Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Park, Ho Ki;Chon, Sang Uk;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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제6권1호
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pp.45-50
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2004
Somatic embryos were induced from immature cotyledons and cultured on a MS medium containing 40mg/L 2,4-D. The maximum induction of embryos was obtained from immature cotyledons in a size of 3-4mm, and the highest frequency was obtained in the induction medium at pH 7.0. For embryo development, embryogenic tissues were transferred to a MSM6AC and MSM6 media. Developing embryos were placed at 27$^{\circ}C$with dim light (20$\mu$$molm^{-2}$$s^{-1}$) provided by cool fluorescent tubes (3-D wavelength light is better than standard light). Somatic embryos were clearly developed from globular stage to cotyledonary stages. The color of embryo may be a useful parameter for estimation of embryo quality. When the embryo becomes mature, embryo will be ready for desiccation in order to induce roots and shoots of embryos.
The growing oocytes become progressively capable of resuming meiosis, and full meiotic competence appear when they are about 80% of the size of fully grown oocytes. As hormonal influences vary at different stages of reproductive cycle, the size of oocytes may vary according to the reproductive stages. The present study was designed to compare the diameter between the ovulated and freshly collected immature canine oocytes. The ovulated oocytes were collected 72 hr after ovulation by oviductal tube flushing by laparotomy under general anesthesia. Immature oocytes were collected by ovarian slicing method. Diameter of all oocytes was measured directly using epiflurescence microscope with a calibrated micro-eyepiece micrometer at ${\times}200$ magnification. The thickness of zona pellucida and diameter of cytoplasm were measured separately and recorded. A total of 2209 zona intact oocytes were collected, among them 628 from anestrus, 675 from follicular, 838 from luteal and 68 by fallopian tubes flushing methods. The average number of oocytes was 104.7, 168.8, 119.7 and 11.3 for anestrus, follicular, luteal and fallopian tubes flushing methods, respectively. The average diameters of the ooplasm and oocyte were significantly varied in different reproductive stages as well as with ovulated oocytes (P<0.05). The average diameter of ooplasm and oocyte was 115.6 and 127.7, 143.0 and 162.0, 134.6 and 150.6, 159.6 and 185.6 for anestrus, follicular, luteal and ovulated oocytes, respectively. Highest number of oocytes with larger diameter could be collected from the follicular and luteal stages. In conclusion, the follicular and luteal ovaries are the best sources of oocytes for canine IVM.
Jatropha curcas L. (Physic nut) is a commercially important non-edible oil seed crop known for its use as an alternate source of biodiesel. In order to investigate the morphogenic potential of immature embryo, explants from four developmental stages were cultured on medium supplemented with combinations of auxins and cytokinins. It was found that the size of embryo is critical for the establishment of callus. Immature embryos (1.1-1.5 cm) obtained from the fruits 6 weeks after pollination showed a good response of morphogenic callus induction (85.7%) and subsequent plant regeneration (70%) with the maximum number of plantlets (4.7/explant) on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with IBA (0.5 $mg\;l^{-1}$) and BA (1.0 $mg\;l^{-1}$). The above medium when supplemented with growth adjuvants such as 100 $mg\;l^{-1}$ casein hydrolysate + 200 $mg\;l^{-1}$ L-glutamine + 8.0 $mg\;l^{-1}$$CuSO_4$ resulted in an even higher frequency of callus induction (100%). Plant regeneration (90%) with the maximum number of plantlets (10/explant) was achieved on MS medium supplemented with 500 $mg\;l^{-1}$ polyvinyl pyrrolidone + 30 $mg\;l^{-1}$ citric acid + 1 $mg\;l^{-1}$ BA + 0.5 $mg\;l^{-1}$ Kn + 0.25 $mg\;l^{-1}$ IBA. It was observed that plantlet regeneration could occur either through organogenesis of morphogenic callus or via multiplication of pre-existing meristem in immature embryos. The age of immature embryos and addition of a combination of growth adjuvants to the culture medium appear to be critical for obtaining high regeneration rates. Well-developed shoots rooted on half-halfstrength MS medium supplemented with 0.5 $mg\;l^{-1}$ IBA and 342 $mg\;l^{-1}$ trehalose. The rooted plants after acclimatization were successfully transferred to the field in different agro-climatic zones in India. This protocol has been successfully evaluated on five elite lines of J. curcas.
본 연구는 소형견의 불임 해결을 위해 미숙난자를 보존 후 이용할 수 있는지의 여부를 판명하기 위하여 미성숙 난포란을 시간별로 배양한 뒤 vitrification 동결 융해후 체외수정율과 생존율을 조사하였다. 1 미숙난포란을 회수 후 1, 6, 12, 24시간 성숙 배양 후vitrification동결 융해 후 체외수정 시켰을때 수정율은 각각 31.4%. 22.5%, 11.9% 및 5.3%로서 대조군의 수정율 60.0%에 비해 낮은 성적이었고, 회수 후 시간이 경과되지 않은 난포란이 높은 체외수정율을 나타냈다. 2. 미숙난포란을 회수 후 1, 6, 12 및 24시간 배양시킨 난포란을 vitrification 동결 융해 후 체외 수정시킨 배의 생존율은 각각 55.0%, 40.0%, 28.6% 및 17.1%로써 대조군의 76.7%에 비해 낮은 생존율을 나타냈다.
This study was to evaluate the age-dependent effects of caffeine exposure on the long bones and reproductive organs using male rats. A total of 15 immature male rats and 15 young adult male rats were allocated randomly to three groups: a control group and two groups fed caffeine with 120 and 180 mg/kg/day for 4 weeks. Exposure to caffeine at either dose significantly reduced body weight gain; a proportional reduction in muscle and fat mass in immature animals, whereas a selective reduction in fat mass with relatively preserved muscle mass in young adult animals. The long bones of immature rats exposed to caffeine were significantly shorter and lighter than those of control animals along with decreased bone minerals. However, there was no difference in the length or weight of the long bones in young adult rats exposed to caffeine. Exposure to caffeine reduced the size and absolute weight of the testes significantly in immature animals in comparison to control animals, but not in young adult animals exposed to caffeine. In contrast, the adrenal glands were significantly heavier in caffeine-fed young adult rats in comparison to control animals, but not in caffeine-fed immature rats. Our results clearly show that the negative effects of caffeine on the long bones and testes in rats are different according to the age of the rat at the time of exposure, and might therefore be caused by changes to organ sensitivity and metabolic rate at different developmental stages. Although the long bones and testes are more susceptible to caffeine during puberty, caffeine has negative effects on body fat, bone minerals and the adrenal glands when exposure occurs during young adulthood. There is a need, therefore, to educate the public the potential dangers of caffeine consumption during puberty and young adulthood.
Papillary immature metaplasia (PIM) of the uterine cervix (Immature condyloma) is a subset of low grade squamous intraepithelial lesion (LSIL) which is frequently associated with human papilloma virus (HPV) types 6 and 11. The histologic features of PIM include filiform papillae lined by evenly spaced immature metaplastic-type cells with frequent nucleoli, mild anisokaryosis, and a low mitotic index. To characterize the cytologic changes associated with PIM, we analyzed 14 cases of PIM from our file. We reviewed biopsy slides and the cervicovaginal smears taken proximate to the time of blopsy. Histologically, nine cases had either flat condyloma (7 cases) or high grade squamous intraepithelial lesion (HSIL) (2 cases). Cytologic changes included cells in various stages of maturation with karyomegaly (14 cases), cells with irregularities in the nuclear membrane (13 cases), intermediate cells with karyomegaly(13 cases), cells with binucleatlon (13 cases), and aborted koliocytes (11 cases) Cervicovaginal smears from all cases were interpreted as atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS), NOS or ASCUS, rule out squamous intraepithelial lesion (SIL) or LSIL in two cases with flat condyloma or HSIL in a case with severe dysplasia. PIM is a distinct histologic entity that can present with a spectrum of cytologic findings, but cytologic findings may resemble variable reactive conditions and immature HSIL. Therefore, it is difficult to diagnose PIM by cytology alone. However, the meticulous efforts for making the cytologic diagnoses which can Induce active management of patients are recommended because PIM is a variant of LSIL and frequently has a flat condyloma or HSIL.
자두류중 후무사를 6월 말경에 처음으로 수확하여 5일 간격으로 6차례 채취한 다음 최종 수확 10∼25일전 까지의 후무사 1-4를 미숙과로, 최종 수확 0∼5일전까지의 후무사 5, 6은 완숙과로 구분한 후 각각 메탄을 추출물을 제조하여 대표적인 식중독 세균 4종에 대한 항균력을 조사하였다. 각 균에 대한 후무사의 항균력은 시료 농도가 증가할수록 높은 저해를 보였고, 특히 5.0 mg/disc의 농도에서는 이들 4종의 균 모두에서 가장 높은 항균활성을 나타내었다. 또한 완숙과에 비해 미숙과에서 높은 항균활성을 보였으며, 후무사 1, 2의 경우 가장 강한 항균활성을 보였다. E. coli O157:H7와 S. tyhimurium에 대한 후무사의 항균력도 완숙과에 비해 미숙과에서 항균력이 높았고, 특히 5.0 mg/disc 농도에서는 E. coli에 비해 S. typhimurium에서 항균활성이 감소되었다. 그람양성균인 고 L. monocytogenes와 S. aureus에 대한 후무사의 항균력도 완숙과에 비해 미숙과에서 높은 항균활성을 보이고, 시료 농도가 증가할수록 더 큰 억제 효과를 보였다. 그리고 후무사 미숙과의 최소 저해 농도는 E coli의 경우 320 $\mu\textrm{g}$/mL, S. aureus에서 160 $\mu\textrm{g}$/mL, S. typhimurium과 L. monocytogenes은 640 $\mu\textrm{g}$/mL이었다. 이와 같이 후무사 메탄올추출물은 4종의 식중독균에 대해 우수한 항균활성을 보였고, 특히 완숙과에 비해 미숙과에서 높은 항균활성이 존재함을 확인하였다.
The sexual maturation occurred by the changes of steroid hormones was known to sex-dependently and/or age-dependently regulate the lipid metabolism in various animal species. Our current study demonstrates that lipid and its functional fatty acids can be changed depending on the status of sexual maturation. Of the functional fatty acids, ${\gamma}$-linolenic acid (GLA; 18:3n-6) is an important factor for maintaining human health. The purpose of our study was to investigate the level of GLA in mice with different stages of sexual maturation. To this end, the longissimus muscle (LM) of immature (3-week-old) and mature (7-week-old) female mice was analysed for the fatty acid composition by gas chromatography. Furthermore, both gene and protein level of ${\Delta}6$ desaturase (FADS2) which is involved in GLA metabolism by real time PCR and Western blotting, respectively. Mature females showed greater (P<0.05) serum $17{\beta}$-estradiol (E2) level and LM GLA contents than immature group. The mRNA and protein levels of FADS2, which converts precursor linoleic acid into GLA, were higher (P<0.05) in mature female mice than in immature mice. In conclusion, these results show that sexual maturation of female mice induces GLA and FADS2 contents in LM.
The mechanism by which gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and dopamine (DA) control gonadotropin (GTH) release was studied in male and female rainbow trout using cultured pituitary cells obtained at different reproductive stages. The mechanisms of follicle-stimulating hormone (FSH) release by GnRH and DA could not be determined yet. However, basal and salmon-type GnRH (sGnRH)- or chicken-II-type GnRH (cGnRH-II)- induced luteinizing hormone (LH) release increased with gonadal maturation in both sexes. LH release activity was higher after sGnRH stimulation than cGnRH-II stimulation at maturing stages in both sexes. The GnRH antagonist ([Ac-3, 4-dehydro-$Pro^1$, D-p-F-$Phe^2$, D-$Trp^{3,6}$] GnRH) suppressed LH release by sGnRH stimulation in a dose-dependent manner, although the effect was weak in maturing fish. The role of DA as a GTH-release inhibitory factor differs during the reproductive cycle: the inhibition of sGnRH-stimulated LH release by DA was stronger in immature fish than in maturing, ovulating, or spermiated fish. DA did not completely inhibit sGnRH-stimulated LH release, and DA alone did not alter basal LH release. Relatively high doses ($10^{-6}$ or $10^{-5}M$) of domperidone (DOM, a DA D2 antagonist) increased LH release, which did not change with reproductive stage in either sex. The potency of DOM to enhance sGnRH-stimulated LH release was higher in maturing and ovulated fish than in immature fish. These data suggest that LH release from the pituitary gland is controlled by dual neuroendocrine mechanisms by GnRH and DA in rainbow trout, as has been reported in other teleosts. The mechanism of control of FSH release, however, remains unknown.
Lee, Mee Youn;Seo, Han Sol;Singh, Digar;Lee, Sang Jun;Lee, Choong Hwan
Journal of Ginseng Research
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제44권3호
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pp.413-423
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2020
Background: Ginseng berries (GBs) show temporal metabolic variations among different maturation stages, determining their organoleptic and functional properties. Methods: We analyzed metabolic variations concomitant to five different maturation stages of GBs including immature green (IG), mature green (MG), partially red (PR), fully red (FR), and overmature red (OR) using mass spectrometry (MS)-based metabolomic profiling and multivariate analyses. Results: The partial least squares discriminant analysis score plot based on gas chromatography-MS datasets highlighted metabolic disparity between preharvest (IG and MG) and harvest/postharvest (PR, FR, and OR) GB extracts along PLS1 (34.9%) with MG distinctly segregated across PLS2 (18.2%). Forty-three significantly discriminant primary metabolites were identified encompassing five developmental stages (variable importance in projection > 1.0, p < 0.05). Among them, most amino acids, organic acids, 5-C sugars, ethanolamines, purines, and palmitic acid were detected in preharvest GB extracts, whereas 6-C sugars, phenolic acid, and oleamide levels were distinctly higher during later maturation stages. Similarly, the partial least squares discriminant analysis based on liquid chromatography-MS datasets displayed preharvest and harvest/postharvest stages clustered across PLS1 (11.1 %); however, MG and PR were separated from IG, FR, and OR along PLS2 (5.6 %). Overall, 24 secondary metabolites were observed significantly discriminant (variable importance in projection > 1.0, p < 0.05), with most displaying higher relative abundance during preharvest stages excluding ginsenosides Rg1 and Re. Furthermore, we observed strong positive correlations between total flavonoid and phenolic metabolite contents in GB extracts and antioxidant activity. Conclusion: Comprehending the dynamic metabolic variations associated with GB maturation stages rationalize their optimal harvest time per se the related agroeconomic traits.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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