Human papillomavirus (HPV) is the primary etiologic agent of cervical cancer. Consideration of safety and non human leukocyte antigen restriction, protein vaccine has become the most likely form of HPV therapeutic vaccine, although none have so far been reported as effective. Since tumor cells consistently express the two proteins E6 and E7, most therapeutic vaccines target one or both of them. In this study, we fabricated DC vaccines by transducing replication-defective recombinant adenoviruses expressing E6/E7 fusion gene of HPV-16, to investigate the lethal effects of specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) against CaSki cells in vitro. Mouse immature dendritic cells (DC) were generated from bone marrow, and transfected with pAd-E6/E7 to prepare a DC vaccine and to induce specific CTL. The surface expression of CD40, CD68, MHC II and CD11c was assessed by flow cytometry (FCM), and the lethal effects of CTL against CaSki cells were determined by DAPI, FCM and CCK-8 methods. Immature mouse DC was successfully transfected by pAd-E6/E7 in vitro, and the transfecting efficiency was 40%-50%. A DC vaccine was successfully prepared and was used to induce specific CTL. Experimental results showed that the percentage of apoptosis and killing rate of CaSki cells were significantly increased by coculturing with the specific CTL (p <0.05). These results illustrated that a DC vaccine modified by HPV-16 E6/E7 gene can induce apoptosis of CaSki cells by inducing CTL, which may be used as a new strategy for biological treatment of cervical cancer.
Background: Medicinal plants, especially examples rich in polyphenolic compounds, have been suggested to be chemopreventive on account of antioxidative properties. Punica granatum (PG) (pomegranate) is a well known fruit in this context, but its cytotoxicity in cancer cells has not been extensively studied. Here, we investigated the antiproliferative properties of a peel extract of PG from Iran in different human cancer cells. Materials and Methods: A methanolic extract of pomegranate peel (PPE) was prepared. Total phenolic content(TPC) and total flavonoid conetnt (TFC) were determined by colorimetric assays. Antioxidant activity was determined by DPPH radical scavenging activity. The cytotoxicity of different doses of PPE (0, 5, 20, 100, 250, 500, $1000{\mu}g/ml$) was evaluated by MTT assays with A549 (lung non small cell cancer), MCF-7 (breast adenocarcinoma), SKOV3 (ovarian cancer), and PC-3 (prostate adenocarcinoma) cells. Results: Significant (P<0.01) or very significant (P<0.0001) differences were observed in comparison with negative controls at all tested doses (5-$1000{\mu}g/ml$). In all studied cancer cells, PPE reduced the cell viability to values below 40%, even at the lowest doses. In all cases, IC50 was determined at doses below $5{\mu}g/ml$. In this regard, MCF-7 breast adenocarcinoma cells were the most responsive cells to antiprolifreative effects of PPE with a maximum mean growth inhibition of 81.0% vs. 69.4%, 79.3% and 77.5% in SKOV3, PC-3 and A549 cells, respectively. Conclusions: Low doses of PPE exert potent anti-proliferative effects in different human cancer cells and it seems that MCF-7 breast adenocarcinoma cells are the most cells and SKOV3 ovarian cancer cells the least responsive in this regard. However, the mechanisms of action need to be addressed.
Introduction: Lung cancer is one of the most common cancers worldwide. In certain countries such as United States of America, it is the leading cause of related cancer mortality among both men and women. Natural products play an important role in overcoming the limitations of chemotherapy and radiotherapy. Objectives: In this study, we investigated the antiproliferative and apoptotic activities of Kanahia laniflora methanolic extract against human non-small cell lung cancer cells (A549). Methods: Sulforhodamine B colorimetric assays were used to determine the inhibitory effects of a leaf methanolic extract against A549 cells. Results: The extract showed strong cytotoxic activity against A549 cells with an $IC_{50}$ value of $0.13{\mu}g/ml$ compared to $0.21{\mu}g/ml$ for doxorubicin. The extract also significantly increased the percentage of apoptotic cells to 49.7% as compared to 1.4% and 47.4% for control and doxorubicin respectively. Conclusion: These results showed, for the first time, that a methanolic extract of Kanahia laniflora leaves can inhibit the proliferation of human non-small cell lung cancer cells (A549). Further attention to its potential as a new effective anticancer agent is warranted.
Objectives : This study was carried out to investigate anti-proliferative effects on MCF-7 human breast cancer cells of Anemarrhenae Rhizoma (AR) extract. Breast cancer is the most common disease in Korean women. Despite remarkable improvements in treatment strategies against various cancers during the past 40 years. breast cancer still remains as one of the main causes of cancer mortality among women the whole world over. Methods : Be investigated the effects of AR on cytotoxicity of MCF-7 human breast cancer cells in various extract conditions (n-hexane, ethyl acetate, butanol and water fraction). Results : The extract of Anemarrhenae Rhjzoma inhibits the proliferation of MCF-7 cells in a dose dependent manner. Especially. the ethyl acetate fraction of Anemarrhenae Rhizoma showed specific Cytotoxicity on MCF-7 cells. Conclusions : In conclusion. it can be concluded that Anemarrhenae Rhizoma extract has an anti-proliferative effect on MCF-7 human breast cancer cells. Especially. the ethyl acetate fraction is most effective to inhibit proliferation of MCF-7 cells.
It is demonstrated that phenolic compound has cytotoxic effect on cancer cells. Recently, ferulic acid is involved in anticancer activity by showing the decrease of cell viability in cancer cells. But, the anticancer mechanism of ferulic acid is left unknown. The purpose of this study was to examine the anticancer activity of ferulic acid on NIH3T3 fibroblasts and human skin melanoma cells (SK-MEL-3). The anticancer activity was measured by determining the cytotoxicy of ferulic acid on these cells. The cytotoxicity was measured by cell viability via XTT assay in these cells. In this study, ferulic acid decreased cell viability according to the dose-dependent manners after human skin melanoma cells were treated with various concentrations of ferulic acid for 48 hours. especially, ferulic acid remarkably decreased cell viability at a concentration of $120{\mu}M$ compared with control in human skin melanoma cells. While, ferulic acid did not show the significant decrease of cell viability at concentrations of $30{\sim}120{\mu}M$ in NIH3T3 fibroblasts. These results suggest that ferulic acid showed anticancer activity in cancer cells such as human skin melanoma cells by the decrease of cell viability significantly.
Purpose: This study investigates the alterations in A549 human non-small-cell lung cancer (NSCLC) cells exposed to Citrus junos extract (CJE). We further examine the antiproliferative and apoptotic effects of CJE on NSCLC cells. Methods: Inhibition of proliferation was examined by applying the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide (MTT) colorimetric assay on CJE-treated A549 NSCLC cells. The lactate dehydrogenase (LDH) assay was performed to measure the degree of toxicity of CJE on NSCLC cells. The effect on migratory proliferation was confirmed using the scratch wound healing assay. The antiproliferative effect of the CJE on human lung cancer cells was verified through morphological observation, fluorescence microscopy, and caspase-3 colorimetry. Results: Exposure of NSCLC cells to CJE resulted in a dose- and time-dependent decrease in cell activity and increased toxicity to the cells. In addition, microscopic observation revealed a reduced ability of the cancer cells to migrate and proliferate after exposure to the CJE, with simultaneous morphological apoptotic changes. Fluorescence staining and microscopic examination revealed that this death was a process of self-programmed cell death of NSCLC cells. Compared to unexposed NSCLC cells, the expression of caspase-3 was significantly increased in cells exposed to CJE. Conclusion: Exposure of A549 human NSCLC cells to CJE inhibits the proliferation, increases the cytotoxicity, and decreases the ability of cells to migrate and grow. Moreover, the expression of caspase-3 increases after CJE treatment, suggesting that the apoptosis of NSCLC cells is induced by a chain reaction initiated by caspase-3. These results indicate that Citrus junos is a potential therapeutic agent for human non-small-cell lung cancer.
목적: FDG PET은 악성종양의 진단에 유용하게 쓰이고 있으나, 염증에도 섭취되어 진단에 어려움이 있다. 염증에서 F-18-FDG 섭취는 단핵세포에서 포도당대사가 항진되어 나타난다. 이 연구에서는 사람의 암세포와 단핵세포간에 포도당대사에 차이가 있는지 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 사람의 대장암 세포주(SNU-C2A, SNU-C4, SNU-C5)와 폐암 세포주(NCI-H522), 단핵세포를 포도당 농도가 다른 배지에서 각각 배양시키고, FDG 섭취와 포도당운반체 1(Glut1)의 발현, hexokinase 활성도의 변화를 비교 분석하였다. 결과: 포도당이 없는 배지에서는 암세포와 단핵세포 모두에서 FDG 섭취가 증가되나 포도당 고농도(16.7 mM)에서는 섭취가 감소하였다. 이 고농도에서 Glut1 mRNA의 발현은 대장암 세포주, 폐암 세포주에서 감소하였다. 고농도의 포도당 배지에서 Glut1 단백질의 발현도 4종류의 암세포에서 모두 감소하였으나, 단핵세포에서는 변화가 없었다. SNU-C2A, SNU-C4, NCI-H522 세포에서 hexokinase의 활성도는 비슷하였고, 단핵세포와 SNU-C5에서는 약간 증가하였다. 결론: 포도당 섭취에 있어서 사람의 암 세포주와 단핵세포는 서로 다른 기전을 보이고 있다. 대장암 세포는 포도당 농도에 의한 포도당 섭취 변화가 Glut1에 의하여 조절되나, 단핵세포는 다른 기전을 가지고 있다.
Lee, Won Sup;Yun, Jeong Won;Nagappan, Arulkumar;Jung, Ji Hyun;Yi, Sang Mi;Kim, Dong Hoon;Kim, Hye Jung;Kim, GonSup;Ryu, Chung Ho;Shin, Sung Chul;Hong, Soon Chan;Choi, Yung Hyun;Jung, Jin-Myung
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권2호
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pp.465-469
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2015
Background: Orostachys japonicus A. Berger (A. Berger) is commonly used as a folk remedy for cancer therapy. However, the mechanisms of its anti-cancer activity are poorly investigated in human cancer cells. In this study, we investigated whether flavonoids extracted from Orostachys japonicus A. Berger (FEOJ) might have anticancer effects in human leukemia cells, focusing on cell death mechanisms. Materials and Methods: U937 human leukemic cancer cells were used. Results: FEOJ induced apoptosis in a dose-dependent manner in human U937 cancer cells. Flow cytometry revealed significant accumulation of cells with sub-G1 DNA content at the concentrations of $200{\mu}g/mL$ and $400{\mu}g/mL$. FEOJ-induced apoptosis was caspase-dependent through loss of mitochondrial membrane potential (MMP, ${\Delta}{\Psi}m$) in human U937 cancer cells, which might be associated with suppression of Bcl-2 and XIAP proteins. FEOJ induced the p38 MAPK signaling pathway, playing at least in part an important role in FEOJ-induced apoptosis. Conclusions: This study suggested that FEOJ may induce caspase-dependent apoptosis in human leukemic cells by regulating MMP (${\Delta}{\Psi}m$) through suppressing Bcl-2 and X-IAP. In addition, the results indicated that upstream p38 MAPK signaling regulates the apoptotic effect of FEOJ. This study provides evidence that FEOJ might have anti-cancer potential for human leukemic cells.
O. diffusa, C. appendiculata and F. thunbergii are reported to possess many pharmacological activities including anti-oxidant, anti-inflammatory, anti-hypertension, anti-diabetic and anti-cancer effects. However, their anti-cancer activities in human breast cancer have not been clearly elucidated yet. Objectives: In the present study, we compared the in vitro cytotoxic effects of single and complex treatment of O. diffusa, C. appendiculata and F. thunbergii in human breast cancer MDA-MB-231 cells. Methods: After we treated human breast cancer MDA-MB-231 cells with O. diffusa, C. appendiculata and F. thunbergii. we evaluated viability, growth inhibition, morphological changes, apoptotic body formation, measurement of the cell cycle and formation of DNA fragmentation of these cells. Results: We found that single treatment of O. diffusa and F. thunbergii could inhibit cell proliferation in human breast cancer MDA-MB-231 cells. However, complex treatment of O. diffusa, C. appendiculata and F. thunbergii had weak or no effect on the cell proliferation of MDA-MB-231 cells. The first, anti-proliferative effects of O. diffusa in MDA-MB-231 cells was associated with G2/M arrest of cell cycle and apoptotic cell death. The second, anti-proliferative effect of F. thunbergii in MDA-MB-231 cells was associated with apoptotic cell death. Conclusions: Taken together, these findings suggest that O. diffusa and F. thunbergii may be a potential chemotherapeutic agent for the control of human breast cancer cells, further studies will be needed to identify the molecular mechanisms.
Potassium cyanate (KOCN) is an inorganic compound and induces the carbamylation of proteins with cytotoxic effects on human cells. Although there is a potential cytotoxic molecule, the role of KOCN on the apoptosis of cancer cell is not well understood. The present study investigated the effects of KOCN on the human colorectal cancer cell line, HCT 116 cells. To understand the anti-cancer effect of KOCN on HCT 116 cells, we examined alteration of apoptosis, the intracellular $Ca^{2+}$ concentration, the intracellular signaling pathway and generation of reactive oxygen species (ROS) in these cells treated with KOCN. The apoptosis of HCT 116 cells was induced by KOCN in a dose-dependent manner at 24 hours and 48 hours, respectively. The apoptosis was processed via the cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP) and activation of caspase 3 in HCT 116 cells. KOCN induced the elevation of intracellular $Ca^{2+}$ concentration and changed the expressions of Bcl-2 family proteins. The pro-apoptotic Bax was continuously up-regulated, and the anti-apoptotic Bcl-2 was down-regulated by KOCN. KOCN also induced the hyperpolarization of mitochondria and the generation of ROS in HCT 116 cells. Taken together, these results indicate that KOCN induces the apoptosis of HCT 116 cells by disruption of $Ca^{2+}$ homeostasis and via mitochondrial pathway. This study provides the compound that may be used as a potent agent for the treatment of colorectal cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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