This study aimed to investigate the morphology and reconstruct the phylogenetic relationships of Centrocestus formosanus originating from 5 species of freshwater fish, i.e., Esomus metallicus, Puntius brevis, Anabas testudineus, Parambassis siamensis, and Carassius auratus, in Chiang Mai province, Thailand. Sequence-related amplified polymorphism (SRAP) and phylogeny based on internal transcribed spacer 2 (ITS2) and mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (CO1) were performed. The results showed similar morphologies of adult C. formosanus from day 5 after infection in chicks. C. formosanus originated from 4 species of freshwater fish had the same number of circumoral spines on the oral sucker, except for those from C. auratus which revealed 34 circumoral spines. The phylogenetic tree obtained from SRAP profile and the combination of ITS2 and CO1 sequence showed similar results that were correlated with the number of circumoral spines in adult worms. Genetic variability of C. formosanus also occurred in different species of freshwater fish hosts. However, more details of adult worm morphologies and more sensitive genetic markers are needed to confirm the species validity of C. formosanus with 34 circumoral spines originating from C. auratus in the future.
Two strains isolated from a subtropical region in China, were morphologically identified as a Nostoc-like species, but its taxonomic identity was unknown. In this study, these two strains were taxonomically and phylogenetically characterized based on polyphasic approach combining morphological and genetic characteristics. Though both were virtually indistinguishable from Nostoc in field and cultured material, these two strains were phylogenetically distinct from Nostoc based on 16S rRNA phylogeny. The 16S-23S internal transcribed spacer rRNA secondary structure of these strains showed the unique pattern of D1-D1', Box-B, and V3 helix, which distinguished them from other Nostoc-like heterocytous genera. A unique cluster separated from Nostoc sensu stricto supports the establishment of Violetonostoc gen. nov. with the type species as Violetonostoc minutum sp. nov.
Rhodomonas (Cryptophyceae) and species assigned to this genus have undergone numerous taxonomic revisions. This also applies to R. marina studied here as it was originally assigned as a species of Cryptomonas and later considered a variation of R. baltica, the type species. Despite being described more than 130 years ago, R. marina still lacks a comprehensive characterization. Light and electron microscopy were employed to delineate a strain from western Greenland. The living cells were 18 ㎛ long and 9 ㎛ wide, elliptical in shape with a pointed to rounded posterior and truncated anterior in lateral view. Two sub-equal flagella emerged from a vestibulum, where also a furrow extended. In transmission electron microscopy, the furrow was associated with a tubular gullet and the pyrenoid embedded in a deeply lobed chloroplast. The chloroplast contained DNA in perforations and was surrounded by starch grains. A tubular nucleomorph was enclosed within the pyrenoid matrix. In scanning electron microscopy, the inner periplast consisted of rectangular plates with rounded edges and posteriorly these were replaced by a sheet-like structure. The water-soluble pigment was Crypto-Phycoerythrin type I (Cr-PE 545). A phylogenetic inference based on SSU rDNA confirmed the identity of strain S18 as a species of Rhodomonas as it clustered with congeners but also Rhinomonas, Storeatula, and Pyrenomonas. These genera formed a monophyletic clade separated from a diverse assemblage of other cryptophyte genera. To further explore the phylogeny of R. marina a concatenated phylogenetic analysis based on the SSU rDNA-ITS1-5.8S rDNA-ITS2-LSU rDNA region was performed but included only closely related species. The secondary structure of nuclear internal transcribed spacer 2 was predicted and compared to similar structures in related species. Using morphological and molecular signatures as diagnostic features the description of R. marina was emended.
Phylogenetic relationships among the Korean taxa of the genus Allium subgenus Rhizirideum and some related taxa were assessed on the basis of in sequences of nuclear ribosomal DNA. Twenty-eight accessions of the genus Allium L. consisting of subgenera Rhizirideum (19 taxa), Allium (5 taxa) and Amerallium (one taxon) were analyzed. The variation in the ITS region was informative at the levels of section except for sect. Reticulato- bulbosa which is known to be of multiple origin. The ITS 2 region was longer than the ITS 1 region, and all of the investigated Allium taxa were the same in length in the 5.8S region except for A. monanthum. Allium cyaneum var. cyaneum was the shortest (635 bp) and A. victorialis the longest (646 bp) among the investigated Korean taxa. The three morphologically similar taxa, A. thunbergii, A. sacculiferum that has been included in A. thunbergii, and A. deltoid- fistulosum, had the same ITS lengths of 641 bp, but were clearly distinguished in the phylogenetic analysis of their ITS sequences.
This study was carried out to confirm the phylogenetic relationships in Korean Rhus species. Sequences from internal transcribed spacers (ITS) of nuclear ribosomal DNA and rbcL gene of chloroplast DNA were determined. Cotinus coggygria was selected as outgroup because it is closest allied with Rhus in Anacardiaceae. Also, ingroup was limited as six Korean Rhus species. ITS 1 sequences in six species of Rhus and one species of Cotinus ranged from 246 to 253 bp and ITS 2 sequences from 234 to 244 bp. Concerning the G+C content of the studied taxa, ITS 1 sequences ranged from 58.0 to 68.13% and ITS 2 from 59.75 to 68.46%. On the other hand, rbcL sequences were same size in the all species examined by 1,428 bp. G+C contents of rbcL sequences were ranged from 43.56 to 43.77% which means there are nearly no different from interspecies each other. Phylogenetic tree strongly supports the colse relationships between R. succedanea and R. sylvestris. Rhus javanica and Cotinus coggygria were also closely allied with each other in ITS and rbcL trees. Therefore, R. javanica was regarded as most primitive species among the Korean Rhus species. ITS 1 region of nuclear ribosomal DNA was suggested as very useful taxonomical marker for genus Rhus.
Raillietina species are prevalent in domestic chickens (Gallus gallus domesticus) in Phayao province, northern Thailand. Their infection may cause disease and death, which affects the public health and economic situation in chicken farms. The identification of Raillietina has been based on morphology and molecular analysis. In this study, morphological observations using light (LM) and scanning electron microscopies (SEM) coupled with molecular analysis of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) region and the nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase subunit 1 (ND1) gene were employed for precise identification and phylogenetic relationship studies of Raillietina spp. Four Raillietina species, including R. echinobothrida, R. tetragona, R. cesticillus, and Raillietina sp., were recovered in domestic chickens from 4 districts in Phayao province, Thailand. LM and SEM observations revealed differences in the morphology of the scolex, position of the genital pore, number of eggs per egg capsule, and rostellar opening surface structures in all 4 species. Phylogenetic relationships were found among the phylogenetic trees obtained by the maximum likelihood and distance-based neighbor-joining methods. ITS2 and ND1 sequence data recorded from Raillietina sp. appeared to be monophyletic. The query sequences of R. echinobothrida, R. tetragona, R. cesticillus, and Raillietina sp. were separated according to the different morphological characters. This study confirmed that morphological studies combined with molecular analyses can differentiate related species within the genus Raillietina in Thailand.
The internal transcribed spacer regions (ITS I, 5.8S and ITS II) of the ribosomal DNAs were amplified from Korean isolates of Phytophthora spp. and sequenced to characterize them. Sequences from 33 isolates previously identified as P. boehmeriae, P. cactprum, P. cambivora, P. capsici, P. cinnamomi, P. erythroseptica, P. infestans, P. megasperma, P. melonis, P. nicotianae, P. palmivora and P. sojae were compared with published sequences, and a phylogenetic tree was produced. All isolates belonging to 10 species, P. cactorum, P. cambivora, P. capsici, P. cinnamomi P. citricola, P. infestans, P. nicotianae, P. palmivora and P. sojae were clearly clustered into published isolates of each species above 97% bootstrap value. Cucurbits isolates of Phytophthora previously identified as either P. melonis or P. drechsleri showed distinct evolutionary lineages from the P. megasperma was closely related to isolates of P. cryptogea-P. drechsleri showed distinct evolutionary lineages from the P. cryptogea-P. drechsleri complex group, indicating that P. melonis is a valid species. A Korean isolate of P. megasperma was closely related to isolates of P. erythroseptica showed distant genetic relationship with published isolates of P. erythroseptica (CBS 956.87). It is probable that the two Korean isolates could be genetically different from foreign isolates or misidentified. A grouping of species according to ITS sequence divergence matched, to some degree, the broad classification based on type of papilla. However, a separation of semi-papillate species and papillate species was not wvident in this study.
Vieira, Helena Henriques;Bagatini, Inessa Lacativa;Guinart, Carla Marques;Vieira, Armando Augusto Henriques
ALGAE
/
v.31
no.2
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pp.155-165
/
2016
Green microalgae from the class Chlorophyceae represent a major biodiversity component of eukaryotic algae in continental water. Identification and classification of this group through morphology is a hard task, since it may present cryptic species and phenotypic plasticity. Despite the increasing use of molecular methods for identification of microorganisms, no single standard barcode marker is yet established for this important group of green microalgae. Some available studies present results with a limited number of chlorophycean genera or using markers that require many different primers for different groups within the class. Thus, we aimed to find a single marker easily amplified and with wide coverage within Chlorophyceae using only one pair of primers. Here, we tested the universality of primers for different genes (tufA, ITS, rbcL, and UCP4) in 22 strains, comprising 18 different species from different orders of Chlorophyceae. The ITS primers sequenced only 3 strains and the UCP primer failed to amplify any strain. We tested two pairs of primers for rbcL and the best pair provided sequences for 10 strains whereas the second one provided sequences for only 7 strains. The pair of primers for the tufA gene presented good results for Chlorophyceae, successfully sequencing 21 strains and recovering the expected phylogeny relationships within the class. Thus, the tufA marker stands out as a good choice to be used as molecular marker for the class.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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