Yang, Myeon-Sik;Zhou, Zixiong;Khatun, Amina;Nazki, Salik;Jeong, Chang Gi;Kim, Won Il;Lee, Sang Myeong;Kang, Seog-Jin;Lim, Chae Woong;Kim, Bumseok
한국동물위생학회지
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제41권4호
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pp.263-269
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2018
Developing drugs targeting respiratory pathogen is essential to control respiratory diseases. Many experiments have been performed under in vivo situation. However, in vivo experiments have economical and ethical issues. The objective of this study was to determine the possibility of developing an ex vivo lung culture system with possible application for respiratory infection studies. After isolating lungs from naïve pigs, agarose-inflated lung tissues were prepared and sliced manually. These sliced lung tissues were then subsequently placed on 24-well plates. Eight different combinations of media were used to determine the optimum ex vivo lung culture condition. In addition, lung tissues were infected with porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus at a titer of $1{\times}10^4\;TCID_{50}/mL$. Virus growth was confirmed by titration in MARC-145 cells at 2, 4, 6 days post infection (dpi). We found that ex vivo lung culture in physiological environment was not media specific based on histopathology and cytotoxicity. However, under virus-infected condition, thickened alveolar walls in the lung tissues and stable virus titers at 2, 4, 6 dpi were shown in F12K medium suggesting that it was useful for tissue maintenance and virus infection using PRRS virus infected lung tissues. The present study shows the possibility of using porcine ex vivo lung model for respiratory infection studies.
Aim: The present investigation was to evaluate the effects of essential oils of Wedelia chinensis (Osbeck) on free radicals and in vivo antioxidant properties. Methods: Essential oils were extracted using hydro-distillation and compound analysis was performed by GC-MS analysis. Screening for inhibitory activity was conducted by DPPH and OH-scavenging assays. In addition an in vivo study was carried out in cell line implanted cancer bearing mice with assessment of levels of catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, lipid peroxidation, nitric oxide and reduced glutathione. Finally, lungs were dissected out for histopathology study of metastasis. Results: GC-MS analysis revealed the presence of carvocrol and trans-caryophyllene as the major compounds with 96% comparison with the Wilily and NBS libraries. The essential oil exhibited significant inhibition in DPPH free radical formation. Whereas reducing power and hydroxyl radical scavenging activity are dose dependent. When compared with the standard, it was found that the essential oil has more or less equal activity in scavenging free radicals produced. In the animal studies, the level of antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase, as well as glutathione, were found to be increased in treated groups whereas lipid peroxidation and nitric oxide were reduced. Histopathology report also shows that the essential oil has a significant combating effect against cancer development. Conclusion: In all the in vitro assays, a significant correlation existed between the concentrations of the essential oil and percentage inhibition of free radicals. The in vivo studies also has shown a very good antioxidant property for the essential oil during cancer development. From, these results the essential oil can be recommended for treating disease related to free radicals and to prevent cancer development.
Currently, most biological research relies on conventional experimental techniques that allow only static analyses at certain time points in vitro or ex vivo. However, if one could visualize cellular dynamics in living organisms, that would provide a unique opportunity to study key biological phenomena in vivo. Intravital microscopy (IVM) encompasses diverse optical systems for direct viewing of objects, including biological structures and individual cells in live animals. With the current development of devices and techniques, IVM addresses important questions in various fields of biological and biomedical sciences. In this mini-review, we provide a general introduction to IVM and examples of recent applications in the field of immunology, oncology, and vascular biology. We also introduce an advanced type of IVM, dubbed real-time IVM, equipped with video-rate resonant scanning. Since the realt-ime IVM can render cellular dynamics with high temporal resolution in vivo, it allows visualization and analysis of rapid biological processes.
Although diverse mechanisms are involved in multidrug resistance for chemotherapeutic drugs, the development of cellular P-glycoprotein(Pgp) and multidrug-resistance associated protein (MRP) are important factors in the chemotherapy failure to cancer. Various detection assays provide information about the presence of drug efflux pumps at the mRNA and protein levels. However these methods do not yield information about dynamic function of Pgp and MRP un vivo. Single photon emission tomography (SPECT) and positron emission tomography (PET) are available for the detection of Pgp and MRP-mediated transport. $^{99m}Tc$-sestaMIBl and other $^{99m}Tc$-radiopharmaceuticals are substrates for Pgp and MRP, and have been used in clinical studies for tumor imaging, and to visualize blockade of Pgp-mediated transport after modulation of Pgp pump. Colchicine, verapamil and daunorubicin labeled with $^{11}C$ have been evaluated for the quantification of Pgp-mediated transport with PET in vivo and reported to be feasible substrates with which to image Pgp function in tumors. Leukotrienes are specific substrates for MRP and N-$[^{11}C]$acetyl-leukotriene E4 provides an opportunity to study MRP function non-invasively in vivo. Results obtained from recent publications are reviewed to confirm the feasibility of using SPECT and PET to study the functionality of MDR transporters in vivo.
본 연구는 교모세포종 (Glioblastoma multiform, GBM)에 대한 방사선 진단학적/치료학적 연구에 필수적으로 필요한 악성뇌종양 동물모델을 개발하기 위해 수행되었다. 악성뇌종양 동물모델 개발을 위해 뇌정위 기구(stereotactic instrument)를 이용하여 C6 세포(Glioblastoma cell line)를 SD rat의 우측 선조체 내에 동종이식하였다. 개발된 동물모델의 검증을 위해 MRI와 해부조직학적 검사방법을 이용하였다. 해부조직학적 검사방법으로는 H&E 염색법을 이용하였다. MRI를 이용한 종양 형성 검사에서 C6 세포 이식 7일 후 종양 형성이 확인되었고, 14일 후에는 이식한 우측 뇌의 대부분이 종양으로 변화한 것을 확인하였다. 해부조직학적 검사에서는 과세포 발현 및 다형성 세포에 의해 형태학적 변화가 발생하는 것을 알 수 있었다. 본 연구에서 개발된 악성뇌종양 동물모델은 in vivo level에서 교모세포종에 대한 방사선 진단학적 기술 개발 및 새로운 치료법 개발을 위한 필수적인 도구로서 활용될 수 있을 것이다.
기기의 광독성 유발 물질 및 자외선 차단제 그리고 수종의 천연물에 대해 in-vitro 와 in-vivo에서 광독성 시험을 하였다. In-vitro시험은 C. albicans와 S. typhymurium TA 98을 이용 광독성 시험을 하였으며, 광조사는 시료, 시료와 미생물 모두 각각의 시료와 미생물 조사하는 방법을 사용하여 비교하여 보았다. 조사 방법에 따른 유의성은 관찰되지 않았는데, 제한된 시료를 사용했다는 것도 여러 원인 중에 하나가 될 수 있다. 한편 사용된 두 균주의 감수성은 C. albicans에 비해 S. typhimurium TA 98을 이용했을 때 높게 나타났고, S. typhimurium TA 98을 이용한 in-vitro method(Method I)와 in-vivo method를 시험 결과 측면에서 볼 때 상관 관계가 높게 나타났다.
방사선치료에서는 환자 체내에 전달된 선량이 원래 의도한 데로 분포되는 지 확인하기 위하여 균질한 팬텀을 이용한 정도 관리를 치료 전에 주로 시행하고 있다. 하지만 균질한 팬텀을 이용한 정도 관리는 표면이 불규칙적이고 불균질한 인체에 대한 선량분포를 완전히 보증해 주지는 못하고 있다. 본 연구에서는 환자를 투과하는 선량의 분포를 측정하여 역으로 환자체내 선량 분포를 계산하는 투과선량 기반 체내선량 검증프로그램을 개발하였다. 투과선량은 주방사선과 산란방사선으로 이루어져 있는데, 본 연구에서는 전자포탈영상장치로 측정한 선량분포로부터 주방사선만을 이용한 간단한 식으로 환자체내선량분포를 계산하는 프로그램과 감마값 분포를 평가하여 두 선량분포를 서로 비교할 수 있는 프로그램을 개발하였다. 개발된 프로그램을 이용하여 계산한 팬텀의 등중심점을 지나는 관상면의 체내선량 분포는 치료계획시스템에서 제공하는 동일 평면의 선량분포와의 비교결과 균질팬텀에서 평균 95%, 비균질팬텀에서 81.8%의 감마통과율을 보였다.
This experiment was carried out to develop an in vitro culture system for rabbit embryos. The zygotes or 2-cell embryos were collected from the oviducts of the superovulated and mated does with D-PBS/10% FCS at 24 hours after hCG injection. The in vitro developmental rate of blastocyst formation and the number of nuclei in the embryos were examined under the following treatments; 1) TCM-199 with 10% FCS, 2) EBSS with 10% FCS, 3) rabbit vitreous humor(VH), 4) TCM-199 with 10% FCS+BOEC, 5) TCM-199 with 10% FCS+ROEC, 6) EBSS with 10% FCS+BOEC and 7) EBSS with 10% FCS+ROEC. For a comparative study of in vivo and in vitro development, the fresh blastocysts, which were developed in vivo for 96 hours after hCG injection, were collected from the uterus and their numbers of nuclei were counted. 1. The zygotes or 2-cell embryos developed to the blastocyst stage in TCM-199, EBSS and VH at the rates of 93, 92 and 89%, respectively. 2. The higher developmental rates 95~98% of blastocyst formation was achieved when the embryos were co-cultured with a monolayer of bovine or rabbit oviductal epithelial cells in TCM-199 or EBSS. No significant difference in developmental rates was shown between bovine and rabbit oviductal epithelial cells. 3. In a comparative study of in vivo and in vitro development, the total numbers of nuclei were significantly less in the in vitro cultured embryos(104~224) than the in vivo developed embryos(1, 0090 at 96 hours after hCG injectin. 4. The mean cell cycle numbers in the embryos cultured for 72 hours in TCM-199 with 10% FCS, EBSS with 10% FCS, TCM-199 with 10% FCS+BOEC, TCM-199 with 10% FCS+ROEC, EBSS with 10% FCS+BOEC and in vivo was 7.38, 6.63, 7.76, 7.69, 7.01 and 9.92, respectively. From these results, it can be suggested the optimal culture system for in vitro culture of rabbit embryos is a co-culture system with bovine or rabbit oviductal epithelial cells in TCM-199 with 10% FCS. Considering the significant reduction in total numbers of nuclei in the in vitro cultured embryos, the advanced research on development of in vitro culture system for rabbit embryos is expected.
The pathological effect of the Bacillus thuringiensis Cry $\delta$-endotoxins on susceptible insect larvae had extensive damage on the midgut epithelial cells. In this study, an ex vivo assay was devised for assessing the insecticidal potency of the cloned Cry4B mosquito-larvicidal protein that is expressed in Escherichia coli. Determination of toxicity was carried out by using a cell viability assay on the midguts that were dissected from 5-day old Aedes aegypti mosquito larvae. After incubation with the toxin proteins, the number of viable epithelial cells was determined photometrically by monitoring the quantity of the bioreduced formazan product at 490 nm. The results showed that the 65-kDa trypsin-activated Cry4B toxin exhibited toxic potency ca. 3.5 times higher than the 130-kDa Cry4B protoxin. However, the trypsin-treated products of the non-bioactive Cry4B mutant (R158A) and the lepidopteran-specific Cry1Aa toxin displayed relatively no ex vivo activity on the mosquito-larval midguts. The ex vivo cytotoxicity studies presented here confirms data that was obtained in bioassays.
Ru, Y.J.;Glatz, P.C.;Miao, Z.H.;Swanson, K.;Falkenberg, S.;Wyatt, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제15권6호
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pp.800-805
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2002
Two experiments were conducted to compare digestibility of 12 diets in sheep, red and fallow deer. No differences (p>0.05) between sheep, red and fallow deer in digestibility of dry matter, organic matter and digestible energy content for all diets were found except for the sorghum diet and medic hay. Sheep and fallow deer digested the sorghum diet better than red deer. An in vitro study showed that sheep had a lower in vitro dry matter digestibility and digestible energy content than both red and fallow deer, with a significant interaction between animal species and feed ingredient. Deer digested straws and hays better (p<0.05) than sheep. In vitro digestibility was lower (p<0.05) than in vivo digestibility, but significantly correlated with in vivo digestibility for red and fallow deer. The in vitro method for digestibility estimation has potential as a rapid feed evaluation system for deer, but needs further validation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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