Thymidylate synthase (TS) catalyzes the transfer of a methyl group from methylenetetrahydrofolate to dUMP to form dTMP. It is a primary target in the chemotherapy of colorectal cancers and some other neoplasms. In order to obtain pure protein for analysis of structure and biological function, an expression vector TS-pET28b (+) was constructed by inserting wild-type human thymidylate synthase (hTS) cDNA into pET28b (+). Then an expression strain was selected after transformation of the recombined plasmid into Rosetta (DE3). Fusion protein with His-tag was efficiently expressed in the form of inclusion bodies after IPTG induction and the content was approximately 40.0% of total bacteria proteins after optimizing expression conditions. When inclusion bodies were washed, dissolved and purified by Ni-NTA under denatured conditions, the purity was up to 90%. On SDS-PAGE and West-blotting, the protein band was found to match well with the predicted relative molecular mass-36kDa. Bioactivity was 0.1 U/mg. The results indicated that high-level expression of wild-type hTS cDNA can be achieved in prokaryotes with our novel method, facilitating research into related chemotherapy.
We have shown that the volcanic rocks from the northern part of Cheju Island can be divided into high $P_2O_5/K_2O$(HPK) and low $P_3O_5/K_2O$(LPK) groups, each with distinct geochemical characteristics(Park and Kwon, 1993a and b). This study reports mineral compositions for plagioc-lase, olivine, and clinopyroxene in order to see the dependence of mineral chemistry on the whole rock composition, and discusses equilibrium relationships between crystal and liquid. Plagioclase and olivine phenocrysts show no compositional differences for the two rock group. However, $Al^{ⅵ}/Al^{ⅳ}$ ratios of clinopyroxenes suggest that pyroxenes have fractionated at deeper level, and that the LPK group might have fractionated at higher pressure than the HPK group. These are in good agreement with our previous interpretation based on whole rock chemistry(Park and Kwon, 1993a). Although subhedral or euhedral form and homogenous composition for most plagioclase and clinopy-roxene phenocrysts suggest equilibrium relationship with liquid, the uncertainties associated with liquid, the uncertainites associated with equilibrium constant for these minerals do not allow testing equilibium relationship between mineral and liquid on the basis of chemistry. On the other hand, olivine phenocrysts in hawaiites, for which Kd is well known, show distinct nonequilibrium relationship with calculated liquid composi-tions, while those in other rock compositions are in equilibrium from those for other rocks. We report for the first time as far as we know plagioclase xenocryst and pigeonite inclusion in plagioclase, which indicates assimilation process. In conclusion, these mineralogical observations imply that mag-matic processes underneath the Cheju volcano were not simple.
Purpose: A meta-analysis was conducted to evaluate effectiveness of education programs using video recording and feedback in the improvement of competency in clinical skills for health care majors. Methods: Six databases were searched and inclusion criteria were randomized controlled trials (RCTs) or non-randomized controlled trials (NRTs) reporting level of skill competency using numerical measurements. Data analysis and synthesis were performed using Comprehensive Meta-Analysis software and Revman program. Results: Of 1,568 records, 11 studies met inclusion criteria. Statistically significant effectiveness of education programs using video recording and feedback was identified. A low risk of bias was detected among both RCTs and NRTs. Meta-analysis showed that the intervention groups had more effective improvements in skill competency (standardized mean difference [SMD]: 0.74; 95% CI: 0.33~1.16). Results of subgroup analysis showed higher effects when interventions dealt with one skill, used self-reflection with expert feedback, and included instruction from instructor in the education programs. Conclusion: Findings suggest that schools for health care majors should actively adopt video and feedback based skill training allowing educators to design effective programs. Potential is higher for students to achieve higher competency when they train with one skill at a time, use of instruction and receive feedback from experts.
A total of thirty-six gilts $(24.78{\pm}1.39kg)$ were employed for 38 days (Exp. 1), and twenty-four gilts $(46.50{\pm}1.90kg)$ for 43 days (Exp. 2) to determine growth performance and carcass characteristics in pigs fed dried food waste (DFW). Pigs were allocated by dietary treatments: 0%, 20% and 40% DFW. For nutrient digestibility, twelve female pigs $(50.20{\pm}0.52kg)$ were used in individual pens to collect feces. Food wastes were collected from restaurants and apartment complex areas and dried in a drum-type dryer at $115{\pm}2{^{\circ}C}$. Experimental diets for feeding trials were formulated to contain 3,400 kcal DE/kg and 17% crude protein. The tested DFW contained 2,858 kcal DE/kg, 25.0% crude protein, 17.3% crude fat, 1.37% Ca, 1.28% P, and 3.28% NaCl. As compared to crude protein content, the limiting amino acids (i.e., 0.90% lysine and 0.52% methionine) were low. The digestibilities of energy, ash, calcium and phosphorus in the DFW were generally lower than those in the grower diets, but the digestibilities of crude protein and crude fat were higher in DFW than the grower diet. Feeding DFW in pigs had a linear (p<0.01) effect on ADG and feed/gain as the inclusion levels of DFW were increased (Exp. 1). The ADG of pigs fed 40% DFW was also poorer (p<0.05) than that fed the control diet (Exp. 2). Carcass characteristics in terms of backfat and dressing percentage were not affected by dietary treatments. In conclusion, it seems that the optimal dietary inclusion level of the DFW is about 20% in the diet for growing-finishing pigs.
A feeding trial was conducted to evaluate the effects of partial replacement of fishmeal (FM) protein in a practical diet for rockfish Sebastes schlegeli juveniles with mealworm Tenebrio molitor meal (WM), in terms of growth performance, feed utilization, whole body composition and hematological parameters. Four isonitrogenous and isoenergetic diets were formulated to contain 8, 16, 24 and 32% WM (designated as WM8, WM16, WM24 and WM32). A FM-based diet without WM inclusion was used as a control. Triplicate groups of rockfish ($2.6{\pm}0.07g$) were hand fed one of the experimental diets to visual satiation twice a day for 8 weeks. Weight gain of fish fed the WM32 diet was lower than that of control. No significant differences were found in daily feed intake, feed efficiency and protein efficiency ratio. The whole-body protein content of fish fed WM0 and WM8 diets were significantly higher than that of fish fed WM32 diet. No statistical differences were observed in hematological parameters. These results indicate that WM has potential as alternative to FM in practical diets for juvenile rockfish and can be used at an inclusion level of up to 24% without having a significant negative effects on growth and feed efficiency.
PURPOSE. Dental implant has gained clinical success over last decade with the major drawback related to osseointegration as properties of metal (Titanium) are different from human bone. Currently implant procedures include endosseous type of dental implants with nanoscale surface characteristics. The objective of this review article is to summarize the role of nanotopography on titanium dental implant surfaces in order to improve osseointegration and various techniques that can generate nanoscale topographic features to titanium implants. MATERIALS AND METHODS. A systematic electronic search of English language peer reviewed dental literature was performed for articles published between December 1987 to January 2012. Search was conducted in Medline, PubMed and Google scholar supplemented by hand searching of selected journals. 101 articles were assigned to full text analysis. Articles were selected according to inclusion and exclusion criterion. All articles were screened according to inclusion standard. 39 articles were included in the analysis. RESULTS. Out of 39 studies, seven studies demonstrated that bone implant contact increases with increase in surface roughness. Five studies showed comparative evaluation of techniques producing microtopography and nanotopography. Eight studies concluded that osteoblasts preferably adhere to nano structure as compared to smooth surface. Six studies illustrated that nanotopography modify implant surface and their properties. Thirteen studies described techniques to produce nano roughness. CONCLUSION. Modification of dental osseous implants at nanoscale level produced by various techniques can alter biological responses that may improve osseointegration and dental implant procedures.
Objective : The purpose of this study is to review the randomized clinical trials of Chuna manual therapy for cervicogenic headache and provide a evidence for the efficacy of Chuna manual therapy. Methods : We searched randomized clinical trials that performed Chuna manual therapy for cervical headache up to Feb. 2017 in 6 databases. Randomized clinical trials were selected according to the inclusion criteria and the data were extracted and analyzed. The risk of bias was assessed using the Cochrane Risk of Bias Criteria. Results : 16 RCTs met the inclusion criteria. The meta-analysis of 13 RCTs showed favorable results for the use of chuna manual therapy compared to drug, physical treatment. Conclusions : In 16 RCTs, we found that Chuna manual therapy was effective in cervicogenic headache. However, all RCTs are exposed to a number of bias risks. Therefore, well designed clinical trial would be needed to raise the evidence level of Chuna manual therapy.
A trial was conducted to evaluate the level of wheat substituted for corn in a traditional corn-soy diet and the xylanase supplementation effect on the growth performance and nutrient digestion of broiler chickens. This experiment was a randomized design with a 4${\times}$2 factorial arrangement with four levels of wheat substitution and two levels of enzyme inclusion in the diet. Wheat replaced 0, 25, 50 or 100% corn with or without 1 g/kg xylanase supplementation in iso-nitrogenous and iso-calorific experimental diets. The results showed that in the growing period, broilers attained the highest (p<0.05) body weight gain, feed intake, and relative small intestine weight when wheat was substituted at 25% for corn. The relative caecum weight increased (p<0.05) linearly with increasing levels of wheat substitution for corn. However, during the finishing period and entire experimental period from 0 to 6 weeks, no significant difference was shown in the growth performance among all treatments. Xylanase inclusion significantly improved the body weight gain, fat availability (p<0.01) and diet metabolisable energy (p<0.1) but decreased (p<0.05) the relative GI tract weight during the growing period. The digesta viscosity of 6-week old broilers was also decreased (p<0.05). It appears that wheat substituted for corn did not affect the growth performance, nutrient digestion, and the digesta viscosity of chickens. It is acceptable to completely substitute wheat for corn. Xylanase supplementation improved performance.
Oughlis-Hammache, F.;Skiba, M.;Hallouard, F.;Moulahcene, L.;Kebiche-Senhadji, O.;Benamor, M.;Lahiani-Skiba, M.
Membrane and Water Treatment
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제7권3호
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pp.223-240
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2016
In this study, poly(vinyl-alcohol) and water insoluble ${\beta}$-cyclodextrin polymer (${\beta}$-CDP) cross-linked with citric acid, have been used as macrocyclic carrier in the preparation of polymer inclusion membranes (PIMs) for aniline (as molecule model) extraction from aqueous media. The obtained membranes were firstly characterized by X-ray diffraction, Fourier transform infrared and water swelling test. The transport of aniline was studied in a two-compartment transport cell under various experimental conditions, such as carrier content in the membranes, stirring rate and initial aniline concentration. The kinetic study was performed and the kinetic parameters were calculated as rate constant (k), permeability coefficient (P) and flux (J). These first results demonstrated the utility of such polymeric membranes for environmental decontamination of toxic organic molecules like aniline. Predictive modeling of transport flux through these materials was then studied using design of experiments; the design chosen was a two level full factorial design $2^k$. An empirical correlation between aniline transport flux and independent variables (Poly ${\beta}$-CD membrane content, agitation speed and initial aniline concentration) was successfully obtained. Statistical analysis showed that initial aniline concentration of the solution was the most important parameter in the study domain. The model revealed the existence of a strong interaction between the Poly ${\beta}$-CD membrane content and the stirring speed of the source solution. The good agreement between the model and the experimental transport data confirms the model's validity.
Human insulin is a hormone well-known to regulate the blood glucose level. Recombinant preproinsulin, a precursor of authentic insulin, is typically produced in E. coli as an inactive inclusion body, the solubilization of which needs the addition of reducing agents such as $\beta$-mercaptoethanol. To make authentic insulin, recombinant preproinsulin is modified enzymatically by trypsin and carboxypeptidase B. The effects of $\beta$-mercaptoethanol on the formation of human insulin derivatives were investigated in the enzymatic modification by using commercially available human proinsulin as a substrate. Addition of 1 mM $\beta$-mercaptoethanol induced the formation of various insulin derivatives. Among them, the second major one, impurity 3, was found to be identical to the insulin B chain fragment from $Phe_1$ to $Glu_{21}$. Minimization of the formation of insulin derivatives and concomitant improvement of the production yield of human insulin were achieved by the addition of hydrogen peroxide. Hydrogen peroxide bound with $\beta$-mercaptoethanol and thereby reduced the negative effects of $\beta$-mercaptoethanol considerably. Elimination of the impurity 3 and other derivatives by the addition of over 10 mM hydrogen peroxide in the presence of $\beta$-mercaptoethanolled to a 1.3-fold increase in the recovery efficiency of insulin, compared with those for the case without hydrogen peroxide. The positive effects of hydrogen peroxide were also confirmed with recombinant human preproinsulin expressed in recombinant E. coli as an inclusion body.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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