• 제목/요약/키워드: In Vitro Development

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군리탕가감방(君理湯加減方)이 항종양(抗腫瘍) 면역반응(免疫反應)과 항암제로 유발(誘發)한 부작용(副作用)에 미치는 영향(影響) (Effects of Gunleetang Gagambang Extract on Antitumoral Immunological Response and the Side Effect Induced by Antitumoral Agents)

  • 유경태;문석재;문구;원진희
    • 대한한방종양학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.71-87
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    • 1998
  • Even though appropriate immune response is necessary for the survival of the individual, excessive or insufficient immune Response might cause autoimmune or allergic disease. So the immune response must be controlled to the degree that is beneficial for the well being of the individual. This study was undertaken to know the effects of Gunleetang Gagambang on the immune system of the mouse. Gunleetang Gagambang has been used for cure of tumor as a traditional medicine without any experimental evidence to support the rational basis for its clinical use. This study was carried out to evaluate the possible therapeutic or antitumoral effects of Gunleetang Gagambang extract against tumor, and to carry out some mechanisms responsible for its effect. Some kinds of tumor were induced by the typical application of 3-methylcholanthrene(MCA) or by the implantation(s.c) of malignant tumor cells such as leukemia cells(3LL cells) or sarcoma cells(S180 cells). Treatment of the Gunleetang Gagambang on water-extract(dailly 1mg/mouse, i. p.) was continued for 7 days prior to tumor induction and after that the treatment was lasted for 20 days. Against squamous cell carcinoma induced by MCA, Gunleetang Gagambang decreased not only the frequency of tumor production but also the number and the weight of tumors per tumor bearing mice(TBM). Gunleetang Gagambang on also significantly suppressed the development of 3LL cell and S180 cell-implanted tumors in occurrence-frequency and their size. and some developed tumors were regressed by the continuous treatment of Gunleetang Gagambang extract into TBM. In vitro, treatment of Gunleetang Gagambang extract had no effect on the growth of some kinds of cell line such as FsaII, A431 strain but significantly inhibited the proliferation of 3LL, S180 cells and augmented the DNA synthesis of mitogen-activated lymphocytes. Gunleetang Gagambang also stimulated the migrative ability of leukocyte, the MIF and IL-2 production of T lymphocytes, but not IL 6 production of B cells. Gunleetang Gagambang administration to mice enhanced NK cells activities. These results demonstrated that Gunleetang Gagambang extract exhibited a significant prophylactic benefits against tumors and its antitumor activity was manifested depending on the type of tumor cells. And these results also suggested that effect of Gunleetang Gagambang might be chiefly due to nonspecitie enhancement of NK cell activities and cell-mediated immune responses.

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배지(培地) 및 생장(生長)호르몬에 따른 기내배양(器內培養)된 포푸라속(屬) 8개(個) 수종(樹種)의 기관형성반응(器官形成反應) (Morphogenetic Responses according to Media and Growth Regulators in vitro Culture of Eight Populus spp.)

  • 김지문;권기원;문흥규;이재순
    • 농업과학연구
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    • 제14권2호
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    • pp.205-212
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    • 1987
  • 기내배양(器內培養)된 포푸라속(屬) 8개(個) 수종(樹種)의 줄기조직편(組織片)(stem segment)과 양버들의 엽(葉), 엽병(葉柄), 절간조직(節間組織)을 재료(材料)로 배지(培地), 생장(生長)호르몬, 치상부위(置床部位)에 따른 기관형성능력(器官形成能力)을 시험(試驗)하여 다음 결과(結果)를 얻었다. 1. 줄기조직편(組織片)에서 shoot 유도(誘導)는 절(節)(section) 및 수종(樹種)에 따라 많은 차이(差異)를 보였다. 배양(培養) 4주후(週後)에 Leuce 및 Tacamahaca절(節)에 속(屬)하는 수종(樹種)은 부정아유도(不定芽誘導)가 안되었으며 액아(腋芽)나 잠아(潛芽)로부터 shoot가 신장(伸長)되었고, Aigeiros절(節)의 양버들은 조직편당(組織片當) 5.4개(個)의 가장 좋은 부정아발생(不定芽發生)을 보였다. 2. 양버들은 배지(培地) 및 생장(生長)호르몬에 따라 기관형성(器官形成)에 큰 차이(差異)를 보여 엽(葉)의 abaxial side 배양(培養)이 adaxial side배양(培養)보다 부정아발생(不定芽發生)이 양호(良好)하였으며 WPM배지(培地)에 $0.2mg/{\ell}$ BAP가 첨가(添加)된 경우 배양(培養) 5주후(週後)에 조직편당(組織片當) 평균(平均) 103개(個)의 부정아(不定芽)가 유도(誘導)되었다. 3. 2,4-D는 양버들의 부정아유도(不定芽誘導)에는 부적당(不適當)하였으며 callus의 형성(形成)을 촉진(促進)하였고, NAA 혹은 NAA와 BAP의 결합첨가(結合添加)는 모든 조직편(組織片)에서 뿌리의 발생(發生)을 촉진(促進)하였다.

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Systematic Identification of Hepatocellular Proteins Interacting with NS5A of the Hepatitis C Virus

  • Ahn, Ji-Won;Chung, Kyung-Sook;Kim, Dong-Uk;Won, Mi-Sun;Kim, Li-La;Kim, Kyung-Shin;Nam, Mi-Young;Choi, Shin-Jung;Kim, Hyoung-Chin;Yoon, Mi-Chung;Chae, Suhn-Kee;Hoe, Kwang-Lae
    • BMB Reports
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    • 제37권6호
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    • pp.741-748
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    • 2004
  • The hepatitis C virus is associated with the development of liver cirrhosis and hepatocellular carcinomas. Among the 10 polyproteins produced by the virus, no function has been clearly assigned to the non-structural 5A (NS5A) protein. This study was designed to identify the hepatocellular proteins that interact with NS5A of the HCV. Yeast two-hybrid experiments were performed with a human liver cDNA prey-library, using five different NS5A derivatives as baits, the full-length NS5A (NS5A-F, amino acid (aa) 1~447) and its four different derivatives, denoted as NS5A-A (aa 1~150), -B (aa 1~300), -C (aa 300~447) and D (aa 150~447). NS5A-F, NS5A-B and NS5A-C gave two, two and 10 candidate clones, respectively, including an AHNAK-related protein, the secreted frizzled-related protein 4 (SFRP4), the N-myc downstream regulated gene 1 (NDRG1), the cellular retinoic acid binding protein 1 (CRABP-1), ferritin heavy chain (FTH1), translokin, tumor-associated calcium signal transducer 2 (TACSTD2), phosphatidylinositol 4-kinase (PI4K) and $centaurin{\delta}$ 2 ($CENT{\delta}2$). However, NS5A-A produced no candidates and NS5A-D was not suitable as bait due to transcriptional activity. Based on an in vitro binding assay, CRABP-1, PI4K, $CENT{\delta}2$ and two unknown fusion proteins with maltose binding protein (MBP), were confirmed to interact with the glutathione S-transferase (GST)/NS5A fusion protein. Furthermore, the interactions of CRABP-1, PI4K and $CENT{\delta}2$ were not related to the PXXP motif (class II), as judged by a domain analysis. While their biological relevance is under investigation, the results contribute to a better understanding of the possible role of NS5A in hepatocellular signaling pathways.

TiO2 광촉매 융합 미백제에 의한 치아미백 향상 효과에 대한 연구 (Improvement of Bleaching Effect on the Color of Enamel Surface with TiO2 Catalysis Convergence Bleaching Agent)

  • 황갑운;최문실;임선아
    • 한국융합학회논문지
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    • 제6권5호
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    • pp.165-171
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    • 2015
  • 본 연구의 목적은 임상에서 사용되고 있는 치아미백제와 $TiO_2$ 광촉매의 융합에 의한 치아 미백효과를 평가하고, 미백 효과를 극대화시킬 수 있는 광촉매 혼합비 등에 관한 기초연구를 통하여 미백효과와 안전성을 고찰하고자 하였다. 실험에 사용된 치아는 발거된 치아 중 우식에 이환되지 않고 수복물이 없는 전, 구치부 치아 24개의 연조직 치석을 제거한 후 전치부의 순면이나 구치부의 협면 및 설면이 노출되도록 하여 dal상에서 사용 중인 치아 미백제에 $TiO_2$ 광촉매 분말을 10, 20wt.% 첨가하여 융합하고, 과산화수소수를 10~20%첨가한 미백제를 적용하여 색조 변화를 측정하였다. $TiO_2$ 광촉매와 미백제의 융합 미백제 적용에 따른 치아의 외관 특성평가 결과, 20% 과산화수소수에 $TiO_2$ 첨가한 경우 월등한 미백효과를 나타남을 알 수 있었으며 $TiO_2$ 광촉매를 사용하면 치아미백을 위한 미백제 적용시간을 단축시킬 수 있음을 알 수 있다. 이러한 결과는 향후 치아 미백제 개발에 촉매의 활용을 통하여 미백 효과를 향상시킬 수 있는 연구의 제안으로 치아미백 제품개발에 기여할 수 있을 것이다.

올리고당 첨가 증편 발효 중 Dextran 형성과 증편의 내부구조에 관한 연구 (Study on the Dextran and the Inner Structure of Jeung-Pyun (Korea Rice Cake) on Adding Oligosaccharide)

  • 이은아;우경자
    • 동아시아식생활학회지
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    • 제12권1호
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    • pp.38-46
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    • 2002
  • 올리고당을 첨가한 증편발효에서도 dextran이 형성되어 부피팽창에 역할을 하는지 검토하기 위하여 발효시간에 따른 증편의 비체적과 증편반죽의 발효시간에 따른 dextran과 환원당 함량변화를 측정하고 증편의 내부구조를 SEM을 통하여 살펴보았다. 1. 발효시간에 따른 증편의 비체적은 설탕첨가 증편과 프럭토올리고당, 갈락토올리고당 첨가 증편에서는 7~13시간에, 이소말토올리고당 증편은 7시간에 최대의 비체적을 나타내었다. 2. 증편반죽의 환원당 함량 변화는 설탕 첨가 증편은 초기에 급격히 증가하여 발효 4시간에 최대치를 나타내었고, 8시간 이후 급격히 감소하였다. 올리고당 첨가 증편반죽은 반죽 제조시부터 서서히 낮아졌으며 10시간 이후 급격히 감소하였고 최대값은 설탕증편과 비슷한 함량을 보였다. 3. 발효시간에 따른 증편반죽의 dextran 함량 변화는 시료간에는 유의적인 차이가 없었으나 발효 3 시간부터 급증하여 7~13시간에 최대를 이루었다가 급격히 감소하였다. 4. 발효시간에 따른 증편의 내부구조에서 기공이 크고 균일성이 보인 시간은 설탕첨가 증편은 3~7시간, 프럭토올리고당과 이소말토올리고당 첨가증편은 7시간, 갈락토올리고당 첨가 증편은 7~13시간이었다. 따라서 올리고당 첨가시 최적 발효시간은 비체적, dextrange함량, 내부구조양상 등을 종합하였을 때 7시간이 공통적으로 최대를 이루는 시간을 나타내므로 7시간이 적합함을 알수 있었다. 이상의 결과에서 설탕 대신 증편에 올리고당을 첨가하여도 dextran이 생성됨을 알 수 있었고, 비체적도 설탕 첨가 증편과 비슷한 양상을 나타내어 dextran이 부피팽창에 큰 역할을 함을 확인할 수 있었다.일가지 연장되었다. 이상의 결과에서 황기, 국화, 구기자, 감초, 당귀, 대추, 작약, 천궁의 물과 에탄을 추출물 중에는 in vitro 항산화 실험 계에서 항산화 활성을 나타내는 생리활성 성분이 있는 것으로 나타났다.5-7-3-20 균주의 경우에는 proline의 영향을 받지 않았다. 이러한 결과로 Corynebacterium glutamicum 균주에 salt tolerance를 도입하면 L-lysine 생산성을 크게 향상시킬 수 있음을 확인하였다.ailable from the Rural Development Administration. The system was applied to the forecasting of national rice production for the recent 3 years (1997 to 1999). The model was run with the past weather data as of September 15 each year, which is about a month earlier than the actual harvest date. Simulated yields of 1,455 Myuns were grouped into 162 counties by acreage-weighted summation to enable the validation, since the official production statistics from the Ministry of Agriculture and Forestry is on the county basis. Forecast yields were less sensitive to the changes

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부정항암탕(扶正抗癌湯)이 항종양(抗腫瘍) 면역반응(免疫反應)에 미치는 영향(影響) (The Effects of Bujeong hangamtang on antitumor Immune Response)

  • 임미량;문석재;문구;원진희;전병훈
    • 대한한의학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.234-250
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    • 1998
  • Bujeonghangamtang(扶正抗癌湯) has been used for cure of tumor as a traditional medicine without any experimental evidence to support the rational basis for its clinical use. This study was carroed out to evaluate the possible therapeutic or antitumoral effects of Bujeonghangamtang extract against tumor, and to carry out some mechanisms responsible for its effect. Some kinds of tumor were induced by .the typical application of 3-methylcholanthrene (MCA) or by the implantation(s.c) of malignant tumor cells such as leukemia cells(3LL cells) or sarcoma cells(Sl80 cells). Treatment of the Bujeonghangamtang water-extract (dailly 1mg/mouse, i. p.) was continued for 7 days prior to tumor induction and after that the treatment was lasted for 20 days. Against squamous cell carcinoma induced by MCA, Bujeonghangamtang decreased not only the frequency of tumor production but also the number and the weight of tumors per tumor bearing mice (TBM). Bujeongmngamtang also significantly suppressed the development of 3LL cell and S180 cell-implanted tumors in occurence-frequency and their size, and some developed tumors were regressed by the continuous treatment of Bujeonghangamtang extract into TBM. In vitro, treatment of Bujeonghangamtang extract had no effect on the growth of some kinds of cell line such as FsaII, A431 strain but significantly inhibited the proliferation of 3LL, S180 cells and augmented the DNA synthesis of mitogen-activated lymphocytes. Bujeonghangamtang also stimulated the migrative ability of leukocyte, the MIF and IL-2 production of T lymphocytes, but not IL 6 production of B cells. Bujeonghangamtang-administration to mice enhanced NK cells attivities. These results demonstrated that Bujeonghangamtang extract exhibited a significant prophylactic benefits against tumors and its antitumor activity was manifested depending on the type of tumor cells. And these results also suggested that effect of Bujeonghangamtang might be chiefly due to nonspecific enhancement of NK cell activities and cell-mediated immune responses.

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Dormancy of Somatic Embryos Derived from the Cotyledon of Korean Ginseng

  • Yang Deok-Chun;Yoon Eui-Soo;Choi Kwang-Tae
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제23권3호
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    • pp.130-134
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    • 1999
  • 발아 직전에 있는 한국인삼의 접합자 배에서 유래된 자엽절편을 이용하여 체세포배를 유도하고 기내 휴면여부를 조사하고자 하였다. 식물호르몬으로써 2,4-D, BAP, kinetin을 첨가하거나 혹은 전혀 식물호르몬이 첨가하지 않은 MS배지에 절편을 배양할 경우 많은 체세포배 혹은 단일배를 획득할 수 있었다. 그러나 이런 배들은 대부분 자엽형 배(cotyledonary stage)까지 발육이 가능하지만 발아가 되지 못하여 더 이상 shoot로 생육되지 못하였고 하얀상태의 자엽형 배로 계속 유지되었다. 그러나 gibberellic acid(1.0 mg/l, $GA_3$)을 처리할 경우 3주 이내에 자엽형 배가 녹색으로 변하면서 발아되었으며, 저온처리($-2^{\circ}C$에서 8주간)를 할 경우에도 체세포배가 정상적으로 발아가 되었다. 체세포배를 $GA_3$및 저온 처리한 후 세포의 구조적변화를 전자현미경으로 관찰한 결과 무처리 체세포배의 자엽내 세포는 발아되지 않은 인삼접합자배의 세포와 같이 지질과립 및 세포질이 농후하며 분화되지 않은 미토콘드리아 및 엽록체를 지녀서 세포의 활성이 약한 휴면 상태의 구조를 가지고 있었다. 그러나 저온처리 및 $GA_3$를 처리한 자엽세포는 지질 및 세포질의 분포가 감소된 반면, 잘 발달된 엽록체와 활성이 강한 미토콘드리아의 구조를 보였다. 따라서 저온 및 $GA_3$처리 후 세포의 대사활동이 활발한 것으로 보아 휴면이 타파된 것으로 판단되었다.

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접경지역 천연자원 활용 고부가가치 제품개발 사례 (Case Study of High-value Product Development Utilizing Natural Resources from DMZ)

  • 고혜진;조영락;박주형;이정아;안은경
    • 한국자원식물학회:학술대회논문집
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    • 한국자원식물학회 2019년도 추계학술대회
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    • pp.5-5
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    • 2019
  • DMZ는 살아있는 생물다양성의 보고로 지난 60여년동안 자연적으로 재생이 일어나고 환경적인 강제 보존 영향으로 높은 생태학적인 가치가 유지되고 있으며, 최근에는 남북교류에 대한 활발한 의지로 DMZ생태자원의 남북공동활용 방안에 대한 이슈가 급부상하고 있다. 이에 본 연구진은 3년전부터 DMZ에서 자생하는 식물에 대한 조사를 진행하여 총 200여종 이상의 자생식물의 표본과 추출물들을 보유하고 있으며, 이 추출물들을 활용 in vitro 와 in vivo 평가를 통해 비임상 평가에서 유효한 효과를 나타내는 후보물질들을 다수 찾아낼 수 있었다. 그 중 조팝나무(Spiraea prunifolia var. simpliciflora)는 쌍떡잎식물 장미과에 속하는 낙엽활엽관목으로 동북아시아 지역에 널리 분포되며 우리나라에서는 중부지방에 주로 서식한다고 알려져 있다. 예로부터 해열 및 소염, 신경통완화 치료등에 이용해왔다고 알려져 있으며 그 속에는 다양한 terpenoids, flavonoid 및 phenolic 화합물이 다량 함유되어 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 조팝나무 추출물을 이용하여 전구지방세포에서의 지방세포분화 억제 및 관련 유전자들의 활성을 확인한 후 고지방식이로 유도된 high-fat diet mouse model을 이용하여 체지방 감소 및 내장지방감소, 간 조직내의 지방량 감소등을 확인하였으며, 혈액분석을 통해 총콜레스테롤과 고중성지방등 동맥경화와 심혈관계 질환을 유도시킬수 있는 지표들에서 억제 활성도 확인하였다. 특히 내장 지방의 경우는 Micro-CT를 통해 정밀한 분석을 진행하였고, 체지방뿐만 아니라 전체 체중감소도 나타나는 것을 확인하였다. 현재 실험을 통해 적출된 간 조직과 지방조직을 이용하여 항 비만 활성의 작용기전을 지속적으로 확인하고 있으며, 이 결과는 국제적인 연구저널에 보고되어 향후 체지방 감소 또는 항 비만 치료제로 개발되는 비임상 연구자료로 활용될 계획이다. 이미 조팝나무에 대한 연구결과는 특허로 출원이 완료되어 PCT출원까지 진행중에 있으며 개별인정형 건강기능식품 개발 기업에 기술이전이 될 예정이다. 또한 원활한 원료 수급을 위해 기초단체 소속 농업기술센터와 원료 재배 및 대량 수급에 관한 논의를 마친 상태로 접경지역 근처 농가소득 증대로도 이어지는 제품화 사례이기도 하다. 이는 접경지역에서 자생하는 원료의 활성을 과학적으로 검증하여 기업과의 연계를 통해 기초시군 단체의 농가 소득과도 연계한 우수한 제품개발 사례로 향후에도 이와 같은 연구성과가 지속적으로 도출되기를 기대해본다.

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체지방 감소 고기능성 발현 떫은 감 소재 개발 연구 (Research for Reduction of Body Fat and Development of High Functionality in Young Persimmon Fruit)

  • 김수현;이아름;김경조;김일규;이만휘;김현경;노성수
    • 대한본초학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.1-7
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    • 2018
  • Objectives : This study was conducted to evaluate the antioxidant activity and inhibitory activity of pancreatic lipase in vitro using natural products sangju dungsi, chungdo bansi, kabju baekmok three kind of young persimmon fruit extracts and to develop a high - functional anti - obesity substance with reduced body fat. Methods : The antioxidative effect of the three kind of young persimmon fruit extracts was determined by hot water extraction, 30% EtOH extraction and 70% EtOH extraction. The antioxidant activities were evaluated through radical scavenging assays using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radicals. Furthermore, we examined total phenol and flavonoids contents. And the pancreatic lipase inhibition was measured by selecting the sangju dungsi extract with antioxidant effect. Results : The yield of water, 30% and 70% EtOH extract from young persimmon fruit was sangju dungsi (water 8.3%, 30% EtOH 18.1%, 70% EtOH 16.9%), chungdo bansi (water 16.2%, 30% EtOH 16.1%, 70% EtOH 11.6%), kabju baekmok (water 16%, 30% EtOH 16.8%, 70% EtOH 11.5%). The sangju dungsi 30% EtOH extract eminent DPPH ($IC_{50}$, $19.25{\pm}2.94{\mu}g/m{\ell}$) and ABTS ($IC_{50}$, $19.94{\pm}4.07{\mu}g/m{\ell}$) radical scavenging activity, and total phenol $52.37{\pm}0.78mg/g$ and flavonoid $7.97{\pm}0.13mg/g$ contents were also excellent. It also showed excellent pancreatic lipase inhibition efficacy. Conclusion : The extracts from the three kind of young persimmon fruit extracts showed excellent antioxidant activity. sangju dungsi 30% EtOH extract may be a new anti-obesity material by reducing fat absorption through the inhibition of pancreatic lipase.

방사선에 대한 종양의 반응에서 아포프토시스의 유도와 이에 관련되는 유전자 발현 (Induction of Apoptosis and Expression of Apoptosis-related Gene Products in Response to Radiation in Murine Tumors)

  • 성진실
    • Radiation Oncology Journal
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    • 제15권3호
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    • pp.187-195
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    • 1997
  • 목적 : 세포 독성 인자가 유도하는 아포프토시스에 관한 연구가 대부분 In Vitro 연구에 국한되어온 바, In VIVO에서 방사선에 의한 아포프토시스의 유도와 이에 관여하는 유전자들의 발현 양상을 분석하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 대상 및 방법 : 마우스 동종암으로서 방사선 민감 종양인 난소암 (OC3-1)과 내성 종양인 간암 (HCa-1)을 모델로 하여 이들 종양이 평균 직경 8 mm로 자랐을 때 25 Gy의 방사선을 조사하였다. 조사 후 다양한 시간 간격으로 조직을 채취하여 아포프토시스의 유도 수준을 분석하며 동시에 이에 관련된 유전자 산물인 p53, $p21^{wart/cip1}$, bax, bel-2 등의 발현을 western blotting 을 이용하여 분석하였다. 종양의 p53 상태는 polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism assay로 분석하였다. 결과 : 모델 종양들의 p53 상태는 둘다 자연형으로 나타났다. 방사선 조사로 OCa-1에서는 아포프토시스가 유도되었으나 HCa-1에서는 아포프토시스가 관찰되지 않았다. OCa-1에서 방사선 조사로 p53, $p21^{wart/cip1}$의 발현이 증가되었으며 bel-2/ bax 비율은 감소하였다. HCa기에서는 p53, $p21^{wart/cip1}$의 발현이 증가되었으나 $p21^{wart/cip1}$은 OCa-1과 비교하여 증가 수준이 미약하였다. bel-2/bax 비율은 현저히 증가하였다. 이와 같은 변화들은 방사선 조사에 선행되거나 조사 후 수시간 내에 일어났으며 아포프토시스의 유도에 선행하거나 일치하였다. 결론 : 아포프토시스의 진행에는 p53, $p21^{wart/cip1}$의 증가 뿐만 아니라 bel-21 bax 비율의 변화 가 관여된다는 것이 In vivo에서 확인되었다. p53가 자연형인 경우에도 그 이하 단계의 유전자 발현 양상이 다르게 나타날 수 있으며 이는 세포 독성 요인을 이용한 암 치료시 결과를 예측하는데 있어서 단일 유전자 발현의 평가와 연계되는 복잡성을 시사하고 있다.

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