Low cost fermentation substrates frequently contain a mixture of carbon sources including hexoses, pentoses and disaccharides. Fermentation of such mixtures requires an understanding of how each of these substrates is utilized. During batch culture of Pichia stipitis CBS 5776 on sugar mixtures, glucose causes catabolite repression of xylose and cellobiose utilization. Also, glucose causes a permanent repression of xylose utilization as evidenced by reduced growth rates during the xylose phase of glucose/xylose fermentation. The growth model for multiple substrates is developed based on a cyclic AMP mediated catabolite repression mechanism and this model adequately described the growth and ethanol production from sugar mixtures.
Carbohydrate metabolism and partitioning are dependent on relationships between sources and sinks which can be affected by rates of photosynthesis and respiration. Fructan, the major form of stored carbohydrate in tall fescue (festuca arundineacea Schreb.), changes in concentration during growth and in response to the environment. Objectives of this study were i) to examine the content and the composition of carbohydrates in five tissues (mature leaf blade, immature leaf blade, leaf elongation zone, terminal meristem, and root tips) of two tall fescue genotypes, one with high yield per tiller (HYT) and one with low yield per tiller (LYT), and ii) to compare the reserved and utilized carbohydrates among above five different tissues, particularly between the leaf elongation zone and root tips. The established vegetative tillers of the HYT and LYT genotypes were grown in a controlled-environment growth chamber. Water-soluble carbohydrate (WSC) in the leaf elongation zone was about 22% of dry weight in the HYT and about 19% in the LYT genotype. The root tip also had high WSC, about 12% of dry weight in the HYT and 6% in the LYT genotype. Hexoses and sucrose were the major components of total WSC in all tissues except the leaf elongation zone. The growing tissues (sinks), i.e., the leaf elongation zone and root tip, had a high proportion of low degree of polymerization fructan, i.e., 3 to 8 hexose units.
Ethanol and Xylose were produced from cellulosic agricultural waste such as rice straw and corn cob by a single-step simultaneous hydrolysis-fermentation process utilizing semi-solid culture of Trithoderma as enzyme source and Saccharomyces yeast. By this process all the hexoses prduoced by the enzyme were converted to ethanol leaving pentoses which are not fermented by the yeast. By processing 50 g of rice straw, 18 ml of ethanol and 2.7 g of xylose were produced and 50 g corn cob produced 3.8 ml of ethanol and 10.8 g of xylose. Alkali-treatment of rice straw showed little effects on the productivities of ethanol and xylose. The possible reasons are discussed.
Aureobasidium pullulans produced high concentration of polyols extracellularly in the media of sucrose, glucose and mannose as sole carbon source. Mannitol was the main polyol produced during the late exponential and stationary phases of growth together with small quantities of glycerol. Sucrose and glucose were rather rapidly metabolized to mannitol among carbon sources examined where the initial glucose concentration showed no difference in the amount of mannitol. In contrast 20%(w/v) of sucrose was the most appropriate concentration tested. However, the yield of mannitol based on substrate used($Y_{p/s}$) was independent on the initial concentration, and the mean value of mannitol yield in 10% glucose and sucrose media was 0.144 and 0.188, respectively. Mannitol production was reduced in response to an elevated water stress imposed by salts within the range from 0.25 to IM of NaCl or KCl as stress solutes. However, glycerol contents and its ratio to mannitol were increased at the conditions of high salinity. Based on the results, extracellular mannitol produced by A. pullulans probably resulted partly from osmoregulation(in case of glycerol) and mainly from, as known to occur in most of fungi, enzymatic reduction of the corresponding hexoses through phosphate pathway.
Insect cells such as Spodoptera frugiperda Clone 9 (Sf9) cells are widely chosen as the host for heterologous expression of a mammalian sugar transport protein using the baculovirus expression system. Characterization of the expressed protein is expected to include assay of its function, including its ability to transport sugars and to bind inhibitory ligands such as cytochalasin B. It is therefore very important first to establish the transport characteristics and other properties of the endogenous sugar transport proteins of the host insect cells. However, very little is known of the transport characteristics of Sf9 cells, although their ability to grow on TC-100 medium strongly suggested the presence of endogenous glucose transport system. In order to investigate the substrate and inhibitor recognition properties of the Sf9 cell transporter, the ability of pentoses to inhibit 2-deoxy-D-glucose (2dGlc) transport was investigated by measuring inhibition constants $(K_i)$. To determine the time period over which of sugar into the Sf cells was linear, the uptake of 2dGlc 0.1mM extracellular concentration was measured over periods ranging from 30 seconds to 30 minutes. The uptake was linear for at least 2 minutes at the concentration, implying that uptake made over a 1 minute time course would reflect initial rates of the sugar uptake. The data have also revealed the existence of a saturable transport system for pentose uptake by the insect cells. The transport was inhibited by D-xylose and D-ribose, although not as effective as hexoses. However, L-xylose had a little effect on 2dGlc transport in the Sf9 cells, indicating that the transport is stereoselective. Unlike the human erythrocyte-type glucose transport system, D-ribose had a somewhat greater apparent affinity for the Sf9 cell transporter than D-xylose. It is therefore concluded that Sf9 cells contain an endogenous sugar transport activity that in some aspects resembled the human erythrocyte-type counterpart, although the Sf9 and human transport systems do differ in their affinity for cytochalasin B.
대부분의 동물에서 체내 또는 체외수정란의 체외 배양 시 일정한 발육 단계까지 발달한 후 발육지연이나 정지가 되는 체외 발육억제 현상이 나타나게 된다. 특히 돼지에서는 타 가축들과는 달리 4 세포기에서 체외 발육억제 현상이 일어나기 때문에 체외에서의 발육율이 매우 낮아 수정란 생산이 제한되고 있다. 따라서 본 연구는 이러한 돼지 체외발육 억제 현상을 극복하고 돼지 체외 수정란의 체외배양 체계의 기초 자료를 얻고자 돼지 미성숙 난자를 체외에서 성숙, 수정시킨 뒤, 체외 수정란의 배양 시 성장인자와 6탄당의 첨가에 따른 체외 발육율을 검토하였다. 난자의 핵 성숙과 세포질 성숙 및 세포 기능에 영향을 미치는 것으로 알려져 있는 성장인자로는 Insulin-like growth factor-I(IGF-I)과 Epidermal growth factor(EGF)를 사용하였고, 여러 종의 번식기관에 존재하여 배반포 형성을 촉진시키는 것으로 알려진 glucose, mannose, galactose 및 fructose가 6탄당으로 사용되었다. 체외수정란의 발육을 위한 기본 배양액인 NCSU-23에 각각 0, 1, 5, 10 및 20ng/ml의 IGF-I과 EGF를 각각 첨가하여 농도의 차이에 따른 발육율을 검토하였다. 또한 5.56mM의 glucose, mannose, galactose 및 fructose에 5ng/ml의 IGF-I 또는 10ng/ml의 EGF 첨가 유, 무에 따른 초기배 발육율을 검토하였다. 마지막으로, 각각의 6탄당에 위와 같은 농도의 IGF-I와 EGF 공동 첨가 유, 무에 따른 초기배 발육율을 검토하였다. 그 결과 돼지 체외 수정란의 체외 발육 시 배양액 내에 서로 다른 농도의 IGF-I과 EGF를 첨가하였을 때 IGF-I은 5ng/ml(12%)에서, EGF는 10ng/ml(10%)의 실험구에서 가장 높은 배반포기 배의 발육율을 나타냈다. 또한 각각의 6탄당과 IGF-I 또는 EGF 유, 무에 따른 초기배 발육율을 검토한 결과 IGF-I과 EGF 모두 glucose 첨가 시 타 첨가구에 비해 초기 발육 단계의 수정란 발육뿐만 아니라 배반포까지의 배발육(10~11%)이 타 첨가구(3~8%)에 비해 높게 나타났다. 한편, 각각의 6탄당이 첨가된 배양액 내에 IGF-I파 EGF 공동첨가 유, 무에 따른 초기배 발육율을 검토한 결과 모든 실험구에서 EGF와 IGF-I 첨가 시 무첨가보다 높은 초기 배 발육율을 나타냈으며 특히 초기 분열단계 수정란에서는 발육의 차이가 크게 나타났다. 본 연구 결과 성장인자와 6탄당의 첨가는 돼지 수정란의 체외배양 시 초기배 배발육에 효과적인 영향을 미치는 것으로 사료되며, 이는 체외 발육율이 타 가축에 비해 낮은 돼지의 수정란 생산에 있어 체외배양체계의 개선을 위한 기초자료가 될 수 있을 것이라 기대된다.
As a basic studies for the laboratory scale production of alfalfa inoculum, Rhizobium meliloti M14 was characterized for its carbon and nitrogen sources, and some parameters for broth cultivation in a chemostat were studied by semi-continuous operation. The result s obtained were as follows. 1. Growth rate of the strain was increased by disaccharides than by monosaccharides tested, and pentoses resulted in poor growth than hexoses. Sugar alcohols including inositol supported the best growth among sugars. 2. Mannitol in the yeast-mannitol-broth was substituted by natural carbon sources such as malt extract or molasses. 3. Ten per cent of fresh yeast water appeared to supply enough amount of growth factor s for the strain, and the effect was equivalent to 0.24 percent of the commercial yeast extract powder. 4. Batch growth of the stain in a chemostat, New Brunswick Micro Ferm 28L, reached in the early stationary growth phase of $5{\sim}7{\times}10^9cells/ml$ after 36 hours of incubation. The culture at this stage was switched to semi-continuous cultivation, and the culture broth of four-fifth of the working volume was recovered every 24 hours when the maximal count was obtained.
During a dilute acid hydrolysis, degradation products are formed or liberated by pre-treatment of lignocelluloses depend on both the biomass and the pretreatment conditions such as temperature, time, pressure, pH, redox conditions, and addition of catalysts. In lignocellulosic biomass, sugars can be degraded to furfural which is formed from pentoses and 5-hydroxymethulfurfural (HMF) from hexoses. 5-HMF can be further degraded, forming levulinic acid and formic acid. Acetate is liberated from hemicellulose during hydrolysis. Some decomposed compounds hinder the subsequent bioconversion of the solubilized sugars into desired products, reducing conversion yields and rates during fermentation. In the present work, samples of rapeseed strawwere hydrolyzed to study the optimal pretreatment condition by assessing yields of sugars and decomposed products obtained under different reaction conditions ($H_2SO_4$ 0.5-1.25% (w/w), reaction time 0-20 min and temperature range 150-220 C). A careful analytical investigation of acid hydrolyzate of rapeseed straw has not yet been undertaken, and a well-closed mass balance for the hydrolyzate in general is necessary to verify the productivity and economic predictions for this process.
Wu Jian-Rong;Son Jeong Hwa;Kim Ki Myong;Nam Soo-Wan;Lee Jin-Woo;Kim Sung-Koo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.33
no.2
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pp.117-122
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2005
Beijerinckia indica was cultured in mineral salts medium (MSM) medium with various carbon and nitrogen sources to improve the production yield of heteropolysaccharide-7 (PS-7). At high C/N ratio, the high concentration of PS-7 was produced until 40 h of the culture, whereas most of the glucose as a carbon source was used for the cell growth at low C/N ratio. However, at the high C/N ratio, PS-7 accumulation stopped at 48 h of the culture due to the increasing viscosity of the culture broth would inhibit the cell growth. Therefore, the optimized value of C/N ratio was 33.3 (20 g/L glucose, 7.5 mM $NH_{4}NO_3$) for the high production of PS-7. In the culture with various carbon sources, B. indica effectively used the hexoses or glucose-generating sugars for PS-7 formation. Especially, sucrose was the best carbon source for the high production of PS-7 (6.96 g/L) with a high viscosity (40772 cp). In the culture of B. indica with MSM medium containing 20 g/L glucose and 7.5 mM $NH_{4}NO_3$ in a 51 fermentor, the highest cell concentration was 2.5 g/L and the highest concentration of PS-7 was 7.5 g/L (35174 cp). The additional nitrogen sources of 7.5 mM $NH_{4}NO_3$, glutamine and glutamate at 12 h of the culture after exhaustion of a nitrogen source regulated the metabolism of carbon sources, therefore the nitrogen sources could control PS-7 synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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