Animal cells in culture typically convert most of the glucose they consume into lactate. The accumulation of lactate, however, is commonly cited as one of the factors that inhibit cell growth and limit the maximum cell concentration that can be achieved in culture. The specific production of lactate and the amount of glucose converted to lactate can be reduced when cells are grown in a fed-batch culture in which the residual glucose concentration is maintained at low levels. Such a fed-batch culture was used to grow and adapt hybridoma cells into a low-lactate-producing state before changing into continuous culture. The cells reached and maintained a high viable cell concentration at steady state. In a similar manner, cells that were initially grown in batch culture and a glucose-rich environment reached a steady state with a cell concentration that is much lower. The feed composition and dilution rates for both cultures were similar, suggesting steady state multiplicity. From a processing perspective the desired steady state among those is the one with the least metabolite production. At such seady state nutrient concentration in the feed can be further increased to increase cell and product concentrations without causing the metabolite inhibitory effect typically seen in a cell culture. Controlling cell metabolism in a continuous culture to reduce or eliminate waste metabolite production may significantly improve the productivity of mammalian cell culture processes.
The whole cell of alkalophilic Streptomyces sp. B-2 which produce glucose isomerase was immobilized by entrapment method for the effective production of high fructose syrup. The highest immobilized activity was achieved when the enzyme was bound to 2% $textsc{k}$-carrageenan. Immobilized glucose isomerase the pH optimum was about pH 7.5~8.5. Immobilization of alkalophilic Streptomyces sp. B-2 on 2% $textsc{k}$-carrageenan at 7$0^{\circ}C$ showed an increase in glucose isomerase activity. GI activity of immobilized cells was maximum Co2+ concentration 10-3M, Mg2+ concentration 10-3M.
Polyacrylonitrile diagnostic membranes were prepared to make blood-glucose self-checking system for diabetics. After the prepared polyacrylonitrile membranes were stored at sereval different environments, final absorbances at 680 nm were measured at various concentration in blood. The mesured blood-glucose level did not show the big differences at the various storage temperatures. It was found that the blood-glucose level decreased a little bit compared to the standard value after $10{\sim}30$ hours at high humidities.
An amperometric glucose biosensor has been developed using viologen derivatives as electron mediator of glucose oxidase (GOD) at Au electrode. Highly stable self assembled monolayer (SAM) of thiol-based viologen is immobilized onto the Au electrode followed byGOD is immobilized onto the viologen modified electrode. This biosensor response to glucose was evaluated amperometrically in the potential of -300 mV. Upon immobilization of glucose oxidase onto the viologen modified-electrode, the biosensor showed rapid response towards glucose. Experimental conditions influencing the biosensor performance such as, pH, potential were optimized and assessed. This biosensor offered an excellent electrochemical response for glucose concentration below ${\mu}mol$ level with high sensitivity and selectivity and short response time. The levels of the RSD's (< 5 %) for the entire analyses reflected the highly reproducible sensor performance. Using the optimized a linear relationship between current and glucose concentration was obtained up to $4.5{\times}10^{-4}$ M. In addition, this biosensor showed well reproducibility and stability.
The purpose of this study was to evaluate the effect of high glucose on prostaglandin E2 production in human gingival fibroblasts and periodontal ligament cells in vitro. In control group, the cells($5{\times}10^4\;cells/ml$) were cultured with Dulbecco's Modified Eagle's Medium contained with 10% fetal bovine serum, 45mg/dl glucose. In experimental groups, glucose was added to the above culture condition at the final glucose concentrations of 100mg/dl(Test group 1), 200mg/dl (Test group 2) and 400mg/dl (Test group 3). Then each group was tested for the cell proliferation rate, protein levels, and prostaglandin E2 production at $\frac{1}{2}$, 1, 2, 5 days. The results were as follows : 1. As glucose concentration increased, cell proliferation rate decreased significantly at 1, 2, 5 days in human gingival fibroblasts and periodontal ligament cells(P<0.01). 2. In human gingival fibroblasts, test group 2 and 3 showed significantly decreased protein levels as compared to control group at 5 days (P<0.01). 3. In human periodontal ligament cells, as glucose concentration increased, protein levels decreased significantly at 2 days and 5 days(P<0.01). 4. Prostaglandin $E_2$ production in human gingival fibroblasts and human periodontal ligament cells significantly increased as glucose concentration increased(P<0.01). results at 5 days showed obvious difference as compared to those at 2 days. From the above results, high glucose appeared to affect cellular activities including cell proliferation rate, protein levels and enhance prostaglandin $E_2$ production. It was assumed that prostaglandin E2 production by high glucose enhances inflammatory reaction and has a toxic effect on human gingival fibroblasts and human periodontal ligament cells. This study suggests that periodontal disease in diabetic patient is related to prostaglandin $E_2$ production.
Kwon, Soo Jeong;Hwang, Ha Nule;Moon, Young Ja;Cho, Gab Yeon;Woo, Sun Hee;Boo, Hee Ock;Koo, Jin-Woog;Kim, Hag Hyun
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.170-170
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2017
The highly valued ornamental plant, Platycodon grandiflorum for. duplex was generated by petaloidy of a calyx of Platycodon grandiflorum. The present investigation was executed to explore the several factors having effects on the germination of pollens with a view to acquire the underlying data for the artificial crossing to cultivate the species of Platycodon grandiflorum for. duplex. Both low and high temperature impaired the germination of Platycodon grandiflorum for. duplex pollens. The good germination rate was observed at the temperature of $25^{\circ}C$. The types and concentrations of carbon sources induced the differences in germination rate. The germination rate increased with the increasing concentration of sucrose and glucose except for fructose. Sucrose and glucose showed the highest results at the concentration of 20%. While fructose demonstrated the similar tendency to sucrose and glucose, it reduced the germination rate at the concentration of 20%. The highest germination rate was observed at the concentration of 15%. The appropriate carbon course for germination of pollens of Platycodon grandiflorum for. duplex was glucose of which germination rate was twice as high as that of sucrose and fructose. The germination rate was reduced substantially when the pH was close to alkali, and the potential germination rate was obtained at pH 6. Boric acid enhanced the germination rate at a lower concentration than the higher concentration.
The assimilability of glucose and xylose of Rhodopseudomonas K-7, whose hydrogen evolution has been characterized previously, was investigated under the anaerobic photosynthetic and the aerobic dark conditions. This organism is able to grow well in the medium containing glutamate and malate as organic substances under the anaerobic light condition. However, the substitution of glucose for malate retarded the growth rate, while the addition of glucose to the seed culture remarkably promoted the utilization of glucose added in the main culture. Optimal glucose concentration in the seed culture to induce glucose assimilability of the organism was around the concentration of 60 mM of glucose. Then, the seed culture grown in the medium containing 60 mM of glucose were inoculated in the medium containing 10, 20, 30, 60 and 100 mM of glucose respectively. The results were revealed that the consumable content of glucose was limited even though the high concentrations of glucose was contained in the medium. The consumption of considerable amount of glucose was observed when cultured under the aerobic dark conditions than the anaerobic illuminated conditions.
Insulin-like growth factor-I(IGF-I) has significant insulin-like anabolic effects which include the stimulation of glucose and amino acid uptake, as well as protein and glycogen synthesis. IGFs exist in serum and other biological fluids as complexes bound to a family of structurally related insulin-like growth factor binding proteins(IGFBPs). Six human IGFBPs can modulate the effects of IGFs on target tissues by several mechanisms, including altering the serum's half-life and the transcapillary transport of IGFs, as well as changing the availability of IGFs to specific cell surface receptors. Human fibroblasts secrete IGFBPs that can modify IGF-I action. Previous to our study using either Northern blotting, and Western blotting have shown that fibroblasts express mRNA IGFBP-3, -4, and -5, and synthesize these proteins. In addition, fibroblast cell lysates revealed that the IGFBP-3 was most abundant. For these reasons, we undertook to gain further insight into the effects of high and low glucose incubation condition on metabolism and IGFBP-3 expression. In results of metabolites and IGFBP-3 expression in GM10 cells cultivated with various glucose concentration, the consumption of glucose and accumulation of triglyceride were increased in condition of high glucose, and total protein level was decreased. in the course of time. After 5 days incubation, levels of free amino acid in medium containing glucose of high concentration glucose were higher than in conditions of low glucose. Although the levels of IGFBP-3 protein and mRNA levels were increased in low glucose, and IGFBP-3 was not affected by any pretense. Taken together, we suggest that the study of growth factors, like IGFs, might be a possible model of diabetes militus in cell, although the results in cell models were not in accord with in vivo.
Diabetes-related complications in human and veterinary medicine have been shown to be associated with hyperglycemia-induced inflammation. It has been recently suggested that the onset of insulin resistance may be caused by over-production of inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ from immune cells. Conjugated linoleic acid (CLA) regulates inflammatory response through modulation of TNF-${\alpha}$ expression. The objective of this study was to examine the effect of CLA on nuclear factor kappaB (NF-${\kappa}B$) p65 binding activity, inhibitory kappaB ($I{\kappa}B$)-${\alpha}$ expression, and TNF-${\alpha}$ production from high glucose-treated RAW 264.7 cells. CLA was added to RAW cells that had been previously cultured with low or high concentration of glucose. The levels of TNF-${\alpha}$ protein in the culture supernatant of RAW cells exposed to high concentrations of glucose were higher than those of cells exposed to low concentrations of glucose. The treatment with the high concentration of glucose in RAW cells increased levels of NF-${\kappa}B$ p65 binding activity and the decreased $I{\kappa}B-{\alpha}$ expression when compared with those of low glucose. The treatments in combination with CLA and glucose (low and high) glucose in RAW cells increased TNF-${\alpha}$ production when compared with that glucose alone. These treatments with CLA increased TNF-${\alpha}$ production in high glucose-treated RAW cells than those with low glucose. These treatments of CLA also showed higher NF-${\kappa}B$ p65 binding activity and lower $I{\kappa}B-{\alpha}$ expression in high glucose than those in low glucose condition. This suggests that CLA can increase NF-${\kappa}B$ p65 binding activity and TNF-${\alpha}$ production from high glucose-treated RAW 264.7 cells and is likely to promote hyperglycemia-induced inflammation.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.27
no.2
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pp.196-201
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2013
Abnormal regulation of glucose and impaired lipid metabolism that result from a defective or deficient insulin are the key etiological factor in type 2 diabetes mellitus (T2DM). The our study evaluated the beneficial effect of diet supplementation with Lentinus edodes on hyperglycemia and lipid metabolism in normal and type 2 diabetic rats. The animals were divided into 4 groups: group I(control) rats were fed standard diet (12% of calories as fat); group II (T2DM) rats were fed HFD (40% of calories as fat) for 2 weeks and then injected with STZ (50 mg/kg); group III and group IV rats were continually fed a diet containing 1% and 10% Lentinus edodes for 4 weeks after T2DM induction, respectively. After 4 weeks we determined biochemical parameters such as glucose, insulin concentration, serum total cholesterol (TC), triglycerides (TG), high-density lipoprotein (HDL), and glycosylated hemoglobin (HbA1c) concentration were also measured. There was a significant reduction in serum TC and TG in the Lentinus edodes supplement groups. The Lentinus edodes diet supplementation were found to have a potent lipid metabolism improvement as well as LDL concentration decreased and HDL concentration was increased. Concentrations of blood glucose and HbA1c in the experimental groups II were significantly decreased after 4 weeks compared with the control group. The Lentinus edodes diet supplementation is useful in regulating the glucose level, improves the insulin, HbA1c, serum lipid metabolism in experimental diabetic rats. We suggest that Lentinus edodes supplementation may have the control effects of diabetes mellitus by improving blood glucose control and lipid metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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