A lymph node (LN) is one of the secondary lymphoid organs. An LN consists of a complicated 3 dimensional frame structure and several stromal cells. Fibroblastic reticular cells (FRC) are distributed in the T zone for interaction with T cells. FRC secrete homing chemokines such as CCL19 and CCL21. Moreover, FRC play a pivotal role in the production of extracellular matrix (ECM) into LN for ECM reorganization against pathogen infections. However, not much is known about the involvement of the immune reaction of FRC. The present report is for the characterization of FRC on immune response. For this, FRC were positioned in several infected situations such as co-culture with macrophage, lipopolysaccharide (LPS), and TNFα stimulation. When a co-culture between FRC and macrophage was performed, a morphological change in FRC was observed, and empty space between FRCs was created by this change. The soluble ICAM-1 protein level was up-regulated by co-culturing with Raw264.7 and the treatment of the ROCK inhibitor Y27632. The activity of matrix metalloproteinase (MMP) was up-regulated by LPS onto FRC. Furthermore, the inflammatory cytokine TNFα regulated the expression of ECM in FRC by a gene chip assay. Collectively, it suggests that FRC are involved in immune reactions.
Although atopic dermatitis (AD) is known to be a representative skin disorder, it also affects the systemic immune response. In a recent study, myoblasts were shown to be involved in the immune regulation, but the roles of muscle cells in AD are poorly understood. We aimed to identify the relationship between mitochondria and atopy by genome-wide analysis of skeletal muscles in mice. We induced AD-like symptoms using house dust mite (HDM) extract in NC/Nga mice. The transcriptional profiles of the untreated group and HDM-induced AD-like group were analyzed and compared using microarray, differentially expressed gene and functional pathway analyses, and protein interaction network construction. Our microarray analysis demonstrated that immune response-, calcium handling-, and mitochondrial metabolism-related genes were differentially expressed. In the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) and Gene Ontology pathway analyses, immune response pathways involved in cytokine interaction, nuclear factor-kappa B, and T-cell receptor signaling, calcium handling pathways, and mitochondria metabolism pathways involved in the citrate cycle were significantly upregulated. In protein interaction network analysis, chemokine family-, muscle contraction process-, and immune response-related genes were identified as hub genes with many interactions. In addition, mitochondrial pathways involved in calcium signaling, cardiac muscle contraction, tricarboxylic acid cycle, oxidation-reduction process, and calcium-mediated signaling were significantly stimulated in KEGG and Gene Ontology analyses. Our results provide a comprehensive understanding of the genome-wide transcriptional changes of HDM-induced AD-like symptoms and the indicated genes that could be used as AD clinical biomarkers.
Park, Sung-Yong;Song, Hyuk-Hwan;Lee, Yong-Gab;Yoon, Cheol-Sik;Lee, Chan
Food Science and Biotechnology
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v.17
no.1
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pp.95-101
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2008
Some biological activities of Beauveria bassiana were studied to elucidate pharmacological function of B. bassiana-infected larva of the silkworm. The mycelium consisted mainly of carbohydrate (65.8%), followed by protein (15.9%) and fat (8.3%). Glucose (68.8%), mannose (7.1%), and galactose (6.1%) were major components in carbohydrates. Ten amino acids including glutamine, threonine, valine, aspartic acid, alanine, leucine, serine, glycine, arginine, and isoleucine were found in protein as major amino acids. Various extracts were prepared from the freeze-dried mycelium of B. bassiana by systemic extraction and their biological activities were investigated. Among tested fractions, the hot-water extract (HW) contributed significantly to the anti-coagulant activity, anti-complementary activity, and stimulation of intestinal immune system. The methanol extract (ME) increased acetylcholinesterase (AChE) inhibition activity and reactive oxygen species (ROS) scavenging activity.
Tumor therapy using cytokines has been developed for last two decades. Several recombinant cytokines and tumor cell vaccines produced by cytokine gene transfer have been in clinical trials, but several side effects hamper routine clinical applications. Many cytokines are originally expressed as membrane-bound form and then processed to secretory form exerting paracrine effects. Though functional differences of these two types of cytokines are elusive yet, the membrane-bound form of cytokine may exert its effects on restricted target cells as a juxtacrine, which are in physical contacts. With the efforts to improve antitumor activities of cytokines in cancer patients, developing new strategies to alleviate life-threatening side effects became an inevitable goal of tumor immunologists. Among these, tumor cell vaccines expressing cytokines as membrane-bound form on tumor cell surface have been developed by genetic engineering techniques with the hope of selective stimulation of the target cells that are in cell-to-cell contacts. In this review, recent progress of tumor cell vaccines expressing membrane-bound form of cytokines will be discussed.
Bifidobacterium has been previously shown to potentiate immune function, which was mediated through the stimulation of cytokine production by macrophage. This study was performed to further characterize the effective component of Bifidobacterium by measuring the level of interleukin (IL)-6 cytokine using the RAW 264.7 murine cell line as a macrophage model. RAW 264.7 cells were cultured for 24 h in the presence of whole cells (WCs), cell walls (CWs), and cell-free extracts (CFEs) from various strains of Bifidobacterium and other lactic acid bacteria at various concentrations. The most effective component was different depending on the strains and the concentrations used. When tested with each cell fraction from Bifidobacterium sp. BGN4, heat treatment of the cell fractions lowered the production of IL-6. Synergistic effect was obtained, especially when CWs and CFEs were combined. Sonicated WCs stimulated IL-6 production more than intact WCs. The in vitro approaches employed here should be useful in further characterization of the effects of Bifidobacterium on gastrointestinal and systemic immunity.
Background: ADP-ribosyl pyrophosphatases (ADPRase) has been known to catalyze the hydrolysis of ADP-ribose to ribose-5-phosphate and AMP. The role of ADPRase has been suggested to sanitize the cell by removing potentially toxic ADP-ribose. In this study, we examined the effect of nitric oxide on ADPRase activity in macrophages. Methods: ADPRase activity was measured in NO-inducing J774 cells. For in vitro experiments, recombinant human ADPRase was prepared in bacteria. Results: ADPRase activity was increased by the treatment of exogenous NO generating reagent, sodium nitroprusside (SNP), in J774 cells. The increased ADPRase activity was mediated by the post-translational modification, likely to cause cADP-ribosylation via nitrosylation of cysteine residue on the enzyme. The stimulation with endogeneous NO inducers, $TNF-{\alpha}/IFN-{\gamma}$, also increased ADPRase activity through NO synthesis. Futhermore, ADPRase activity may be mediated by the post-translational modification of ADPRase, ADP-ribosylation. Conclusion: These results indicate that NO synthesized by macrophage activation plays a critical role in the increase in ADPRase activity following ADP-ribose metabolism.
Background: Fc receptor-mediated phagocytosis is a complex process involving the activation of kinases and phosphatases. FcgammaRIIB has been known to transduces inhibitory signals through an immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif (ITIM) in cytoplasmic domains. In this study, we examined the involvement of inositol-phosphatase in the Fc receptor-mediated phagocytosis. Methods: J774 cells were infected using vaccinia viral vector containing SH2 domain-containing inositol-phosphatase (SHIP) cDNA and stimulated with the sensitized sheep red blood cells. Results: Stimulation of J774 cells induced the tyrosine phosphorylation of SHIP which was maximal at 5 minutes. Phosphatidylinositol-3 (PI-3) kinase inhibitor (wortmannin) inhibits J774 cell phagocytosis of sensitized sheep red blood cells in a dose-dependent manner. Heterologious expression of SHIP in J774 cells inhibits phagocytosis of sensitized sheep red blood cells in a dose-dependency manner, but catalytically dead mutants of SHIP has no effect on phagocytosis. Conclusion: These results strongly suggest that the active signals mediated by PI-3 kinase are opposed by inhibitory signals through SHIP in the regulation of Fc receptor-mediated phagocytosis.
Phellinus linteus was examined on its immunostimulating activities using an in vitro imunization and plaque forming cell assay. When lymphocytes were exposed to the extract of Phellinus linteus, the number of antibody forming cell was increased. In in vitro plaque forming cell assay, the immunostimulating effect was about 4.8 and 5.0 times of unimmunized control in polyconal and T-independent antibody response, respectively. Especially, Phellinus linteus significantly increased the antigenicity of TNP-LPS used as T-independent antigen. But Phellinus linteus did now show a mitogenic effect on B-lymphcytes. These results suggest that immunostimulating activity of Phillinus lintues might be associated with a functional stimulation of B-lympohocyte involved in humoral immune response.
In order to investigate the Immunomodulatory effects of ginseng, we have studied the effects of ginseng saponin on the proliferation and cytosine gene expression of human pheripheral blood mononuclear cell (PBMC). In the PBMC proliferation assay, total saponin exhibited proliferation inhibition on the PBMC or phytohemagglutinin(PHA)-stimulated PBMC in a dose-dependent fashion. Immunomodulatory effects of ginseng were further investigated using the cytokine gene expression as the indicators. In the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) test, interleukin (IL)-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-13, granulocyte macrophage-colony stimulating factor, tumor necrosis factor (TNF), migration inhibitory factor and transforming growth factor genes were expressed in the PHA-stimulated PBMC 48 hrs after cell culture. Among expressed cytokines, total saponin could increase the expression of IL-1 and TNF of PBMC without stimulation of PHA. All of ginsenosides, $Rb_1$, $Rb_2$, $Rg_1$, Rc, Re, incresed TNF gene expression. Especially, Rb2 (20 g/ml) showed most prominent effect on TNF gene expression and it also slightly increased IL-1 gene expression of PBMC.
Mouse models of chronic toxoplasmosis and atopic dermatitis (AD) were combined to clarify the effect of opportunistic Toxoplasma gondii infection on the development of AD. AD was induced as a chronic contact hypersensitivity (CHS) with repeated challenge of 2,4,6-trinitro-1-chlorobenzene (TNCB) on the dorsal skin of mice. TNCB induced skin thickness increases in both normal and toxoplasmic mice. The changing patterns were different from the sigmoidal which saturated at 20 days in normal mice to the convex saturated at 12 days in toxoplasmic mice with the crossing at 18 days. Compared to normal mice, toxoplasmic mice presented CHS more severely in earlier times and then moderately in later times. These data suggest that host immune modification by T. gondii infection enhances CHS in early times of atopic stimulation but soothes the reaction of CHS in later times in mouse model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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