소인 proton pump를 억제시킴으로써 산의 분비를 억제하였다. 그리고 ursolic acid는 위 점막의 보호인자인 $PGE_2$의 농도가 증가함으로써 위 점막 보호 효과를 확인하였다. 또한 ursolic acid는 공격인자인 H. pylori colonization을 억제하였다. DAPI를 이용한 핵 염색에서, 대조군과는 달리, 핵 형상의 변형과 함께 수축 된 세포 또는 염색질의 응축현상이 관찰되었다. Flow cytometry assay에서 ursolic acid에 의해 apoptosis가 증가하는 것을 확인 하였다. 이를 통하여 ursolic acid는 위 손상에 대한 방어 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
Kwon, Hyuk-Woo;Shin, Jung-Hae;Cho, Hyun-Jeong;Rhee, Man Hee;Park, Hwa-Jin
Journal of Ginseng Research
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제40권1호
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pp.76-85
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2016
Background: Binding of adhesive proteins (i.e., fibrinogen, fibronectin, vitronectin) to platelet integrin glycoprotein IIb/IIIa (${\alpha}IIb/{\beta}3$) by various agonists (thrombin, collagen, adenosine diphosphate) involve in strength of thrombus. This study was carried out to evaluate the antiplatelet effect of total saponin from Korean Red Ginseng (KRG-TS) by investigating whether KRG-TS inhibits thrombin-induced binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$. Methods: We investigated the effect of KRG-TS on phosphorylation of vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) and dephosphorylation of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) and Akt, affecting binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$, and clot retraction. Results: KRG-TS had an antiplatelet effect by inhibiting the binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$ via phosphorylation of VASP ($Ser^{157}$), and dephosphorylation of PI3K and Akt on thrombin-induced platelet aggregation. Moreover, A-kinase inhibitor Rp-8-Br-cyclic adenosine monophosphates (cAMPs) reduced KRG-TS-increased VASP ($Ser^{157}$) phosphorylation, and increased KRG-TS-inhibited fibrinogen-, and fibronectin-binding to ${\alpha}IIb/{\beta}3$. These findings indicate that KRG-TS interferes with the binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$ via cAMP-dependent phosphorylation of VASP ($Ser^{157}$). In addition, KRG-TS decreased the rate of clot retraction, reflecting inhibition of ${\alpha}IIb/{\beta}3$ activation. In this study, we clarified ginsenoside Ro (G-Ro) in KRG-TS inhibited thrombin-induced platelet aggregation via both inhibition of $[Ca^{2+}]_i$ mobilization and increase of cAMP production. Conclusion: These results strongly indicate that KRG-TS is a beneficial herbal substance inhibiting fibrinogen-, and fibronectin-binding to ${\alpha}IIb/{\beta}3$, and clot retraction, and may prevent platelet ${\alpha}IIb/{\beta}3$-mediated thrombotic disease. In addition, we demonstrate that G-Ro is a novel compound with antiplatelet characteristics of KRG-TS.
Calf diarrhea is a disease experienced by almost all of calves after birth and is one of the representative causes of damage to farmers due to mass mortality and of economic losses to them by inhibiting normal growth. In this study, we conducted quick detection of etiologic agents of diarrhea by using a rapid diagnostic kit to multiply diagnose antigens of five etiologic agents of calf diarrhea (rotavirus, coronavirus, Escherichia coli, Cryptosporidium, Giardia) in Hanwoo (Korean native cattle) calves. When the positive antigen proportion of the calf diarrheal feces for each farm was analyzed, rotavirus, coronavirus, Escherichia coli, Cryptosporidium, and Giardia showed antigen positive rates of 0~67%, 0~20%, 0~60%, 0~20%, and 0~67%, respectively. With regard to the antigen positive rate by age in days after birth, 1-week-old calves showed the antigen positive rate of 20% in rotavirus and 20% in Giardia, and 2-week-old calves showed that of 50% in rotavirus. In addition, 4-week-old calves showed the antigen positive rate of 10% in rotavirus, 10% in coronavirus, 10% in Escherichia coli, and 30% in Giardia, and 8-week-old calves showed the antigen positive rate of 17% in coronavirus, 50% in Escherichia coli, 17% in Cryptosporidium, and 33% in Giardia. Based on the results of this study, the etiologic agents of diarrhea in Hanwoo calves for each farm are widely distributed. Although younger than 2-week-old calves were strongly positive for rotavirus, older than 4-week-old calves were highly positive for Giardia and Escherichia coli. In conclusion, we considered that a rapid diagnostic kit is an effective method for quick detection of etiologic agents and would be helpful for cattle farmers and veterinarians to select appropriate therapeutic method.
In present study possible hypolipidemic effects of garlic were investigated in an experimental model which consisted of 4 groups of Wistar rats(three weeks old): CO group received a basal diet(as a standard diet) contained 6.3% of corn oil. LO group was taken the experimental diet in which only 6.3% corn oil in basal diet was substituted by 12.6% of lard oil. So the experimental diet was somewhat high saturated fat diet. LG1 group was treated orally with garlic juice as 1% of raw garlic in the diet together with the same diet as the diet for LO group. LG2 group was taken 2% of garlic under the same dietary condition as that of LG1 group. The rat body weights prior and posterior to the experimental period were measured and the amount of the experimental dietary intake was determined at every 3 day interval. After the experimental dietary period of 30 days the blood obtained from all the sacrificed rats were analyzed for the biochemical parameters. Over the one month period of experiment there was no abnormality or apparent change in appearance and activity or diet consumption in all experimental rat groups. LO group fed a diet rich in lard showed significantly increased body weight gain rate by 30% and also elevated levels of triglyceride, total cholesterol and LDL cholesterol by 29.9%, 27.4% and 62.3% respectively and no significant difference in the levels of HDL cholesterol, GOT, GPT, blood glucose and blood urea nitrogen as compared to those of control group. So it seemed that the high calorie diet in LO group mainly contributed to the significant increase in body weight gain rate and other biochemical parameters. In spite of 1% garlic treatment LG1 group had significantly increased body weight gain rate by 25.2%, levels of triglyceride, total choesterol and LDL cholesterol by 25.2%, 24.6% and 50.5% respectively as compared to control and LO group, and no increase in the levels of HDL cholesterol, blood glucose and blood urea nitrogen. At garlic 1% diet there was no hypolipidemic efficacy in rat serum. Under the treatment with garlic 2% in diet LG2 group showed significantly increased body weight gain rate by 19.7% as compared to control and elevated levels of GOT, GPT and BUN by 85.8~96.4%, 127~148% and 88% respectively as compared to control, but LG2 group had significantly reduced levels of triglyceride, total cholesterol and LDL cholesterol as compared to LOand LG1 group. In present study there were no significant change in HDL cholesterol and blood glucose value. In LG2 group GOT, GPT and blood urea nitrogen values were slightly increased presumably due to the inhibiting effects of garlic on the hepatic or renal function of rats. Nevertheless in this study garlic may have some demonstrable hypolipidemic effects in rat.
본 연구는 당근의 유기재배를 위하여 13개의 친환경 제제를 이용한 당근의 Alternaria spp.에 의한 종자전염성 병원균 방제 및 종자 발아율 조사를 수행하였다. 병원균의 생장억제 효과는 친환경 제제 별로 차이를 보였으며 효과가 좋은 7개 제제를 선발하였다. 7개 친환경제제별종자소독 후 발아율 조사에서는 식물 추출물인 탄저스탑과 랜드세이버 제제로 소독된 종자는 발아가 전혀 되지 않았으며 다른 친환경제제에서 소독된 종자의 발아율은 대조약제(Benlate-T)와 무처리 종자의 발아율과 비슷하였다. 탄저스탑과 랜드세이버를 제외시킨 감염율 조사에서는 A. radicina 균에 대한 해조류 추출물인 벨로퍼, A. dauci 균은 식물 추출물인 씨알-100으로 소독된 종자가 감염율이 10% 미만으로 대조약제와 비슷하거나 낮게 나타났다. 이들 제제는 뿌리길이 및 유묘검정 발아율 조사도 대조약제로 소독한 종자와 비슷하거나 우수한 것으로 조사 되었다. 본 시험의 결과로 보아 종자소독의 최적의 조건은 약제별 농도에 따라 다소 다르며 친환경 제제를 이용한 종자소독은 종자전염성 병원균을 효과적으로 억제할 수 있는 기술로 활용될 수 있다.
가식성 코팅 처리가 신선절단 배의 품질특성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 단백질 소재인 albumin, 탄수화물 소재인 dextrin, 지질 소재인 SPE(Sucrose polyester) 그리고 WSF(Whole soy flour)를 코팅재료로 선택하여 일정 농도로 조제한 코팅용액을 배를 dipping하여 코팅처리 한 후 $4^{\circ}C$에서 10일간 저장하면서 품질변화를 측정하였다. 중량감소율은 모든 코팅 처리구에서 대조구에 비해 억제되었다. 배의 경우는 2% dexrin 및 1% WSF 및 1% albumin 및 3% dextrin 코팅처리가 효과적이었다. $\Delta$E 값은 코팅처리 후 저장기간이 경과함에 따라 증가하는 경향이었으며 코팅재료에 따른 뚜렷한 차이를 나타나지 않았다. 과육의 경도는 1% 및 2% dextrin 처리구를 제외한 모든 처리구에서 대조구와 같이 높은 경도를 유지하고 있었으며 저장 5일 후에는 경도가 큰 폭으로 감소하는 경향이었다. 총 산도는 코팅처리 후 저장 중 감소하며 pH는 증가하는 경향이었으며 코팅처리에 의해 그 변과학 다소 억제되었으나 처리구에 따른 뚜렷한 차이는 나타나지 않았다. 가용성 고형분의 함량은 저장 기간동안 뚜렷한 변화가 없었으며 vitamin C의 함량은 큰 차이가 없었다. 코팅 재료의 농도에 따른 관능평가 결과 0.5% albumin, 4% dextrin, 1.0% SPE, 0.5% WSF 처리구가 좋은 성적을 나타내었으며 그 중 4% dextrin 처리구가 모든 항목에서 가장 좋은 평점을 기록하였다. 가식성 코팅 처리한배의 호흡속도를 측정한 결과 dextrin 및 WSF 처리구에서 이산화탄소의 발생량이 낮게 나타나 호흡이 억제되었다. 이상의 결과에서 배의 코팅에 사용한 소재 중 과실의 중량 및 갈변억제 측면에서는 2-3% dextrin, 당, 산 비타민 등 성분 및 경도유지 측면에서는 1% albumin, 그리고 관능적 특성에서는 4% dextrin 처리구가 가장 양호한 것으로 여겨졌다.
1. 본 연구에서는 공동배양 배지에 Agrobacterium 성장 억제물질인 silver nitrate를 첨가하고 변온과 여과지처리를 추가하여 공동배양 기간을 7일로 늘였으며, 또한 항산화 물질 3종을 공동배양 배지에 첨가하여 세포의 oxidative burst를 최소화함으로써 벼 형질전환효율을 높일 수 있었다. 또한 이 방법을 적용하여 형질전환이 어려운 품종을 대상으로도 형질전환 식물체를 작성할 수 있었다. 2. 벼 형질전환체의 70%에서 도입유전자 수가 1copy인 것으로 나타나, 적은 수의 유전자가 안정적으로 도입됨을 확인 하였다. 3. 이러한 결과를 바탕으로, 새로운 공동배양 방법을 사용하여 우수한 농업적 형질을 가진 벼 육종 소재 및 품종을 신속하게 개발할 수 있을 것으로 기대된다.
본 연구에서는 메탄의 생물학적 메탄올 전환에 관한 연구를 수행하였다. 바이오가스 중의 메탄은 메탄산화균의 methane monooxygenase (MMO)의 생물학적 촉매반응에 의해 산화되었으며, 인산염, NaCl, $NH_4Cl$, EDTA와 같은 methanol dehydrogenase (MDH)의 활성 저해제를 이용하여 MDH의 활성도를 저해함으로써 메탄올의 전환이 이루어졌다. 메탄산화균은 $35^{\circ}C$, pH 7, 인공 바이오가스($CH_4$ 50%, $CO_2$ 50%) / Air의 부피비가 0.4인 조건에서 메탄 산화 정도가 0.56 mmol로 최대로 나타났다. 인산염 40 mM, NaCl 50 mM, $NH_4Cl$ 40 mM, EDTA $150{\mu}m$ 이하일 때 저해제의 종류에 상관없이 메탄 산화율은 80% 이상을 달성하였다. 한편, 인산염 40 mM, NaCl 100 mM, $NH_4Cl$ 40 mM, EDTA $50{\mu}m$ 주입 시 각각 1.30, 0.67, 0.74, 1.30 mmol의 메탄이 산화되는 동시에 각각 0.71, 0.60, 0.66, 0.66 mmol의 메탄올이 최대로 생성되었다. 이때의 메탄올 전환율은 각각 54.7, 89.9, 89.6 및 47.8%였으며 최대 메탄올 생성 속도는 $7.4{\mu}mol/mg{\cdot}h$였다. 이로부터 대상 저해제로 MDH 활성도를 일반적으로 35% 저해 시에 메탄올 생산량이 최대인 89.9%까지 나타남을 알 수 있었다.
Zhu, Xi-Shan;Lin, Zi-Ying;Du, Jing;Cao, Guang-Xin;Liu, Gang
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권12호
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pp.4773-4780
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2014
Background: To investigate the effects of small interference RNA (siRNA) targeting BCR/ABL mRNA on proliferation and apoptosis in the K562 human chronic myeloid leukemia (CML) cell line and to provide a theoretical rationale and experimental evidence for its potential clinical application for anti-CML treatment. Materials and Methods: The gene sequence for BCR/ABL mRNA was found from the GeneBank. The target gene site on the BCR/ABL mRNA were selected according to Max-Planck-Institute (MPI) and rational siRNA design rules, the secondary structure of the candidate targeted mRNA was predicted, the relevant thermodynamic parameters were analyzed, and the targeted gene sequences were compared with BLAST to eliminate any sequences with significant homology. Inhibition of proliferation was evaluated by MTT assay and colony-formation inhibiting test. Apoptosis was determined by flow cytometry (FCM) and the morphology of apoptotic cells was identified by Giemsa-Wright staining. Western blotting was used to analyze the expression of BCR/ABL fusion protein in K562 cells after siRNA treatment. Results: The mRNA local secondary structure calculated by RNA structure software, and the optimal design of specific siRNA were contributed by bioinformatics rules. Five sequences of BCR/ABL siRNAs were designed and synthesized in vitro. Three sequences, siRNA1384, siRNA1276 and siRNA1786, which showed the most effective inhibition of K562 cell growth, were identified among the five candidate siRNAs, with a cell proliferative inhibitory rate nearly 50% after exposure to 12.5nmol/L~50nmol/L siRNA1384 for 24,48 and 72 hours. The 50% inhibitory concentrations ($IC_{50}$) of siRNA1384, siRNA1276 and siRNA1786 for 24hours were 46.6 nmol/L, 59.3 nmol/L and 62.6 nmol/L, respectively, and 65.668 nmol/L, 76.6 nmol/L, 74.4 nmol/L for 72 hours. The colony-formation inhibiting test also indicated that, compared with control, cell growth of siRNA treated group was inhibited. FCM results showed that the rate of cell apoptosis increased 24 hours after transfecting siRNA. The results of annexinV/PI staining indicated that the rate of apoptosis imcreased (1.53%, 15.3%, 64.5%, 57.5% and 21.5%) following treamtne with siRNAs (siRNA34, siRNA372, siRNA1384, siRNA1276 and siRNA1786). Morphological analysis showed td typical morphologic changes of apoptosis such as shrunken, fragmentation nucleus as well as "apoptotic bodies" after K562 cell exposure to siRNA. Western blot analysis showed that BCR/ABL protein was reduced sharply after a single dose of 50nmol/L siRNA transfection. Conclusions: Proliferation of K562 cells was remarkbly inhibited by siRNAs (siRNA1384, siRNA1276 and siRNA1786) in a concentration-dependent manner in vitro, with effective induction of apoptosis at a concentration of 50 nmol/L. One anti-leukemia mechanism in K562 cells appeared that BCR/ABL targeted protein was highly down-regulated. The siRNAs (siRNA1384, siRNA1276 and siRNA1786) may prove valuable in the treatment of CML.
우리나라에 자생하는 하늘나리(Lilium concolor var. parthneion)와 날개하늘나리(L. dauricum)를 소형 분화로 개발하기 위해 생장억제제의 줄기 신장 억제 및 개화촉진 효과를 구명하였다. 조직배양으로 얻어 포장에서 1차 비대시킨 후 생체중이 각각 5-7g과 3-4g인 인경을 각각 0, 25, 50과 $100mg{\cdot}L^{-1}$의 ancymidol, diniconazole과 uniconazole 수용액으로 침지, 분무 또는 관주처리 하였다. 하늘나리에 있어서는 uniconazole 침지처리가 초장을 가장 크게 감소시켰는데, 그 농도에 따라 10.2-18.5cm로 대조구에 비해 60.7-78.3% 억제되었으며, 개화율은 농도에 관계없이 100%였다. 날개하늘나리의 경우, diniconazole 침지처리에서 줄기 신장의 억제 효과가 가장 커서, 초장은 농도에 따라 3.2-7.0cm로 대조구에 비해 70.0-86.3%나 억제되었으며, 개화율은 대조구의 0%에서 8.3-18.2%로 향상되었다. 그리고 ancymidol $25-50mg{\cdot}L^{-1}$의 관주처리도 날개하늘나리의 줄기 신장억제와 개화 촉진에 효과적이었다. 따라서 하늘나리와 날개하늘나리의 인경을 이용한 소형 분화 생산에는 각각 uniconazole $50-100mg{\cdot}L^{-1}$ 침지, 그리고 diniconazole $25mg{\cdot}L^{-1}$ 침지 또는 ancymidol $25mg{\cdot}L^{-1}$ 관주처리가 적합하다고 판단된다. 단, 본 연구에 사용된 날개하늘나리의 인경은 크기가 너무 작아 분화로서 상품성이 없었기 때문에 좀더 큰 구근을 사용한 연구가 필요하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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