This study was designed to find out the effects of soybean protein and milk protein between nondiabetic and diabetic rats. The experimental results are summarized as follows. 1. Total food intake was higher in diabetic soybean protein group than other groups but it was not significant. 2. The change of body weight was lower in diabetic soybean protein group than other groups and the soybean protein was effective to maintain the ideal body weight. 3. The effects of lowering total cholesterol and glucose in serum was higher in soybean protein groups than the milk protein groups.
The iLOV protein belongs to a family of blue-light photoreceptor proteins containing a light-oxygen-voltage sensing domain with a noncovalently bound flavin mononucleotide (FMN) as its chromophore. Owing to advantages such as its small size, oxygen-independent nature, and pH stability, iLOV is an ideal candidate over other reporter fluorescent proteins such as GFP and DsRed. Here, for the first time, we describe the feasibility of applying LOV domain-based fluorescent iLOV as a metal sensor by measuring the fluorescence quenching of a protein with respect to the concentration of metal ions. In the present study, we demonstrated the inherent copper sensing property of the iLOV protein and identified the possible amino acids responsible for metal binding. The fluorescence quenching upon exposure to Cu2+ was highly sensitive and exhibited reversibility upon the addition of the metal chelator EDTA. The copper binding constant was found to be 4.72 ± 0.84 µM. In addition, Cu2+-bound iLOV showed high fluorescence quenching at near physiological pH. Further computational analysis yielded a better insight into understanding the possible amino acids responsible for Cu2+ binding with the iLOV protein.
An interesting recent application of intermolecular NOE experiment is the saturation transfer difference NMR(STD-NMR) method that is useful in screening compound libraries to identify bio-active ligands. This technique also identifies the group epitopes of the bound ligand in a reversibly forming protein-ligand complex. We present here a complete relaxation and conformational exchange matrix (CORCEMA) theory (Moseley et al., J. Magn. Reson. B, 108, 243-261 (1995)) applicable for the STD-NMR experiment. Using some ideal model systems we have analyzed the factors that influence the STD intensity changes in the ligand proton NMR spectrum when the resonances from some protons on the receptor protein are saturated. These factors will be discussed and some examples of its application in some model systems will be presented. This CORCEMA theory for STD-NMR and the associated algorithm are useful in a quantitative interpretation of the STD-NMR effects, and are likely to be useful in structure-based drug design efforts. They are also useful in a quantitative characterization of protein-protein (or protein-nucleic acid) contact surfaces from an intermolecular cross-saturation NMR experiment.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2008.04a
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pp.77-86
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2008
It's been known that overexpression of the oncoprotein Her2 (eu/ErbB2), transmembrane receptor protein, occurs in human breast cancer. Her2-positive breast cancer patients who have Her2 overexpression show less therapeutic efficacy with enhanced metathesis and increased resistance to chemotherapy. So far, a humanized monoclonal antibody against Her2 protein called Herceptin is the only drug approved by Food and Drug Administration for treatment of Her2-overexpressing breast tumors. However, antibody therapy of Herceptin may not be ideal method for therapeutic intervention of Her2 protein expression. The therapeutic intervention of Her2 protein expression may be more efficiently achieved by inhibiting the expression of Her2 gene rather than by down-regulating the Her2 protein already overexpressed. Here, we found that the interaction of two proteins of ESX (an epithelial-restricted transcription factor) and DRIP130/CRSP130/Sur2 (a Ras-linked subunit of human mediator complexes) mediates the expression of Her2 gene. The association of ESX with Sur2 is mediated by a small hydrophobic face of 8-amino acid helix in ESX, suggesting that the ESX-Sur2 interaction can be a new novel target for Her2-positive cancer. The process to develop potent ESX-Sur2 interaction inhibitors targeting for Her2-positive cancer therapeutics will be discussed.
Background: Major amino acids in pig diets are Lys, Met, Thr, and Trp, but little is known about the requirements for the other essential amino acids, especially on odorous compounds and microbial characteristics in feces of growing-finishing pigs. To this end, different levels of amino acid composition added to diets to investigate the effects of amino acid composition on microbial characteristics and odorous compounds concentration. Methods: A total eight (n = 8) barrows (Landrace ${\times}$ Yorkshire ${\times}$ Duroc) with an average bodyweight of $89.38{\pm}3.3kg$ were individually fed diets formulated by Korean Feeding Standards 2007 (old version) or 2012 (updated with ideal protein concept) in metabolism crates with two replication. After 15-day adaptation period, fresh faecal samples were collected directly from pigs every week for 4 weeks and analysed for total volatile fatty acids (VFA), phenols and indoles by using gas chromatography. The nitrogen was determined by Kjeldahl method. Bacterial communities were detected by using a 454 FLX titanium pyrosequencing system. Results: Level of VFA tended to be greater in 2012 than 2007 group. Among VFAs, 2012 group had greater (p < 0.05) level of short chain fatty acids (SCFA) than control.Concentration of odorous compounds in feces was also affected by amino acid composition in pig diet. Levels of ammonium and indoles tended to be higher in 2012 group when compared with 2007 group.Concentration of phenols, p-cresol, biochemical oxygen demand, and total Kjeldahl nitrogen, however, were lower (P < 0.05) in 2012 treatment group compare to 2007. The proportion of Firmicute phylum were decreased, while the Bacteriodetes phylum proportion increased and bacterial genera includingCoprococcus, Bacillus, and Bacteroides increased (p < 0.05) in 2012 compare to 2007 group. Conclusion: Results from our current study indicates that well balanced amino acid composition reduces odor by modulating the gut microbial community. Administration of pig diet formulated with the ideal protein concept may help improve gut fermentation as well as reduce the odor causing compounds in pig manure.
Ku, Sebastian Chih Yuan;Lwa, Teng Rhui;Giam, Maybelline;Yap, Miranda Gek Sim;Chao, Sheng-Hao
Molecules and Cells
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v.27
no.5
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pp.577-582
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2009
The development of a high-throughput functional genomic screening provides a novel and expeditious approach in identifying critical genes involved in specific biological processes. Here we describe a cell-based cDNA screening system to identify the transcription activators of BiP, an endoplasmic reticulum (ER) chaperone protein. BiP promoter contains the ER stress element which is commonly present in the genes involved in unfolded protein response (UPR) that regulates protein secretion in cells. Therefore, the positive regulators of BiP may also be utilized to improve the recombinant protein production through modulation of UPR. Four BiP activators, including human UDP-glucose:glycoprotein glucosyltransferase 1 (HUGT1), are identified by the cDNA screening. Overexpression of HUGT1 leads to a significant increase in the production of recombinant erythropoietin, interferon ${\gamma}$, and monoclonal antibody in HEK293 cells. Our results demonstrate that the cDNA screening for BiP activators may be effective to identify the novel BiP regulators and HUGT1 may serve as an ideal target gene for improving the recombinant protein production in mammalian cells.
Proceedings of the Korean Biophysical Society Conference
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1999.06a
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pp.39-39
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1999
Single chain-monellin (SCM) was recently constructed by fusing the two chains of monellin. From the view of protein folding, SCM serves as an ideal model system especially in tackling ${\alpha}$-helix-${\beta}$-sheet interactions due to the following reasons: First, it consists of simple distinct structural elements (${\alpha}$-helix and ${\beta}$-sheet) which are assembled in a perpendicular manner.(omitted)
The rat is an accepted model for studying human psychiatric/neurological disorders. We provide a protocol for total soluble protein extraction using trichloroacetic acid/acetone (TCA/A) from rat (female) whole brain, 10 brain regions and the pituitary gland, and show that two-dimensional gel electrophoresis (2-DGE) using precast immobilized pH (4-7) gradient (IPG) strip gels (13 cm) in the first dimension yields clean silver nitrate stained protein profiles. Though TCA/A precipitation may not be "ideal", the important choice here is the selection of an appropriate lysis buffer (LB) for solubilizing precipitated proteins. Our results reveal enrichment of protein spots by use of individual brain regions rather than whole brain, as well as the presence of differentially expressed spots in their proteomes. Thus individual brain regions provide improved protein coverage and are better suited for differential protein detection. Moreover, using a phosphoprotein-specific dye, ingel detection of phosphoproteins was demonstrated. Representative high-resolution silver nitrate stained proteome profiles of rat whole brain total soluble protein are presented. Shortcomings apart (failure to separate membrane proteins), gel-based proteomics remains a viable option, and 2-DGE is the method of choice for generating high-resolution proteome maps of rat brain and brain regions.
A screening method has been developed for detecting sulfamethazine(SMZ) contamination of meat or feeds by using horseradish peroxidase (HRP) labeled protein A (Prot AHRP)and an indirect competitve enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). The assay is based on competitve binding of guinea pig anti-SMZ with SMZ in smaple and SMZ-gelatin conjugate(SMZ.GEL). Percent binding (B.Bo$\times$100) was calculated from the absorbance in the absence (B0) and presence (B) of SMZ. By the sandard curve prepared by plotting log(SMZ) vs percent binding of each known reference solution, the detection limit was 1.0ppb or less. Cross reacton with sulfadimethoxine, sulfaguaniding, sulfamerazine, sulfamthoxpyridazine, sulfanilamide, sulfisomidine and sufisoxazole were not observed. But sulfamerazine crossreacted in the test. The EC-50 value (concentration causing 50% inhibition of color development compared with blank) of sulfamerazine was 2.0 ppm. Further quality control will make the ELISA system ideal for the detection of SMZ in meat or feeds.
Park, Sangwoo;Lee, Jeong Jae;Kyoung, Hyunjin;Kang, Joowon;Kim, Soyun;Choe, Jeehwan;Song, Minho;Kim, Younghoon
Korean Journal of Agricultural Science
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v.47
no.4
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pp.783-789
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2020
This study was conducted to evaluate growth performance of weaned pigs using diets based on ideal protein of the Korea swine feeding standard (KFS) and US the nutrient requirements of swine (NRC). A total of 96 weaned (initial body weight of 6.12 ± 1.21 kg) pigs were randomly allocated into 2 dietary groups with 12 pens per diet (4 pigs·pen-1) in a completely randomized design. The dietary treatments were corn and soybean meal-based diets formulated by the KFS and NRC nutrient requirements estimates for weaned pigs. Experimental diets were fed for 6 weeks in 2 phases feeding program based on age: 1) Phase 1 = week 1 to 3 (21 days); 2) Phase 2 = week 4 to 6 (21 days). During Phase 1 and 2, there were no differences (p > 0.05) for the initial and final body weights between the KFS and NRC groups. Additionally, the average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI), and gain to feed ratio (G : F) during overall experimental period were not different between the groups. In conclusion, weaned pigs fed the diet based on the KFS had a similar body weight and growth performance to those fed the diet based on the NRC. This suggests that the Korea swine feeding standard may be used for the diet formula of weaned pigs in Korea swine production compared with the US nutrient requirements of swine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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