HPLC-UV방법을 이용하여 밀전분 지방질의 주성분인 LPC를 정량하기 위해 HRW 밀전분 지방질로부터 순수한 LPC를 분리하여 LPC의 표준곡선을 작성하였다. 밀 품종별 LPC에서 대한 HPLC peak responses는 시료간 큰 차이를 보여주지 않아 HRW 밀전분 지방질로부터 만든 LPC의 HPLC-UV 표준곡선은 밀전분 지방질에 함유되어 있는 LPC의 함량을 신속하고 정확하게 정량하는 데 이용할 수 있음을 보여 주었다.
고성능 액체 크로마토그래피에 있어서 지방족 화합물인 알코올 케톤 및 에스테르의 간접 분광광도 측정에 관하여 조사하였다. 비발색단 또는 약한 발색단을 가지고 있는 이들 시료들은 검출시약으로 UV 흡수물질인 p-클로로페놀 또는 p-니트로페놀을 이동상에 첨가하므로 UV 검출기로서 간접적으로 검출할 수 있었고 검출한계로 Submicrogram 수준까지 얻을 수 있었다. 또한 최적조건하에서 몇가지 혼합시료들을 좋은 분리도와 비교적 높은 감도로서 분리 및 정량할 수 있었다.
Lee, Ju Sung;Paje, Leo Adrianne;Yoo, Sang-Woo;Lee, Seong;Ku, Ja-Jung;Lee, Sanghyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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제64권1호
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pp.63-67
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2021
Isovitexin, a marker compound with various pharmacological activities, in Lespedeza cuneata, was analyzed using high performance liquid chromatography coupled with UV (HPLC/UV). There are no previous reports on using L. cuneata as the source material for the quantification of isovitexin. In this study, we developed an optimized method using HPLC-UV analysis, which was validated using various parameters. Our method demonstrated high specificity, and good separation of the chromatographic peak was achieved. Parameters such as linearity (r2≥0.9997), precision, and accuracy indicated that our proposed analytical method had good reliability and sensitivity. These results demonstrate the utility and convenience of our method for rapidly quantifying isovitexin in L. cuneata extracts.
Kim, Juree;Lee, Hak-Dong;Choi, Jungwon;Lee, Sanghyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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제65권3호
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pp.153-158
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2022
This study aimed to identify the phytochemical constituents of Lactuca serriola leaves and perform quantitative analysis of the methanol (MeOH) extract of L. serriola, L. indica, L. raddeana, L. sativa, and L. triangulata. Six compounds were isolated from the MeOH extracts of L. serriola using open column chromatography and identified as protocatechuic acid (1), caffeic acid (2), cynaroside (3), apigenin 7-glucuronide (4), luteolin (5), and apigenin (6) using 1H-, 13C-nuclear magnetic resonance, and mass spectrometry. Quantitative analysis of the six compounds was performed on the MeOH extract of Lactuca species using high-performance liquid chromatography (HPLC) and an ultraviolet (UV). A reverse-phased column was used, and the UV absorbance was set to 280 nm. The contents of compounds 2 and 3 were the highest (1.58 and 2.64 mg/g ext., respectively) in L. serriola extracts. However, compounds 4 and 6 were higher (1.46 and 0.40 mg/g ext., respectively) in L. triangulata. These results provide quantitative data for the application of Lactuca species in the pharmaceutical and functional food industries.
We aim to develop a simple method for simultaneous and quantitative determination of benzoic acid, caffeic acid and chlorogenic acid in seeds of Eriobotrya japonica. In addition, antibacterial effect of these three phenolic acids was examined. A basic method is performed on the high performance liquid chromatography system coupled to an UV-detector (230 nm) and reverse phase C-18 column ($4.6{\times}150mm$, $5{\mu}m$). Each phenolic acid was confirmed via liquid chromatography-mass spectrometry (MS)/MS system under the multiple-reaction monitoring with negative-ion electrospray ionization (ESI(-)) mode. It is demonstrated that the method was could be applied to samples for an analytical study of the phenolic acids. On the other hand, three phenolic acids in seeds of E. japonica exhibited antibacterial effect against several pathogenic bacteria. Of these, benzoic acid was found to have stronger antibacterial effect.
In our previous study, we found uracil, adenosine, protocatechuic acid, syringin (eleutheroside B) and scoparone (6, 7-dimethoxycoumarin) in the Oplopanax elatus Nakai Stem. High-performance liquid chromatography (HPLC) -UV was used to quality and quantify the internal marker compounds in the O. elatus extract after validation of method with linearity, limit of detection (LOD), limit of quantitation (LOQ), accuracy and precision. The specificity assessment visually confirmed that the substance was detected without the introduction of other substances. The established method showed high linearity of the calibration curve and coefficient of correlation ($R^2$) of over the 0.999. HPLC was reported as five standard compounds equivalent using the following linear equation based on the calibration curve. The accuracy of measurement was 84.34 ~ 119.74% and the relative standard deviation (RSD) value was 0.28 ~ 1.60%. In addition, our established method showed high repeatability. The RSD value was 1.10 ~ 6.81%. So, we found the amount of the internal marker compounds in the O. elatus extract. These results demonstrated that can be used to quality evaluation of the O. elatus.
Scutellaria baicalensis Georgi (Scutellariae Radix)는 이뇨제, 고지혈증, 항박테리아, 항알레르기, 항염증제 및 항암제와 같은 건강보조식 및 전통 생약으로도 널리 사용되어 왔다. 본 연구에서 복잡한 S. baicalensis 추출물에서 지표 물질 또는 유효화합물들을 분리하는 것은 신원 확인 및 생리활성 평가를 위한 필수적인 단계다. 8개의 성분들로 구성된 타겟 분획물을 두개의 gradient elution를 사용하여 고성능 액체 크로마토 그래피에서 분석하였다. 중압 액체크로마토그래피 및 개방형칼럼으로 분취를 시뮬레이션함으로 예비실험에서 충분히 분리가 되도록 용리 조건을 결정할 수 있었다. 최적 분취방법으로 확보된 표준유효분획물로부터 8개의 지표성분들이 포함된 것을 확인하였다. 또한, 분획물은 UPLC-QTof-MS 비교 분석으로 MS, UV, HRESIMS 결과를 확인할 수 있었다. 따라서, 스케일 업 실험법은 S. baicalensis 추출물에 성공적으로 적용될 수 있었다.
Cysteamine has been used in cosmetics as an antioxidant, a hair straightening agent, and a hair waving agent. However, recent studies indicate that cysteamine can act as an allergen to hairdressers. The objective of this study was to develop and validate a simple and effective reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method for the measurement of cysteamine and its dimer, cystamine. Sodium 1-heptanesulfonate (NaHpSO) was used as an ion-pairing agent to improve chromatographic performance. Separation was performed on a Gemini C18 column ($250mm{\times}4.6mm$, $5{\mu}m$ particle size) using a mobile phase composed of 85:15 (v/v) 4 mM NaHpSO in 0.1% phosphoric acid:acetonitrile. UV absorbance was monitored at 215 nm. The RP-HPLC method developed in this study was validated for specificity, linearity, limit of detection, limit of quantitation, precision, accuracy, and recovery. Cysteamine and cystamine were chromatographically resolved from other reducing agents such as thioglycolic acid and cysteine. Extraction using water and chloroform resulted in the recovery for cysteamine and cystamine ranging from 100.2-102.7% and 90.6-98.7%, respectively. This validated RP-HPLC method would be useful for quality control and monitoring of cysteamine and cystamine in cosmetics.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAMs) are ubiquitous contaminants in marine environments. PAHs enter estuarine and nearshore marine environment via several routes such as combustion of fossil fuels, domestic and industrial effluents and oil spills PAHs have been the focus of numerous studies in the world because they owe potentially carcinogenic, mutagenic, and teratogenic to aquatic organisms and humans from consuming contaminated food. However, one can hardly find any available data on PAM content in marine organisms in Korea. The present study was carried out in order to determine PAH content in oysters from the intertidal and subtidal zones of Chinhae Bay, which is located in near urban communities and an industrial complex, and the bay is considered to be a major repositories of PAHs. 16 PAHs were analyzed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) with uv/vis and fluorescence detectors in oysters: they are naphthalene (NPTHL), acenaphthylene (ANCPL), acenaphthene (ACNPN), fluorene (FLURN), phenanthrene (PKEN), anthracene (ANTHR), fluoranthene (FLRTH), pyrene (PYRf), benzo(a)anthracene (BaA), chrysene (CHRY), benzo(b)- fluoranthene (BbF), benzo(k)fluoranthene (BkF), benzo(a)pyrene (BaP), dibenz(a, h)anthracene (DhA), benzo(g, h, i)peryne (Bghip) and indeno(1, 2, 3, -cd)pyrene (I123cdP). The PAH contents in oysters from the intertidal and subtidal zones of Chinhae Bay ranged from < 0.1 to 992.0 $\mu\textrm{g}$/kg (mean 69.8 $\pm$ 9.8 $\mu\textrm{g}$/kg). Key words . polycyclic aromatic hydrocarbon, high performance liquid chromatography, oyster, Chinhae Bay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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