The leaves of Staphylea bumalda (S. bumalda) as a deciduous tree distributed in Korea, China and Japan are used to treat respiratory diseases or inflammation. However, there is no scientific research on the immune-enhancing activity of S. bumalda leaves. Thus, in this study, we investigated the effect of water extracts from S. bumalda leaves (SBL) on the macrophage activity using mouse macrophage cells, RAW264.7. SBL increased production of immunomodulators such as NO, iNOS, IL-1β, IL-6, TNF-α and MCP-1 in RAW264.7 cells and activated phagocytic activity of RAW264.7 cells. Inhibition of TLR2 and TLR4 blocked SBL-mediated production of immunomodulators in RAW264.7 cells. In addition, SBL-mediated production of immunomodulators was attenuated by JNK inhibition in RAW264.7 cells. SBL increased JNK phosphorylation, while Inhibition of TLR2 and TLR4 blocked SBL-mediated JNK phosphorylation in RAW264.7 cells. These results are thought to be evidence that SBL activates JNK through stimulation of TLR2 and TLR4 in macrophage to induce the production of immunomodulators. In LPS-stimulated RAW264.7 cells, SBL inhibited over-production of immunomodulators. Summarizing the results, SBL showed immunostimulatory activity under normal conditions and immunosuppressive activity under LPS-induced excessive immune response conditions.
본 연구는 ${\beta}$-glucan이 첨가된 사료첨가제 (이뮨글루$^{TM}$) 급이시 전복의 비특이 면역력의 증강 효과와 전염성 질병 감염 시 생존율의 변화를 확인하고자 수행되었다. 이를 위하여 참전복 치패와 성패를 대상으로 이뮨글루$^{TM}$ 0, 0.1, 1%가 함유된 사료를 14일간 급이 하면서 면역력, 정균력, 생존율 등을 조사하였다. 조사 결과 이뮨글루$^{TM}$가 함유된 사료를 급이한 전복의 치패와 성패의 식세포작용이 증가하였으며 전복폐사 원인균인 Vibrio alginolyticus에 대한 정균력과 생존율이 상승하였다. 반면 염증량을 나타내는 NO량 역시 증가하였다. 따라서 ${\beta}$-glucan이 첨가된 사료첨가제 이뮨글루$^{TM}$는 전복 사육 시 전복의 면역력을 높이고 폐사율을 낮추는데 유용한 것으로 판단된다.
Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder of insidious onset that causes gradual loss of memory and cognitive function, and it is the most common form of dementia in the elderly. AD is characterized by neuritic plaques and neurofibrillary tangles in the brain, together with loss of neuronal cells. The major neuropathological hallmark of AD is the accumulation of extracellular neurotoxic ${\beta}-amyloid$ ($A{\beta}$) peptides, such as $A{\beta}1-42$, in the brain. In the present study, we investigated the effect of sargachromenol (SCM), sargaquinoic acid (SQA) and sargahydroquinoic acid (SHQA) isolated from Sargassum serratifoilum ethanol extract (SSE) on $A{\beta}$ production in vitro using APP751-transfected Chinese hamster ovary cells (CHO-751). CHO-751 cells were treated with various concentrations of SSE, SCM, SQA and SHQA, and the level of extracellular $A{\beta}1-42$ was evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay. SSE and SHQA reduced the production of $A{\beta}1-42$ in CHO-751 cells. Therefore, SHQA isolated from S. serratifolium has potential as an inhibitor of neurotoxic $A{\beta}$ peptide production.
본 연구에서는 화장품 천연소재로서 해죽순 열수 추출물의 이용 가능성을 확인하였다. tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 1,000 ㎍/mL에서 52.0%의 활성을 나타내었다. 세포 생존율을 MTT 분석법으로 확인한 결과 멜라노마 세포(B16F10)의 농도 구간이 100 ㎍/mL 일 때 84.8%의 생존율을 보였다. Western blot을 통한 단백질 발현 억제 효과를 측정하기 위해 25, 50, 100 ㎍/mL 농도의 해죽순 열수 추출물과 β-actin을 사용하였다. 그 결과, MITF, TRP-1, TRP-2, tyrosinase의 단백질 발현양이 100 ㎍/mL에서 70.7%, 83.3%, 45.7%, 45.9%로 억제됨을 확인하였다. 따라서 해죽순 열수 추출물의 미백효과가 우수함을 확인하였고, 해죽순 열수 추출물의 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.
Background: Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) infection is a primary cause of livestock diarrhea. Therefore, effective vaccines are needed to reduce the incidence of ETEC infection. Objectives: Our study aimed to develop a multivalent ETEC vaccine targeting major virulence factors of ETEC, including enterotoxins and fimbriae. Methods: SLS (STa-LTB-STb) recombinant enterotoxin and fimbriae proteins (F4, F5, F6, F18, and F41) were prepared to develop a multivalent vaccine. A total of 65 mice were immunized subcutaneously by vaccines and phosphate-buffered saline (PBS). The levels of specific immunoglobulin G (IgG) and pro-inflammatory cytokines were determined at 0, 7, 14 and 21 days post-vaccination (dpv). A challenge test with a lethal dose of ETEC was performed, and the survival rate of the mice in each group was recorded. Feces and intestine washes were collected to measure the concentrations of secretory immunoglobulin A (sIgA). Results: Anti-SLS and anti-fimbriae-specific IgG in serums of antigen-vaccinated mice were significantly higher than those of the control group. Immunization with the SLS enterotoxin and multivalent vaccine increased interleukin-1β (IL-1β) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) concentrations. Compared to diarrheal symptoms and 100% death of mice in the control group, mice inoculated with the multivalent vaccine showed an 80% survival rate without any symptom of diarrhea, while SLS and fimbriae vaccinated groups showed 60 and 70% survival rates, respectively. Conclusions: Both SLS and fimbriae proteins can serve as vaccine antigens, and the combination of these two antigens can elicit stronger immune responses. The results suggest that the multivalent vaccine can be successfully used for preventing ETEC in important livestock.
Lee, Ju Yup;Kim, Nayoung;Park, Ji Hyun;Nam, Ryoung Hee;Lee, Sun Min;Song, Chin-Hee;Kim, Geun;Na, Hee Young;Choi, Yoon Jin;Kim, Jin Joo;Lee, Dong Ho
Journal of Neurogastroenterology and Motility
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제26권1호
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pp.106-116
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2020
Background/Aims Emerging evidence shows that the mechanism of irritable bowel syndrome (IBS) is associated with neurotrophic factors and tight junction proteins (TJPs). It is known that there are sex differences in the pathophysiology of IBS. The aim of the present study is to determine expression levels of neurotrophic factors, TJPs, and cytokines according to IBS subtype and sex. Methods From 59 IBS (33 IBS-constipation, 21 IBS-diarrhea, and 5 IBS-mixed) and 36 control patients, colonic mucosa mRNA expression levels of transient receptor potential vanilloid-1 (TRPV1), nerve growth factor (NGF), glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF), and various TJPs were assessed by real-time polymerase chain reaction. Western blot was performed to determine levels of zonular occludens-1 (ZO-1). Serum levels of cytokines were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Results TRPV1, GDNF, and NGF mRNA levels were significantly increased in those with IBS-constipation compared to those in controls (all P < 0.05). However, they showed no significant difference between those with IBS-diarrhea and controls. Expression level of TRPV1 correlated with that of GDNF (r = 0.741, P < 0.001) and NGF (r = 0.935, P < 0.001). ZO-1 RNA expression levels were lower (P = 0.021) in female IBS-diarrhea than those in controls, although they showed no significant differences between male IBS-diarrhea and controls. Serum IL-1β levels in female IBS were significantly higher than those of male IBS, especially in IBS-constipation (P < 0.001). Conclusion Our results suggest that neurotrophic factors and IL-1β are closely related to IBS-constipation and that decrease of ZO-1 is an important factor in female with IBS-diarrhea.
우리는 방사선피부염 동물 모델을 확립하여, 이차 면역 기관에서의 면역 세포 비율 변화를 관찰하였다. 또한, 방사선 조사에 의한 병소에서 transforming growth factor-${\beta}1$ (TGF-${\beta}1$)과 interlukin-10 (IL-10)의 발현을 증가시킨 세포를 분석하였다. Hairless-1 (HR-1) 쥐의 posterior dorsal 부위에 6 일간 매일 10 Gy 씩 electron (E)-ray를 국부 조사하여 방사선피부염 모델을 만들었다. FACS를 이용하여 면역 세포 비율의 변화를 분석한 결과 비장과 림프절에 존재하는 항원제시세포와 T 세포 및 B 세포들의 비율이 E-irradiation에 의해 영향을 받았다. 피부에서 세포 특이적인 마커와 사이토카인들의 발현 양상은 면역형광염색법으로 확인하였다. 방사선 조사 후, TGF-${\beta}1$과 interlukin-17 (IL-17)은 regulatory T 세포(Treg)보다 keratin-14 (K-14)를 발현하는 진피의 끝부분에서 높게 발현되었다. Interlukin-10 (IL-10)는 Treg 뿐만 아니라 T helper 17 (Th17) 세포, dendritic 세포, macrophage 중 어느 것과도 같은 위치에서 검출되지 않았다. 우리의 데이터는 방사선피부염 동물 모델의 병소 안에서, TGF-${\beta}1$이 증식된 keratinocyte에 과발현된다는 것을 나타낸다.
Background and Objectives During speech, the vocal folds oscillate at frequencies ranging from 100-200 Hz with amplitudes of a few millimeters. Mechanical stimulation is an essential factor which affects metabolism of human vocal folds. The effect of mechanical vibration on the cellular response in the human vocal fold fibroblasts cells (hVFFs) was evaluated. Materials and Method We created a culture systemic device capable of generating vibratory stimulations at human phonation frequencies. To establish optimal cell culture condition, cellular proliferation and viability assay was examined. Quantitative real time polymerase chain reaction was used to assess extracellular matrix (ECM) related and growth factors expression on response to changes in vibratory frequency and amplitude. Western blot was used to investigate ECM and inflammation-related transcription factor activation and its related cellular signaling transduction pathway. Results The cell viability was stable with vibratory stimulation within 24 h. A statistically significant increase of ECM genes (collagen type I alpha 1 and collagen type I alpha 2) and growth factor [transforming growth factor β1 (TGF-β1) and fibroblast growth factor 1 (FGF-1)] observe under the experimental conditions. Vibratory stimulation induced transcriptional activation of NF-κB by phosphorylation of p65 subunit through cellular Mitogen-activated protein kinases activation by extracellular signal regulated kinase and p38 mitogen-activated protein kinases (MAPKs) phosphorylation on hVFFs. Conclusion This study confirmed enhancing synthesis of collagen, TGF-β1 and FGF was testified by vibratory stimulation on hVFFs. This mechanism is thought to be due to the activation of NF-κB and MAPKs. Taken together, these results demonstrate that vibratory bioreactor may be a suitable alternative to hVFFs for studying vocal folds cellular response to vibratory vocalization.
Roh, HyeongJin;Kim, Bo Seong;Kim, Ahran;Kim, Nameun;Lee, Mu Kun;Park, Chan-Il;Kim, Do-Hyung
한국어병학회지
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제33권1호
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pp.23-34
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2020
In recent years, global warming is causing dramatic environmental changes and deterioration, such as hypoxia, leading to reduced survival rate and growth performance of farmed aquatic animals. Hence, understanding systemic immuno-physiological changes in fish under environmental stress might be important to maximize aquaculture production. In this study, we investigated physiological changes in rainbow trout exposed to hypoxic stress by monitoring changes in blood chemistry, leukocyte population, and expression levels of related cytokine genes. Hematological and serological factors were evaluated in blood obtained from rainbow trout sampled at a dissolved level of 4.6 mg O2 L-1 and 2.1 mg O2 L-1. Blood and head kidney tissue obtained at each sampling time point were used to determine erythrocyte size, leukocyte population, and cytokine gene expression. The level of LDH and GPT in fish under progressive hypoxia were significantly increased in plasma. Likewise, the (Granulocyte + Macrophage)/lymphocyte ratio (%) of fish exposed to hypoxia was significantly lower than that in fish in the control group. Such changes might be due to the rapid movement of lymphocytes in fish exposed to acute hypoxia. In this study, significant up-regulation in expression levels of IL-1β and IL-6 gene appeared to be involved in the redistribution of leukocytes in rainbow trout. This is the first study to demonstrate the involvement of cytokines in leukocyte trafficking in fish exposed to hypoxia. It will help us understand systemic physiological changes and mechanisms involved in teleost under hypoxic stress.
Background: The purpose of this study was to investigate the anti-oral microbial activity and anti-inflammatory effects of rosmarinic acid (RA) in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated MC3T3-E1 osteoblastic cells on a titanium (Ti) surface during osseointegration, and to confirm the possibility of using RA as a safe natural substance for the control of peri-implantitis (PI) in Ti-based dental implants. Methods: A disk diffusion test was conducted to confirm the antimicrobial activity of RA against oral microorganisms. In order to confirm the anti-inflammatory effects of RA, inflammatory conditions were induced with 100 ng/ml of LPS in MC3T3-E1 osteoblastic cells on the Ti surface treated with or without 14 ㎍/ml of RA. The production of nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2) in LPS-stimulated MC3T3-E1 osteoblastic cells on the Ti surface was confirmed using an NO assay kit and PGE2 enzyme-linked immunosorbent assay kit. Reverse transcription polymerase chain reaction and western blot analysis were performed to confirm the expression of interleukin (IL)-1β and tumor necrosis factor (TNF)-α in total RNA and protein. Results: RA showed weak antimicrobial effects against Streptococcus mutans and Escherichia coli, but no antimicrobial activity against the bacteria Aggregatibacter actinomycetemcomitans and the fungus Candida albicans. RA reduced the production of pro-inflammatory mediators, NO and PGE2, and proinflammatory cytokines, TNF-α and IL-1β, in LPS-stimulated MC3T3-E1 osteoblastic cells on the Ti surface at the protein and mRNA levels. Conclusion: RA not only has anti-oral microbial activity, but also anti-inflammatory effects in LPS-stimulated MC3T3-E1 osteoblasts on the Ti surface, therefore, it can be used as a safe functional substance derived from plants for the prevention and control of PI for successful Ti-based implants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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