These studies were undertaken to examine the interaction of tamoxifen with sex steroid hormones in rat uterine activity. The uterine wet weights of the immature Tat uterus were examined after the administration of estradiol-l7$\beta$(1$\mu$g), tamoxifen(50$\mu$g), progesterone(lmg). The uterotropic activity in immature ovariectomized rats was observed under various treatment conditions following pretreatment with above drugs. The results obtained were as follows:1) Tamoxifen produced significant increase (p <0.01) in uterine wet weight compared with control group, although the increase was not as great as that seen with estradiol-17$\beta$. Administration of estradiol-17$\beta$ together with tamoxifen inhibited significantly the increase of uterine wet weight by estradiol-17$\beta$ (p < 0.01). Coadministration of progresterone with tamoxifen partly blocked the increase of tamoxifen-induced uterine wet weights by progesterone. 2) Estradiol-17$\beta$after the estradiol-17$\beta$ pretreatment discontinued the declining uterine wet weights due to the absence of estrogen support, but uteri continued to increase in weight if daily estradiol-17 $\beta$ was maintained. Administration of tamoxifen on the fourth day of estradiol-17$\beta$ treatment reduced uterine wet weights within 24 hours, and the weights continued to decline with additional tamoxifen. 3) The modest growth of the uterus induced by three daily injections of 5Opg tamoxifen remained stable for five days, with or without additional tamoxifen treatment. Coadministration of tamoxifen with estradiol17$\beta$ increased slightly the increase of uterine wet weight by tamoxifen. Coadministration of tamoxifen with progesterone inhibited the increase of uterine wet weight by tamoxifen. 4) The modest growth of the uterus induced by three daily injections of lmg progesterone reduced uterine wet weight to the control level for five days. Commencement of tamoxifen or estadiol-17 $\beta$ injections on the fourth day of progesterone treatment rapidly elevated uterine wet weight.
The purpose of this experiment was to investigate the effects of adrenalectomy and PMSG treatment on reproductive organs and serum steroid hormone level in immature female rats. The animals used in this experiment were 25 days old female rats weighing a, pp.oximately 70g. They were randomly divided into two groups of intact rat group (Int-) and adrenalectomized rat group (Adx-) and each group were subdivided into two groups of Non-PMSG (-Cont) and PMSG treated (-PMSG) group. The rat of PMSG-treated group (-PMSG) was administered subcutaneously with 25 IU PMSG on first day (9 a.m.) after adrenalectomy. The adrenalectomized rat groups were su, pp.ied with saline solution through the experiment period. The rate of ovulation and vaginal opening and reproductive organ weights were observed at 8, 32, 56, 80 and 104 hours after PMSG treatment. At the same time, the serum level of estradiol-17${\beta}$ and progesterone were measured by the radioimmunoassay. The results obtained were as follows: 1. Ovulation was shown at 56 hours after treatment in Int-PMSG group and Adx-PMSG group and Adx-PMSG group. The rate of ovulation was very low in PMSG-treated groups, but it was increased in 80 to 90% at 104 hours after treatment. However, there was no ovulation in Int-Cont group and Adx-Cont group. 2. Vaginal opening was shown at 56 hours after treatment in Int-PMSG group and Adx-PMSG group and a, pp.ared in 80% at 104 hours after treatment. The rate of vaginal opening in PMSG-treated groups was very low, but Int-Cont group and Adx-Cont group had no vaginal opening. 3. The weight of ovary and uterus in two PMSG-treated groups were increased with the elapse of time after treatment and were significantly heavy in all observation time, but changes in Int-Cont group and Adx-Cont group were not recognized. The weights of ovaries and utera in Adx-Cont group were increased with the elapse of time. 4. The level of serum estradiol-17${\beta}$ was remarkably increased in PMSG-treated groups (Int-PMSG and Adx-PMSG groups) compared with Int-Cont and Adx-Cont group, and significant difference was recognized between Non-PMSG group and PMSG-treated group in the experimental period. Especially, the highest levels of Int-PMSG groups and Adx-PMSG groups were shown at 80 and 56 hours after treatment and after ward estradiol-17${\beta}$ levels of PMSG-treated groups were decreased. However, changes of the levels did not a, pp.ared in Non-PMSG groups at 104 hours after treatment. 5. The level of serum progesterone in PMSG-treated groups was significantly increased between 80 and 104 hours after treatment. With the elapse of time, the level was increased in all observed groups except for Int-Cont and Adx-Conx group. And the order from the highest level at 104 hours after treatment was Int-PMSG, Adx-PMSG, Int-Cont and Adx-Cont group.
Kim, Soon-Sun;Rhee, Gyu-Seek;Lee, Rhee-Da;Kwack, Seung-Jun;Lim, Kwon-Jo;Yhun, Hyo-Jung;Park, Kwang-Sik;Park, Kui-Lea
한국독성학회:학술대회논문집
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한국독성학회 2003년도 추계학술대회
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pp.149-149
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2003
It is well known that many pesticides possess hormonal activity, and thus have been classified as endocrine disruptors. Currently, pyrethroid insecticides are in worldwide use to control in door pests, providing potential for environmental exposure. A few studies of hormonal activities of these pyrethroid insecticides, however, have been reported, and are controversial between studies.(omitted)
The present study has been carried out to elucidate the antiestrogenic effects of tamoxifen on RNA and protein synthesis in uteri of immature rats. Immature female Sprague-Dawley rats were allocated into 4 groups and injected with $5{\mu}g$ of estradiol-$17{\beta}$, $50{\mu}g$ of tamoxifen, a combination of both, or vehicle only subcutaneously three times with an interval of 24 hours respectively. The specific activities of $^3H$-uridine incorporation into uterine RNA and those of $^3H$-leucine incorporation into uterine protein were measured before and 1, 3, 6, 12, 24, 48 and 72 hours after the above treatments. The results obtained were summarized as follows; 1. Tamoxifen itself increased RNA synthesis an hour after treatment(169.18% of control), but it's specific activity was reduced to control level after 3 hours. Tamoxifen inhibited significantly (p<0.01) the activity of RNA synthesis of estradiol-$17{\beta}$. 2. The increasing rate of protein synthesis was lower in tamoxifen treated group than that in estradiol-$17{\beta}$ treated group. While the rate was steadily increased up to 357.4% of control by estradiol-$17{\beta}$ in 72 hours, tamoxifen itself failed to increase the rate after 24 hours and significantly (p<0.01) inhibited the activity of estradiol-$17{\beta}$(-167.4%).
The inhibitory activity against bisphenol-A (BPA), one of well-known endocrine disrupters was examined with the water extracts prepared from the Stem Bark of Syringa velutina (SBS). In this study, we have investigated the effect of SBS on the toxicity caused by BPA in human breast cancer cell line, MCF-7 cells and immature Sprague-Dawley rats. In the estrogen receptor-mediated proliferation assay using MCF-7 cells, BPA (16 ng/ml) induced the cell proliferation, but the water extract of SBS inhibited BPA-induced cell proliferation in a dose-dependent manner. These results are associated with PARP degradation and specific cleavage of anti-apoptotic protein Bcl-2 of apoptotic regulatory factors. Additionally, the BPA (400 mg/100 g) significantly induced the increase of the uterine and virginal weights, while SBS (50 mg/100 g) showed the inhibitory action against BPA, i.e. caused the increase of estrogen-related organ weights in immature rat uterotrophic assay. Taken together, the present data suggest that SBS may have anti-toxicity activities against BPA in vitro and in vivo systems. SBS may be capable of inhibiting adverse effects of BPA such as reproductive disorder.
Adipose tissue is one of the major endocrine gland. More recently, local production of steroids in adipocytes differentiated from mouse 3T3-L1 cell-line was reported. We hypothesized that rat adipocytes have steroidogenic machinery and the expression patterns of the components might be differentially regulated, depending on the distribution and sex. To verify this hypothesis, we collected the adipose tissues depot-and sex-specifically at postnatal day (PND) 30, and performed quantitative RT-PCRs. In overall aspects, the abundances of the transcripts were lower in the brown adipose of both sexes. $3{\beta}-HSD$ transcript levels in female abdominal and reproductive adipose, CYP17 transcript levels in female reproductive adipose, $17{\beta}-HSD$ transcript levels in female abdominal and reproductive adipose, and CYP19 transcript levels in female abdominal adipose were significantly lower than those of male counterparts. Similar to steroidogenic factors, the abundance of the $ER-{\alpha}$ transcripts were generally lower in the brown adipose of both sexes. $ER-{\beta}$ transcripts were more abundant in male white adipose depots than their female counterparts. The levels of LHR transcripts in female reproductive adipose were significantly higher than those of male counterpart. In conclusion, our study demonstrated that the expressions of steroidogenesis-related genes were depot- and sex-specifically occurred in the immature male and female rat adipose tissues. Our study suggested that the adipose tissues are not only targets but de novo synthesizing sites of sex steroid(s), though the synthesizing activities could be much less than in gonads. Further researches in this field will be helpful for understanding the adipose physiology and for medical application such as sex-specific steroid supplement therapies for older populations.
Yu, Jeong-Min;Yoo, Seong-Jin;Kim, Do-Rim;Youm, Mi-Young, Kim, Jee-Yun;Kang, Sung-Goo
한국수정란이식학회:학술대회논문집
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한국수정란이식학회 2002년도 국제심포지엄
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pp.112-112
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2002
Under normal conditions, women produce a single dominant follicle that participates in a single ovuation each menstrual cycle. But Polycystic ovary syndrome(PCOS) conditions, folliculogenesis does not proceed normally. This condition leads to the accumlation of large numbers of small graffian follicles in which the theca interstitial cells (TIC) produce abnormally large amounts of androgen. PCOS is probably the most common endocrine disorder, affecting women of reprodutive age with 5-10% prevalence estimate. Chronic anovulation, hyperandrogenism, hirsutism, obesity, infertility and polycystic ovaries are clinical hallmarks of women with PCOS. Its etiology remains unknown. To investigate the gene expression pattern of ovary in PCO-induced rat, we used cDNA expression analysis. Total RNA was extracted from the ovary of PCO-induced rat and reverse-transcribed in the presence of[$\alpha$$^{32}$P]-dATP Which were hybridized to Atlas$^{TM}$ Rat Toxicology 1.2 array (Clontech) representing approximately 1176 rat genes. We compared gene expression between ovary of pco-induced immature female rats and control. Differential gene expression profiles were revealed (LIFR-alpha, ADRA1A, Heat shock 90-kDa protein A, PDGFRA). Reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) was used to validate the relative expression pattern obtained by the cDNA array. The precise relationship between the altered expression of genes and PCO is a matter of further investigation. This study was supported by Korea Science and Engineering Foundation(KOSEF)
본 연구에서는 흰쥐 자궁에서 pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP)과 그 수용체 유전자들이 발현되는가와 각각 어떠한 유형의 transcript들이 발현되는가를 조사하였고, 이를 위해 역전사 중합효소 연쇄반응 (RT-PCR)을 시행하였다. 시상하부와 정소에서 공통적으로 존재함이 알려진 PACAP common exon 부위에 해당되는 primer를 사용하여 PCR을 시행한 결과 자궁을 포함한 모든 조직에서 에상대로 297 bp의 band가 확인되었다. 흰쥐 자궁에서 발현되는 PACAP mRNA에 정소 특이적인 exon 1이 포함되는가를 조사하기 위해 정소 특이적인 primer를 사용하여 PCR을 시행한 결과, 정소에서만 예상대로 586 bp의 band가 검출되었고 자궁을 포함한 다른 조직에서는 발견되지 않았다. 흰쥐의 PACAP 수용체 PCR에서는 자궁에서 923 bp와 839 bp크기의 band를 확인할 수 있었으며, 이는 알려진 PACAP type I수용체의 splicing variant 들 가운데 hip-hop (923bp)과 hip- 또는 nop-type (839bp)의 예상 크기와 일치하였다. 인위적으로 성적인 성숙을 유도한 PMSG 주사모델하에서 자궁내 PACAP transcript 수준은 주사 24 시간 후 실험군에서 증가하여 생식주기상 proestus 시기에 해당되는 주사 48 시간까지 증가하였다가 72 시간후에는 control 보다 낮은 수준을 보였는데, 이는 자궁의 PACAP 유전자발현이 생리적으로 조절됨을 나타내는 것이다. 본 연구는 흰쥐의 자궁에서 PACAP과 그 수용체 isoform들의 유전자가 발현됨을 최초로 보고한 것으로 자궁 자체에서 발현되는 PACAP이 autocrine 또는 paracrine하게 자궁의 생리 및 기능 조절을 담당함을 시사한다.
Kim, Hyun;Matsuwaki, Takashi;Yamanouchi, Keitaro;Nishihara, Masugi;Yang, Boh-Suk;Ko, Yeoung-Gyu;Kim, Sung-Woo
한국수정란이식학회지
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제26권4호
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pp.229-235
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2011
Sloan-Kettering virus gene product of a cellular protooncogene c-Ski is an unique nuclear pro-oncoprotein and belongs to the Ski/Sno proto-oncogene family. Ski plays multiple roles in a variety of cell types, it can induce both oncogenic transformation and terminal muscle differentiation when expressed at high levels. Ski protein is implicated in proliferation/differentiation in a variety of cells. The alternative fate of granulosa cells other than apoptosis is to differentiate to luteal cells, however, it is unknown whether Ski is expressed and has a role in granulosa cells undergoing luteinization. Thus, the aim of this study was, by means of immunohistochemical methods, to locate Ski protein in the rat ovaries during ovulation and corpora lutea (CL) formation to predict the possible involvement of Ski in luteinization. In addition, we performed to examine whether the initiation of luteinization with luteinizing hormone (LH) directly regulates expression of Ski in the luteinized granulosa and luteal cells after ovulation by in vivo models. In order to examine the expression pattern of Ski protein along with the progress of luteinization, follicular growth was induced by administration of equine chorionic gonadtropin to immature female rat, and luteinization was induced by human chorionic gonadtropin treatment to mimic luteinizing hormone (LH) surge. While no Ski-positive granulosa cells were present in preovulatory follicle, Ski protein expression was induced in response to LH surge, and was maintained after the formation of corpus luteum (CL). These results indicate that Ski is profoundly expressed in the luteinized granulosa cells and luteal cells of CL during luteinization, and suggest that Ski may play a role in luteinization of granulosa cells.
Kim, Hyun;Matsuwaki, Takashi;Yamanouchi, Keitaro;Nighihara, Masugi;Kim, Sung-Woo;Ko, Yeoung-Gyu;Yang, Boh-Suk
Reproductive and Developmental Biology
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제35권3호
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pp.355-361
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2011
Ski protein is implicated in proliferation/differentiation in a variety of cells. We had previously reported that Ski protein is present in granulosa cells of atretic follicles, but not in preovulatory follicles, suggesting that Ski has a role in apoptosis of granulosa cells. The alternative fate of granulosa cells other than apoptosis is to differentiate to luteal cells, however, it is unknown whether Ski is expressed and has a role in granulosa cells undergoing luteinization. Thus, the aim of the present study was to locate Ski protein in the rat ovary during luteinization to predict the possible role of Ski. In order to examine the expression pattern of Ski protein along with the progress of luteinization, follicular growth was induced by administration of equine chorionic gonadotropin to immature female rat, and luteinization was induced by human chorionic gonadotropin treatment to mimic luteinizing hormone (LH) surge. While no Ski-positive granulosa cells were present in preovulatory follicle, Ski protein expression was induced in response to LH surge, and was maintained after the formation of corpus luteum (CL). Though Ski protein is absent in granulosa cells of preovulatory follicle, its mRNA (c-ski) was expressed and the level was unchanged even after LH surge. Taken together, these results demonstrated that Ski protein expression is induced in granulosa cells upon luteinization, and suggested that its expression is regulated post-transcriptionally.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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