Surface modification of glutaraldehyde fixed bovine pericardium (GFBP) was successfully carried out with hyaluronic acid (HA) derivatives. At first, HA was chemically modified with adipic dihydrazide (ADH) to introduce hydrazide functional group into the carboxyl group of HA backbone. Then, GFBP was surface modified by grafting HA-ADH to the free aldehyde groups on the tissue and the subsequent HA-ADH hydrogel coating. HA-ADH hydrogels could be prepared through selective crosslinking at low pH between hydrazide groups of HA-ADH and crosslinkers containing succinimmidyl moieties with minimized protein denaturation. When HAADH hydrogels were prepared at low pH of 4.8 in the presence of erythropoietin (EPO) as a model protein, EPO release was continued up to $85\%$ of total amount of loaded EPO for 4 days. To the contrary, only $30\%$ of EPO was released from HA-ADH hydrogels prepared at pH=7.4, which might be due to the denaturation of EPO during the crosslinking reaction. Because the carboxyl groups on the glucuronic acid residues are recognition sites for HA degradation by hyaluronidase, the HA-ADH hydrogels degraded more slowly than HA hydrogels prepared by the crosslinking reaction of divinyl sulfone with hydroxyl groups of HA. Following a two-week subcutaneous implantation in osteopontin-null mice, clinically significant levels of calcification were observed for the positive controls without any surface modification. However, the calcification of surface modified GFBP with HA-ADH and HA-ADH hydrogels was drastically reduced by more than $85\%$ of the positive controls. The anti-calcification effect of HA surface modification was also confirmed by microscopic analysis of explanted tissue after staining with Alizarin Red S for calcium, which followed the trend as observed with calcium quantification.
자극감응성 고분자는 다양한 응용에 중요한 역할을 하는 재료로 널리 연구되어오고 있다. 온도감응성을 가지는 히알루론산 공중합체를 카르복실기 고분자와 생체친화성 히알루론산의 아미드 결합을 통하여 연결시켜 합성하였다. 온도감응성 특징은 두 공중합체 모두에 구현되었으며, 탁도 측정과 rheolgical 결과는 일치하였다. 두 공중합체 중 elastin-like peptide(ELP)를 그래프트 사슬에 둔 공중합체의 경우가 N-ispropylacryamide(PNIPAAm) 경우에 비해 보다 완만한 LCST 변화과정을 보여주었다. PNIPAAm과 ELP의 그래프트 부분 함량이 증가함에 따라 점도가 증가하였고, 비슷한 그래프트 함량에서는 PNIPAAm 공중합체의 점도 증가가 컸다. 이러한 결과를 통해 생체친화성의 히알루론산에 그래프트 사슬을 붙임으로써 온도감응성을 부여할 수 있고, 그 특성을 설계할 수 있음을 알 수 있었다.
Kim, Hyeongmin;Ro, Jieun;Barua, Sonia;Hwang, Deuk Sun;Na, Seon-Jeong;Lee, Ho Sung;Jeong, Ji Hoon;Woo, Seulki;Kim, Hyewon;Hong, Bomi;Yun, Gyiae;Kim, Joong-Hark;Yoon, Young-Ho;Park, Myung-Gyu;Kim, Jia;Sohn, Uy Dong;Lee, Jaehwi
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제19권6호
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pp.543-547
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2015
We investigated the combined moisturizing effect of liposomal serine and a cosmeceutical base selected in this study. Serine is a major amino acid consisting of natural moisturizing factors and keratin, and the hydroxyl group of serine can actively interact with water molecules. Therefore, we hypothesized that serine efficiently delivered to the stratum corneum (SC) of the skin would enhance the moisturizing capability of the skin. We prepared four different cosmeceutical bases (hydrogel, oil-in-water (O/W) essence, O/W cream, and water-in-oil (W/O) cream); their moisturizing abilities were then assessed using a $Corneometer^{(R)}$. The hydrogel was selected as the optimum base for skin moisturization based on the area under the moisture content change-time curves (AUMCC) values used as a parameter for the water hold capacity of the skin. Liposomal serine prepared by a reverse-phase evaporation method was then incorporated in the hydrogel. The liposomal serine-incorporated hydrogel (serine level=1%) showed an approximately 1.62~1.77 times greater moisturizing effect on the skin than those of hydrogel, hydrogel with serine (1%), and hydrogel with blank liposome. However, the AUMCC values were not dependent on the level of serine in liposomal serine-loaded hydrogels. Together, the delivery of serine to the SC of the skin is a promising strategy for moisturizing the skin. This study is expected to be an important step in developing highly effective moisturizing cosmeceutical products.
Ko, Ki Seong;Lee, Jung Seok;Park, Kyung Min;Lee, Yunki;Oh, Dong Hwan;Son, Joo Young;Kwon, Oh Hee;Eom, Min Yong;Park, Ki Dong
Biomaterials and Biomechanics in Bioengineering
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제2권1호
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pp.23-32
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2015
Facile immobilization of growth factors in hyaluronic acid (HA) hydrogels using dual enzymes is reported in the paper. The hydrogels were formed by using horseradish peroxidase (HRP) and hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and transforming growth factor-${\beta}3$ (TGF-${\beta}3$) was covalently conjugated on the hydrogels in situ using tyrosinase (Ty) without any modifications. For the preparation of hydrogels, HA was grafted with poly(ethylene glycol) (PEG), which was modified with a tyrosine. The gelation times of the HA hydrogels were ranging from 415 to 17 s and the storage moduli was dependent on the concentration of $H_2O_2$ and Ty (470-1600 Pa). A native TGF-${\beta}3$ (200 ng/mL) was readily encapsulated in the HA hydrogels and 17% of the TGF-${\beta}3$ was released over 1 month at the Ty concentration of 0.5 KU/mL, while the release was faster when 0.3 KU/mL of Ty was used for the encapsulation (27%). It can be suggested that the growth factors resident in the hydrogels for a long period of time may lead cells proliferating and differentiating, whereas the growth factors that are initially released from the hydrogels can induce the ingrowth of cells into the matrices. Therefore, the dual enzymatic methods as facile gel forming and loading of various native growth factors or therapeutic proteins could be highly promising for tissue regenerative medicines.
최근, 아토피 피부염은 피부 자극에 민감하므로 피부 자극을 최소화하면서도, 특정한 국소 부위에 대한 점착력과 흡수력을 효과적으로 발휘할 수 있으며 적절한 약물 방출을 거동할 수 있는 패치 개발이 우선시 되어야 한다고 제안되기도 하였다. 따라서 본 연구는 피부 자극을 최소화하고 특정 부위에 효과적으로 접착 및 흡수 할 수 있는 하이드로겔 패치를 개발코자 하였다. 아토피 패치는 동결 건조법을 이용하여 고흡수성 하이드로겔 시트를 제형화 하였다. 인간각질세포(HaCaT cells) 및 섬유아세포(L929 cells) 사용하여 세포 안정성을 수행하였다. 물리적 성질을 조사하고자 FT-IR, FE-SEM, 다공성 분석, 팽윤성 거동을 조사 하였다. 그 결과, 새롭게 제조된 HA-Dex 하이드로겔 패치는 생체 적합성 및 물리적 평가에 의해 입증하였다. 또한 제조된 하이드로겔 패치는 충분한 수분 흡수력과 아토피성 피부의 가려움증을 완화시킬 수 있으며, 향후 아토피 성 피부염 치료에 다양한 약물 전달 제품에 적용될 수 있을 것으로 기대된다.
Cryopreservation is mainly used for preservation of boar sperm. However, this method stresses the sperm by reactive oxygen species (ROS), and the conception rate and the litter size are not more efficient than the liquid preservation of spermatozoa. Therefore, we use chitosan which is a natural product derived antioxidant compound. We used GnHA (chitosan+hyaluronic acid) and GnHG (chitosan hydrogel) as chitosan complexes to cryopreserve boar sperm for improve sperm metabolism and function. Sperm parameter (sperm motility, progressive motility, path velocity, straight-line velocity, curvilinear velocity) is measured by computer-assisted sperm analysis (CASA) using frozen sperm with GnHA or GnHG (0, 0.25, 0.5, 1 mg/mL), respectively. Also, lipid peroxidation analysis using malondialdehyde (MDA) is performed to confirm the antioxidative effect of chitosan in frozen spermatozoa. CASA analysis showed GnHA and GnHG are effective against cryopreserved boar sperm. And antioxidant effect is measured by lipid peroxidation analysis. GnHA and GnHG, which is chitosan complex are effective for boar sperm cryopreservation by antioxidant effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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