• 한국전자현미경학회:학술대회논문집
• /
• 한국현미경학회 1998년도 제29차 춘계학술대회
• /
• pp.63-63
• /
• 1998

• Applied Microscopy
• /
• 제37권3호
• /
• pp.175-183
• /
• 2007

정확한 세포의 구조 분석을 위해서는 조직을 가능한 한 자연 상태 그대로 보존하는 것이 무엇보다 중요하다. 그러나 지금까지 이용되고 있는 화학적인 고정방법은 조직의 변형을 유도하는 것으로 알려져 그 해결방법에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. 그 연구의 결과로 현재 급속 동결법이 제시되었고, 그 중 초고압동결법(high-pressure freezing method)는 가용 두께가 $200{\mu}m$로서 $10{\sim}15{\mu}m$정도인 침윤동결법(plunging method) 혹은 접촉동결법 (slamming method)보다 우수한 방법으로 보고되고 있다. 본 연구팀에는 노랑초파리(Drosophila melanogaster)의 레티나를 화학고정법과 고압동결법으로 고정하여 미세구조를 비교하였다. 먼저 120kV 전자현미경을 이용하여 각 세포 소기관을 비교하였고, 그 중 미토콘드리아의 형태변화를 좀 더 자세히 비교하기 위하여 초고압전자현미경을 이용하였다. 그 결과 급속동결 세포의 세포막과 미토콘드리아의 고정에서 특히 차이가 있음을 알 수 있었고, 이는 주로 탈수에 의한 구조변형 때문인 것으로 추측된다.

• Applied Microscopy
• /
• 제37권1호
• /
• pp.35-42
• /
• 2007

감간분체 (Rhabdomere)가 왕성하게 형성되는 번데기시기의 Drosophila melanogaster 광수용체 세포를 고정효과가 가장 좋은 high-pressure freezing (HPF)와 freeze-substitution (FS) 기법으로 고정한 후, 초고압 전자현미경을 통하여 1000 KV 전압에서 관찰하였다. 후박절편(250nm)의 tilting image를 통하여 광수용체 세포에서 감간분체 형성의 세가지 형태가 관찰되었다. 첫째로, 감간분체의 육방정계 배열이 (hexagonal may) 서로 다른 각도로 존재하고 있음을 관찰할 수 있었다. 둘째, 광수용체 세포의 세포질 안에서 감간분체 형성의 중간 과정으로 보여지는 작은 조각의 감간분체를 관찰할 수 있었다. 셋째, 감각분체가 여러 개의 층으로 형성되어 있음을 관찰할 수 있었다. 또 광수용체 세포의 세포질에는 최소한 세 가지의 소낭(vesicle)이 존재하였고, 이들 소낭들은 번데기 시기의 감각분체 형성을 주도하는 것으로 확인되었다. 이 결과들에 의하여 소낭이 감각분체 형성과 감각분체의 부분들이 모여서 감각분체를 완성되는 과정에 관여함을 추정할 수 있었다.

• ALGAE
• /
• 제21권4호
• /
• pp.479-483
• /
• 2006

In preparation of the biological samples for electron microscopy, the chemical fixation by glutaraldehyde, paraformaldehyde, and OsO4 has been generally used for a long time. However, the chemical fixation method has some problems: the infiltration time is a little bit long and the ultrastructure of cell or tissue transforms before complete fixation of sample. So, recently, cryo-fixation is considered more often in biomedical field. In this study, we compared High Pressure Freezing (HPF) method with chemical fixation method using a algal sample (Ptilota filicina J. Agardh), which was difficult to fix using chemical fixation method. In chloroplast, the ultrastructure of thylakoid lamella and phycobilisome can not show clearly by chemical fixation. In this study we could observe the ultrastructure of thylakoid lamella and phycobilisome of chloroplast very clearly using HPF fixation. An improved images of ultrastructures of nucleus, mitochondrion and floridean starch could obtain. These results suggest that HPF method is very useful method in algal specimen for electron microscopy.