Human insulin is a hormone well-known to regulate the blood glucose level. Recombinant preproinsulin, a precursor of authentic insulin, is typically produced in E. coli as an inactive inclusion body, the solubilization of which needs the addition of reducing agents such as $\beta$-mercaptoethanol. To make authentic insulin, recombinant preproinsulin is modified enzymatically by trypsin and carboxypeptidase B. The effects of $\beta$-mercaptoethanol on the formation of human insulin derivatives were investigated in the enzymatic modification by using commercially available human proinsulin as a substrate. Addition of 1 mM $\beta$-mercaptoethanol induced the formation of various insulin derivatives. Among them, the second major one, impurity 3, was found to be identical to the insulin B chain fragment from $Phe_1$ to $Glu_{21}$. Minimization of the formation of insulin derivatives and concomitant improvement of the production yield of human insulin were achieved by the addition of hydrogen peroxide. Hydrogen peroxide bound with $\beta$-mercaptoethanol and thereby reduced the negative effects of $\beta$-mercaptoethanol considerably. Elimination of the impurity 3 and other derivatives by the addition of over 10 mM hydrogen peroxide in the presence of $\beta$-mercaptoethanolled to a 1.3-fold increase in the recovery efficiency of insulin, compared with those for the case without hydrogen peroxide. The positive effects of hydrogen peroxide were also confirmed with recombinant human preproinsulin expressed in recombinant E. coli as an inclusion body.
Background : If different cost efficiency indexes were informed to the same clinic depending on the inclusion or exclusion of pharmacy cost, it may impair the reliability of provider-profiling system. This study aimed to investigate whether the omission of pharmacy cost affects cost-efficiency rankings in medical clinics. Methods : Data for ambulatory care cost at 23,112 medical clinics were collected from the claims database, which was constructed after review by the Health Insurance Review and Assessment Service (HIRA) of Korea in April 2007. We calculated two types of cost efficiency indexes by inclusion or exclusion of pharmacy cost for a medical clinic. The agreement between the decile rankings of the two indexes was also assessed using the weighted kappa statistic of Landis and Koch. Results : When the cost efficiency index for total cost including pharmacy cost was compared with the index for total cost excluding it, the agreement between the two indexes was only 55%. The agreements between the two indexes were relatively low within specialties which have larger pharmacy volume of total cost and lower correlation between total cost with or without pharmacy cost included than the average level of all the specialties. Conclusion : These results suggest that the omission of pharmacy cost may result in contradictory outcomes that may be confusing to a medical institution and may impair the reliability of provider-profiling systems. It is very important to standardize profiling criteria for the reliability of provider profiling system.
Recombinant immunotoxins are hybrid cytotoxic proteins designed to selectively kill cancer cells. A divalent immunotoxins, [B3(FabH1)-PE38]2, was constructed by recombining Fab domain of B3 antibody as a cell-targeting domain and Pseudo monas exotoxin A (PE) as a cytotoxic domain. Monoclonal antibody, B3, is the murine antibody (IgG1k) directed against Lewis Y-related carbohydrate antigens, which are abundant on the surface of many carcinomas. Fab fragment of this antibody was used in this study with the modified hinge sequence where last two cysteines out of three were mutated to serine. PE is a 66 kDa bacterial toxin that kills eukaryotic cells by inhibiting protein synthesis with ADP ribosylation of ribosomal elongation factor 2 (EF2). Fc region of B3 antibody was substituted with the truncated form of PE (38 kDa, PE38) on DNA level. [B3(FabH1)-PE38]2 was formed by disulfide bond between cysteines in the modified hinge region of B3(FabH1)-PE38. Each polypeptide for recombinant immunotoxins was overexpressed in Escherichia coli and collected as inclusion bodies. Each inclusion body was solubilized and refolded, and cytotoxic effects were measured. Divalent immunotoxins, [B3(FabH1)-PE38]2, had ID50 values of about 10 ng/mL on A431 cell lines and about 4 ng/mL on CRL1739 cell lines. Control immunotoxins, B3(scFv)-PE40, had ID50 values of about 28 ng/mL on A431 cell lines and about 41 ng/mL on CRL1739 cell lines. Divalent immunotoxins, [B3(FabH1)-PE38]2, had higher cytotoxic effects than B3(scFv)-PE40 control immunotoxins.
This study investigates the effects of the dietary inclusion of zinc oxide (ZnO) on the growth performance, apparent total digestibility, and the fecal scores of growing pigs fed a corn-wheat-based diet. In total, 84 crossbred (Landrace × Yorkshire × Duroc) growing pigs with an initial body weight of (20.86 ± 0.64 kg) (4 pigs·pen-1; 2 gilts and 2 barrows; 7 replications·treatment-1) were randomly assigned to three treatment groups based on body weight (BW) and sex in a three-week trial. The dietary treatments were as follows: TRT1 (CON [basal diet]), TRT2 (CON + 0.07% ZnO), and TRT3 (CON + 1% ZnO). Dietary ZnO supplementation significantly (p < 0.05) improved body weight gain (BWG) of growing pigs at weeks 2 and 3 compared to the control diet. In addition, dietary ZnO supplementation significantly (p < 0.05) increased the average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) at weeks 2, 3, and overall. However, the feed conversion ratio (FCR) remained unaffected throughout the trial. Regarding the total tract nutrient digestibility of nitrogen, dry matter was significantly improved with an increased level of ZnO supplementation. In addition, dietary supplementation of ZnO significantly reduced fecal scores in grower pigs at the initial period compared to the control diet. In summary, dietary inclusion of zinc oxide via supplementation improved growth performance, and total tract digestibility and reduced the fecal scores of growing pigs.
Several researchers have demonstrated that the rumen microbial community rapidly adapts to saponins and proposed interval feeding to prevent this rapid adaptation. An in vivo experiment was carried out to examine the effect of daily versus application every third day (interval feeding) of Sapindus rarak saponins (SE) on rumen fermentation end products, protozoal counts and nutrient digestibility. Thirty sheep were allocated into 5 groups. Sheep were fed daily or every third day with two levels of SE (0.48 and 0.72 g/kg body mass). One group received no saponin and served as control. All sheep received the same diet, a mixture of elephant grass and wheat pollard (65:35 w/w). Independent of the feeding regime and the level of inclusion, the addition of SE decreased protozoal counts and rumen ammonia concentrations (p<0.01). Microbial N supply and N retention were not affected by the high feeding regime. Daily feeding negatively influenced rumen xylanase and cellulase activity, but only when the high level of saponins was fed. However, these negative effects on rumen cell wall degradation were not reflected in decreasing total tract digestibility of the organic matter or the plant cell walls. Our results show that rumen microorganisms do not rapidly adapt to S. rarak saponins.
The objective of this study was to evaluate the quality characteristics of moringa powder enrichment in sponge cake. The developed product can be a promising inclusion in the functional foods. Moringa powder was added to sponge cake batter (in the ratios of 0, 3, 6, 9, 12% of the total flour), called MP3, MP6, MP9, and MP12 respectively. The effect of moringa supplementation on physical, chemical and sensory quality of cakes were evaluated and analyzed statistically using SPSS program. The pH of cake was decreased as the concentration of moringa powder added. The specific volume of cake samples decreased with increasing levels of moringa powder in the formulation. Colour measurements showed that lightness and yellowness were decreased with an increased level of moringa powder. But redness result revealed and increasing in redeness with the increasing morigna powder level, compared to the control sample. The results of texture profile analysis showed hardness, springness, cohesiveness of the moringa cake that were higher than control sample. In sensory evaluation, MP3 was selected as the most acceptable sample. In the conclusion, moringa powder was incorporated in the formulation to enrich sponge cakes and was suggested for development of functional foods.
플라이애쉬 대체량에 따른 변화, 양생방법이 미치는 영향 그리고 조기강도를 높이기 위해 첨가된 화학 혼화제가 시멘트-플라이애쉬 페이스트의 특징 및 콘크리트 강도에 미치는 영향을 알아보았다. 시멘트-플라이애쉬 페이스트의 압축강도는 시멘트로만 만들어진 페이스트보다 낮았으며, 플라이애쉬의 대체량이 증가할수록 강도차이가 증가하였다. 그러나 증기양생시 시멘트-플라이애쉬 페이스트는 수중양생시보다 압축강도가 증가하였으며, 특히 조기강도가 크게 향상되었다. 조기강도 증진을 목적으로 혼입한 활성화제($Na_2SO_4$)의 첨가는 시멘트-플라이애쉬 페이스트 조기강도를 증진시켰으며, 또한 $Na_2SO_4$와 플라이애쉬를 30% 함유한 플라이애쉬 콘크리트의 강도도 월등히 향상되었다.
The modeling of the mechanical behavior of quasi-brittle materials is still a challenge task, mainly in failure processes when fracture and plasticity phenomena become important actors in dissipative processes which occur in materials like concrete, as instance. Many homogenization-based approaches have been proposed to deal with heterogeneous materials in the last years. In this context, a computational homogenization modeling for concrete is presented in this work using the concept of Representative Volume Element (RVE). The material is considered as a three-phase material consisting of interface zone (ITZ), matrix and inclusions-each constituent modeled by an independent constitutive model. The Representative Volume Element (RVE) consists of inclusions idealized as circular shapes symmetrically and nonsymmetrically placed into the specimen. The interface zone is modeled by means of cohesive contact finite elements. The inclusion is modeled as linear elastic and matrix region is considered as elastoplastic material. A set of examples is presented in order to show the potentialities and limitations of the proposed modeling. The consideration of the fracture processes in the ITZ is fundamental to capture complex macroscopic characteristics of the material using simple constitutive models at mesoscopic level.
The need for refining dietary nutrient levels and limited information regarding Holstein steer and phosphorus supplementation led to the objective of examining the response of removing supplemental dietary phosphorus from a corn-based finishing diet offered to yearling Holstein steers. Two groups of yearling Holstein steers were utilized to study responses of increasing dietary phosphorus level during the finishing period. In Exp. 1, 96 Holstein steers (419 kg) were blocked into four weight groups. Dietary treatments included no additional phosphorus (NDC) or the inclusion of dicalcium phosphate (DCP) to achieve 0.30% phosphorus (P) in the complete diet. Daily gain, DMI and carcass traits were not different (p>0.05). Overall gain efficiency was slightly lower for NDC (p<0.05). Exp. 2 consisted of 78 Holstein steers (491 kg) blocked into two weight groups. Steers were harvested on d 84 and 112 d on test with carcass data collected following a 48-h chill. No differences (p>0.05) were detected for DMI, ADG, or gain efficiency. No differences (p>0.05) were detected in carcass characteristics in this experiment. Percent bone ash, calcium, P, and bending moment also did not differ among treatments (p>0.05). Removing supplemental phosphorus in the feedlot diet did not produce adverse effects on steer performance, carcass, or rib bone characteristics for yearling Holstein steers.
Ovarian cancer patients need a surveillance program for the detection of tumor progression after completion of treatment. The methods generally consist of history taking, physical examination, tumor marker monitoring and imaging. However, the details of recurrence detection with each method are not well defined. To clarify this issue, ovarian cancer patients who achieved complete or partial responses and developed tumor progression at the follow up time between January 2004 and December 2010 in University Hospital Chiang Mai, Thailand, were reviewed. Clinical data, CA 125 level and imaging results at the tumor progression time were recorded and analyzed. There were 144 ovarian cancer patients meeting the inclusion criteria with the mean age of 51 years and 62.5% of them were in an advanced stage. Complete response was achieved in 89 patients (61.8%) after primary treatment. The median progression free survival and overall survival were 15.5 months and 37.5 months, respectively. Abnormal symptoms presented in 49.3% of the studied patients and 59.7% developed physical examination abnormalities. In addition, CA 125 was elevated in 89.6% while in 74.3% of tumor progression was identified by CT-scan. Short treatment time period and a high level of CA 125 were significant independent prognostic factors in these patients. In conclusion, careful history taking, physical examination and monitoring of CA 125 levels are important methods for tumor progression detection in a surveillance program for epithelial ovarian cancer patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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