The 2D/E gel analysis for polypeptide expression reflecting I-18 C gene (early-ecdysterone inducible gene) has conducted the emerged C. riparius adults from larval phase exposure to tebufenozide acting as an ecdysteroidal molting hormone. Control group, the amount of ORE II of the I-18 C gene was larger than that of ORE I of this gene. After treatments, ORE I of the I-18 C gene was overexpressed as the polypeptide, whereas ORF II of this gene was expressed as the polypeptide and was clearly reduced expression. Accordingly, we consider that tebufenozide exhibited endocrine disruptions related processing of ecdysteroid receptor protein reflecting ORF II of I-18 C gene. Also, earlier emergence day was related overexpressed polypeptide reflecting ORE I of I-18 C gene. In this study result, tebufenozide induced changing of physiological condition, and then polypeptide expression reflecting early-ecdysterone inducible I-18 C gene was different between control group and exposure group.
$\alpha$-Amylase (EC.3.2.1.1) of Neurospora crassa (ATCC9279) was cloned in E. coli HB101 using shotgun method, and the enzymes isolated from both N. crassa and E. coli were compared. Chromosomal DNA isolated from the spores of N. crassa was partially digested with PstI restriction endonuclease and rejoined to pBR322 which had been digested with the same enzyme. The resulting recombinant DNA were introduced into E. coli HB101 which had competancy by treating with $CaCl_{2}$. As the result, about 8000 colonies which showed tetracycline resistance were selected and two of the colonies which had 13.5Kb recombinant plasmid exhibit starch degrading activity on starch-containing plate when treated with D-cycloserine. $\alpha$-Amylases from both N.crassa and E. coli were isolated by using ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Bio-Gel P150 gel foltration column. As the result, about 81.3 fold and 5.6 fold purifications in specific activities were obtained respectively, and specific activities of the gel filtrates were 6.1u/mg and 85u/mg respectively. The properties of both enzymes were compared and they showed quite the similar patterns in optimal temperature, optimal pH and had same molecular weight about 100,000 daltons on gel filtration method. Optimal temperatures for both enzymes were $70^{\circ}C$ and optimal pH were about 6 and 10.
Sol-gel derived phosphate water-sioluble glasses containing Cu were prepared. Powder-shape of glasses were added in D.I water used polyethylene bottle. After solution contained glass powder were submerged in water bath on 25$^{\circ}C$ their dissolution behavior/characteristics bactericidal effect and cytotoxicity test were evaluated. The maximum amount of Cu(35 mol%) via sol-gel method was more 5 mol% increased than that with melting process. The stage of total dissolution was more dominant than that of selective leaching dur-ing dissolution due to dissolved amount of glasses increased linearly with time. The ratio of Cu+ to {{{{ {Cu }^{2+ } }} was 3:7 so that the structure of glasses is more predominant 2-dimension chain structure than 3-dimenshion po-lymeric structue. The stage of total dissolution was more dominant than that of selective leaching during dissolution. Bactericidal effect against all bacteria showed that solutions which contained 40 ppm and 100 ppm of Cu killed 80 percentages of bacteria within 2 hours and 100 percentages of those within 12 hours. The results of cytotoxicity test for L929 cells showed no cytotoxicity were observed within 96 hours for dis-solved solution that contains 40 ppm and 100 ppm of Cu.
KIM YEON-HEE;CHOI SEUNG JUN;LEE HYUN-AH;MOON TAE WHA
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권1호
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pp.25-31
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2006
Changes of CP4 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (CP4 EPSPS) in the glyphosate-tolerant Roundup Ready soybean were examined using purified CP4 EPSPS produced in cloned Escherichia coli as a control. CP4 EPSPS in genetically modified soybean was detected by twodimensional gel electrophoresis (2-DE) and identified by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) and electrospray ionization tandem mass spectrometry (ESI-MS/MS) with databases. CP4 EPSPS in soybean products was resolved on 2-DE by first isoelectric focusing (IEF) based on its characteristic pI of 5.1, followed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) based on its molecular mass of 47.5 kDa. We quantified various percentages of soybean CP4 EPSPS. The quantitative analysis was performed using a 2D software program on artificial gels with spots varying in Gaussian volumes. These results suggested that 2-DE image analysis could be used for quantitative detection of GM soybean, unlike Western blotting.
Gas sparging is one of the techniques used to control the concentration polarization during ultrafiltration. In this work, the effects of gas sparging in stratified flow regime were investigated during gel layer controlling cross flow ultrafiltration in a rectangular channel. Synthetic solution of pectin was used as the gel forming solute. The liquid and gas flow rates were selected such that a stratified flow regime was prevalent in the channel. A mass transfer model was developed for this system to quantify the effects of gas flow rates on mass transfer coefficient (Sherwood number). The results were compared with the case of no gas sparging. Gas sparging led to an increase of mass transfer coefficient by about 23% in this case. The limitation of the developed model was also evaluated and it was observed that beyond a gas flow rate of 20 l/h, the model was unable to explain the experimental observation, i.e., the decrease in permeate flux with flow rate.
The hydration at $23^{\circ}C$ between $Ca(OH)_2$ and siliceous materials with various compositions of silica gel and quartz were studied in paste state, and also diatomite was empolyed as another form of silica. The effect of the structural state of silica on the pozzolanic reactivity was investigated by X-ray, DTA, electron microscopy, and chemical analysis. The results obtained were as follows. (1) The molar ratio of $Ca(OH)_2$ to silica gel(C/Sg) being changed in 0.49, 0.81 and 1.22, the free $Ca(OH)_2$ was disappeared within six hours, three days and two weeks respectively and ill-crystallized CSH(I) was formed. However, in the case fo molar ratio of C/Sg=2.45, almost lime was remained uncombinedly after twenty four weeks yet. (2) Though the molar ratio C/Sg of diatomite was 0.71, the hydration was stabilized at three weeks and the result exhibited very peculiar characteristics from silica gel. (3) Pozzolanic reactivity of quartz was negligible, but $\alpha$-cristobalite in diatomite showed appreciable reactivity. (4) The thermal curves showed the exothermic peaks in the range 830 to $930^{\circ}C$ and lower broad peaks at high temperature in the initial steps of hydration, transfered to lower temperature with sharp peaks by proceeding of hydration. (5) The samples containing more silica gel exhibited higher pozzolanic reactivity and martar strength, but the diatomite gave remarkable result for them and they were matched to the strength development rate.
Mo Chan B.;Cha Seung I.;Kim Kyung T.;Lee Kyung H.;Hong Soon H.
한국복합재료학회:학술대회논문집
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한국복합재료학회 2004년도 추계학술발표대회 논문집
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pp.27-30
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2004
Carbon nanotube reinforced alumina matrix nanocomposite was fabricated by sol-gel process and followed by spark plasma sintering process. Homogeneous distribution of carbon nanotubes within alumina matrix can be obtained by mixing the carbon nanotubes with alumina sol and followed by condensation into gel. The mixed gel, consisting of alumina and carbon nanotubes, was dried and calcinated into carbon nanotube/alumina composite powders. The composite powders were spark plasma sintered into carbon nanotube reinforced alumina matrix nanocomposite. The hardness of carbon nanotube reinforced alumina matrix nanocomposite was enhanced due to an enhanced load sharing of homogeneously distributed carbon nanotubes. At the same time, the fracture toughness of carbon nanotube reinforced alumina matrix nanocomposite was enhanced due to a bridging effect of carbon nanotubes during crack propagation.
Angiogenic activity of Aloe vera gel was investigated by in vitro assay. We obtained the most active fraction from dichloromethane extract of Aloe vera gel by partitioning between hexane and 90% aqueous methanol. The most active fraction (F3) increased the proliferation of calf pulmonary artery endothelial (CPAE) cells. In addition, F3 fraction induced CPAE cells to invade type I collagen gel and form capillary-like tube through in vitro angiogenesis assay, and increased the invasion of CPAE cells into matrigel through in vitro invasion assay. Furthermore, the effect on the MRNA expression of proteolytic enzymes which are key participants in the regulation of extracellular matrix degradation was investigated by northern blot analysis. F3 fraction enhanced mRNA expression of urokinase-type plasminogen activator (u-PA), matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), and membrane-type MMP (MT-MMP) in CPAE cells whereas the expression of plasminogen activator inhibitory (PAl-1) mRNA was not changed.
The gelation for di-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP)-plasticized poly(vinyl chloride) was studied by measuring time-resolved small-angle X-ray scattering (SAXS) and a flow of the solutions in test tube. It was found that for the gelation there were three regimes. At Regime I, the solution rapidly changed to a gel, and the SAXS intensity showed a peak and the peak intensity increased, keeping the peak angle constant. Applying the SAXS intensity to the kinetic analysis of the liquid-liquid phase separation, it was revealed that the spinodal decomposition proceeded to develop a periodic length of 29.9 nanometer in size, a hydrogen-bonding-type association in polymer rich phase followed, and then it induced fast gelation rate. At Regime II, the gelation slowly occurred and the SAXS intensity was not observed, suggesting that a homogeneous gel network was formed by a hydrogen-bonding. At regime III, the solution was a homogeneous sol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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