KIEE International Transactions on Electrophysics and Applications
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제11C권2호
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pp.23-27
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2001
Microarray-based DNA chips provide an architecture for multi-analyte sensing. In this paper, we report a new approach for DNA chip microarray fabrication. Multifunctional DNA chip microarrays were made by immobilizing many kinds if DNAs on transducers (particles). DNA chip microarrays were prepared by randomly distributing a mixture of the particles on a chip pattern containing thousands of micro meter-scale sites. The particles occupied different sites from array to array. Each particle cam be distinguished by a tag that is established on the particle. The particles were arranged on the chip pattern by the random fluidic self-assembly (RFSA) method, using hydrophobic interaction.
Microarray-based DNA chips provide an architecture for multi-analyte sensing. In this paper, we report a new approach for DNA chip microarray fabrication. Multifunctional DNA chip microarray was made by immobilizing many kinds of biomaterials on transducers (particles). DNA chip microarray was prepared by randomly distributing a mixture of the particles on a chip pattern containing thousands of m-scale sites. The particles occupied a different sites from site to site. The particles were arranged on the chip pattern by the random fluidic self-assembly (RFSA) method, using a hydrophobic interaction for assembly.
The improtant components of extracellular matrix(ECM) are collagen and chondroitin sulfate. The hydrophobic surface of collagen is one of the determining factors of diameter of collagen fiber and also is closely related to the aging phenomena. The controlling mechanism of the diameter of collagen fiber influenced by the interaction with chondroitin sulfate was evaluated using bis-ANS as a hydrophobic probe. Hydrophobic surface area of collagen molecule shielded by chondroitin sulfate was evaluated. Relative fluorescence intensity of collagen in thepresence of chondroitin sulfate was measured using bis-ANS as a hydrophobic probe. The fluorescence intensity decreased with the increase in chondroitin sulfate up to 3.8 chondroitin sulfate/collagen(mole/mole). Further increase in the ratio of chondroitin sulfate to collagen did not change the fluorescence intensity. Similar changes in the relative fluorescence intensity were observed for both rat tail and lathyrific rat skin collagen. The fluorescence intensity indicated by the binding between bis-ANS and hydrophobic sites of collagen was pH dependent, and the shielding effect of collagen-chondroitin sulfate interaction could not be detected at pH above 6.0. This is probably due to the charge repulsions caused by negative charged collagen molecules at higher pH.
Existence of a binding site for choline esters with an acyl chain of various sizes was examined by comparing the inhibitory potency of the respective compound. In contrast to acetylcholine, which showed a pure competitive pattern of inhibition, choline esters with an acyl chain of a long size ($C{\geq}5$) expressed a mixed type of inhibition. Binding of choline esters containing a long chain ($C_7-C_{12}$) to the hydrophobic region in the active site is deduced from a linear relationship between the $K_{iE}$ value and the size of acyl moiety, and a good hydrophobicity relationship. In addition, the non-competitive component in the inhibition of acetylcholinesterase seems to be due to the interaction of choline esters with both the hydrophobic site and the trimethylammonium-binding site in the active center of the acetylated acetylcholinesterase.
An amphiphilic cationic branched methoxy poly (ethylene glycol)-branched polyethylenimine - poly(L-phenylalanine) (mPEG-bPEI-pPhe) block copolymer was successfully synthesized by ring-opening polymerization (ROP) of N-carboxyanhydride of L-phenylalanine (Phe-NCA) with mPEG-bPEI for the preparation of more stable polyelectrolyte complex (PEC) included a hydrophobic interaction. mPEG-bPEI was firstly prepared by the coupling of mPEG and bPEI using hexamethylene diisocyanate (HMDI). The structural properties of mPEG-bPEI-pPhe copolymers were confirmed by $^1H$ NMR. The copolymers exhibited a self-assemble behavior in water above critical aggregate concentration (CAC) in the range of 0.01-0.14 g/L. The CAC of copolymers obviously depended on the hydrophobic block content in the copolymers (the value decreased with the increase of the pPhe block content). The cationic copolymers have the ability to form multi-interaction complex (MIC) with bovine serum albumin (BSA) and plasmid DNA through multi-interaction (electrostatic and hydrophobic interaction). The physicochemical characterization of the complex was carried out by the measurement of zeta potential and particle size. Their zeta-potentials were positive (approximately +10 mV) and their sizes decreased with increasing pPhe contents in the copolymers (PPF/BSA wt% ratio = 2). The complex showed good stability at high ionic strength. Therefore, mPEG-bPEI-pPhe block copolymer was considered as a potential material to enhance the stability of complex including biotherapuetic drugs.
The mechanism of interaction of cyanocobalamin (CB) with bovine serum albumin (BSA) has been investigated by spectrofluorometric and circular dichroism methods. Association constant for the CB-BSA system showed that the interaction is non-covalent in nature. Binding studies in the presence of an hydrophobic probe, 8-anilino-l-naphthalene sulphonic acid, sodium salt (ANS) showed that there is hydrophobic interaction between CB and ANS and they do not share common sites in BSA. Stern-Volmer analysis of fluorescence quenching data showed that the fraction of fluorophore (protein) accessible to the quencher (CB) was close to unity indicating thereby that both tryptophan residues of BSA are involved in drug-protein interaction. The rate constant for quenching, greater than $10^{10}$$M^{-1}$$s^{-1}$, indicated that the drug binding site is in close proximity to tryptophan residue of BSA. Thermodynamic parameters obtained from data at different temperatures showed that the binding of CB to BSA involves hydrophobic bonds predominantly. Significant increase in concentration of free drug was observed for CB in presence of paracetamol. Circular dichroism studies revealed the change in helicity of BSA due to binding of CB to BSA.
방어와 갈색띠 매물고둥에서 myosin과 paramyosin 을 추출하고, 이들 단백질의 가열중에 일어나는 변성기구를 아미노산 잔기와 SH기의 변화 및 단백질간의 상호작용 등을 측정하므로서 분석하였다. 각 단백질을 이루는 구성아미노산의 측쇄중 소수성 잔기의 유리정도는 가열온도 $65^{\circ}C$까지는 증가하였으나, 그 이상의 가열온도에서는 감소하는 경향을 보였다. 유리 소수성 잔기가 증가하여 감에 따라, 단백질간 상호작용도 활발하여 갔으며, 소수성 잔기의 유리정도가 감소하는 가열온도$65^{\circ}C$부터는 단백질의 응집이 일어나기 시작 하였다. 단백질간의 상호작용을 탁도로써 분석하여 Arrhenius식으로 해석한 결과, 방어 myosin은 3단계이상의 변성과정으로 구분할 수 있었으며, 갈색띠 매물고둥 paramyos은 2단계의 변성과정으로 구분할 수 있었다. 이들 두 단백질 소수성, 용해도, 유리 SH기의 수 및 단백질간의 상호작용 등은 온도함수와 밀접한 상관관계를 보였다.
The DNA chips are devices associating the specific recognition properties of two DNA single strands through hybridization process with the performances of the microtechnology. In the literature, the "Gene chip" or "DNA chip" terminology is employed in a wide way and includes macroarrays and microarrays. Standard definitions are not yet clearly exposed. Generally, the difference between macro and microarray concerns the number of active areas and their size, Macroarrays correspond to devices containing some tens spots of 500$\mu$m or larger in diameter. microarrays concern devices containing thousnads spots of size less than 500$\mu$m. The key technical parameters for evaluating microarray-manufacturing technologies include microarray density and design, biochemical composition and versatility, repreducibility, throughput, quality, cost and ease of prototyping. Here we report, a new method in which minute particles are arranged in a random fashion on a chip pattern using random fluidic self-assembly (RFSA) method by hydrophobic interaction. We intend to improve the stability of the particles at the time of arrangement by establishing a wall on the chip pattern, besides distinction of an individual particle is enabled by giving a tag structure. This study demonstrates the fabrication of a chip pattern, immobilization of DNA to the particles and arrangement of the minute particle groups on the chip pattern by hydrophobic interaction.ophobic interaction.
The hydrophobic interaction occurring between rhodamine 6G and tetraphenylborate was investigated spectroscopically by varying the medium with the addition of surfactants or ethanol. The ion aggregates formed between the two ions were destroyed by the additives. The dye existed as monomeric species in the presence of a cationic surfactant whereas it was incorporated with anionic and nonionic surfactants. For the complete dissociation more than the critical micelle concentration (cmc) was required with a nonionic surfactant while less than cmc was necessary with the others.
The enantiomeric separation of several amino acid derivatives by reversed-phase liquid chromatography using two (R)-and (S)-naphthylethylcarbamate-β-cyclodextrin(NEC-β-CD) bonded stationary phases was studied to illustrate the chiral recognition model of the enantiomeric separation. The retention and enantioselectivity of the chiral separations with (R)-and (S)-NEC-β-CD bonded phases were compared with similar separations with the native β-CD stationary phases. Especially, the enantioselectivity and elution orders between the derivatized amino acid enantiomers are carefully examined. These results can be illustrated by the chiral recognition models involving inclusion complexation, π-π interaction, and/or hydrophobic interaction. Inclusion complexation and hydrophobic interaction of the naphthyl group of the NEC moiety seem to be major chiral recognition components in the enantiomeric separation of 2,4-dinitrophenyl amino acids and dabsyl amino acids on (R)-and (S)-NEC-β-CD columns. For dansyl amino acids, only the inclusion complexation is the dominant factor. Three different chiral recognition models containing π-π interaction, inclusion complexation and hydrogen bonding were proposed for the separation of the 3,5-dinitrobenzoyl amino acid enantiomers, depending on the size and shape of amino acids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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