To search for less toxic antiherpetic agents, the inhibitory effects of natural naringenin on the plaque formation of herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and type 2 (HSV-2) in Vero cells were examined by the plaque reduction assay in vitro. Naringenin inhibited plaque formations of HSV-l and HSV-2 in a dose dependent manner. It also exhibited more potent antiherpetic activity on HSV-l with selectivity index (SI) of 19.1 than on HSV-2 with SI of 5.7 The combined antiherpetic effects of naringenin with nucleoside antiherpetic agents, acyclovir and vidarabine, were examined on the multiplication of these two strains of herpesviruses in Vero cells by the combination assay. The results of combination assay were evaluated by the combination index (CI) that was calculated by the multiple drug effect analysis. The combinations of naringenin with acyclovir on HSV-l and HSV-2 showed more potent synergism with CI values of 0.28∼0.81 for 50%, 70%, 90% effective levels than those with vidarabine with CI values of 0.86-3.28.
Park, Hae-Kyung;Woo, So-Youn;Kim, Hyun-Jin;Lee, Chung-Hwa
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.35
no.2
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pp.191-201
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2000
The viruses of Herpes Simplex Virus 1 (HSV-1), Herpes Simplex Virus 2 (HSV-2) and Varicella-Zoster virus (VZV) which belong to the alpha herpes subfamily are important human pathogens. When eruptions were not fully developed from these viral infections, clinical diagnosis was not always easy and required virological confirmation test. The above viruses were reactivated in individuals who were compromised in immune competence for one reason or another. Polymerase chain reaction (PCR) enables rapid and sensitive detection of HSV and VZV DNAs. Its sensitivity was largely influenced by choice of primers. Authors conducted a study to detect of those three viruses in human specimens including vesicle fluid and joint fluid and serum using PCR methods. Primers used for this study were the general primer pair GPHV-RU which was known to amplify within the genes enjoying the highest degree of homology between UL15 of HSV and UL42 of VZV. PCR with primers hybridized pair GPHV-RU amplifies a 396 bp with THP-1 and HSV-2 standard strain DNA and 405 bp with VZV standard strain DNA. Restriction enzyme cleavage with HpaII and DdeI were used to detect and distinguish DNAs of THP-1 and HSV-2 and VZV. The purpose of this study was a rapid and easy detection of VZV and THP-1 or HSV-2 from various clinical specimens (vesicle fluid, serum and joint fluid) by PCR method. Used methods were: HSV PCR with primer 1, 2 and HpaII RE digestion; VZV nested PCR; HSV PCR with primer A, Band BssHII RE digestion. 1) In 33 cases (33/42, 78.6%) VZV was detected single or mixed infection from 42 clinical specimens which included vesicle fluid (5), serum form respiratory infected children (10), serum from immune suppressed adult cancer patients (7) and joint fluid from arthritis patients (20). 2) In 20 cases (20/42, 47.6%) HSV was detected singly or mixed infection and 19 of those cases were HSV-2 and 1 case was THP-1. 3) In 19 cases (19/42, 45.2%) VZV was singly detected which included serum from respiratory infected children (6 cases), joint fluid from arthritis patients (9 cases), vesicle fluid (2 cases) and serum form immunosuppressed cancer patients (2 cases). 4) HSV was singly detected in 6 cases (6/42, 14.3%) which included joint fluid from arthritis patients (5 cases) and serum form respiratory infected children (1 cases). 5) 14 cases of VZV and HSV mixed infection (14/42, 33.3%) were detected. They included vesicle fluid (3 cases), serum form immunosuppressed cancer patients (4 cases), serum from respiratory infected children (2 cases) and joint fluid from arthritis patients (5 cases). 6) HSV-1 and HSV-2 detection and typing by HSV PCR with primer A, Band BssHII RE digestion method was more sensitive and the results were easier to detect than on other method.
Sa, Young-Hee;Kim, Hyun Joo;Lee, Bae Hwan;Hong, Seong-Karp
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
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2019.05a
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pp.528-532
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2019
The dorsal root ganglion (DRG) was isolated from mouse embryos and Schwann cells and neuronal cells were cultured in vitro. The neurons and Schwann cells were cultured separately and the two kinds of cells were cultured together for three weeks. Generation of myelination was confirmed by transmission electron microscope and confocal microscope using a myelinaion protein, myelin protein zero (MPZ) antibody. The sindbis virus was infected for three days in the myelinated culture cells and then demyelination was carried out. The process of demyelination was also confirmed by transmission electron microscopy and confocal microscopy using myelin protein zero (MPZ) antibody. The study was supported by a Basic Research Program through the National Research Foundation (NRF) funded by the Ministry of Science and Technology, ICT and Future Plans (NRF-2016R1A2B4016552 and 2017R1A2B3005753).
We have previously reported that simulated snuff dipping in conjunction with type I herpes simplex virus (HSV-1) induced oral malignant changes in hamsters. Present study was designed to investigate the carcinogenic effect of tobacco specific-N-nitrosamines (TSNAs) and HSV-1, alone or in combination, in hamsters. Hamsters were divided into 6 groups and the right buccal pouch mucosa were treated as follows: Grp 1, Control (Mock inoculation) [MI]+Topical Application [TA] of mineral oil[MO] : Grp 2, TA of 1% n'- nitrosonornicotine [NNN] + IM: Grp3, TA of 1% 4-N-nitrosomethylamino-1- (3-pyridyl)-1-butanone [NNK] + MI: Grp 4, HSV-1 inoculation [HI]+TA of MO : Grp 5, TA of 1% N-nitrosonornicotine [NNN] + HI: Grp 6, TA of 1% NNK + HI. TA of MO or TSNAs was initiated 1 day after the MI or HI and given 3 times per week for 20 consecutive weeks. At the buccal pouches were fixed for light microscope examination. No animal s developed tumors or malignant histopathologic changes in the mucosa of the buccal pouches. These data indicate that individual TSNAs, alone or in conjunction with HSV-1 infection, do not develop malignant changes in hamster buccal pouches.
A comlementary call line CR2 is curretly used to propagte the Disabled Infectious Single Cycle Herpes Simplex Virus Typee2 (DISC HSV-2) on a small Iaboratory scale upto 15 L. These cultures are initiated by passaging the cells from roller bottle cultures. Whilst this is suitable for the laboratory scale it is totally impractical for use in seeding an industrial manufacturing scaled version of the culture. It is paramount to have a robust system for passaging cells from a small microcarrierier culture system to a larger one by a serial subculturing regime. Here we report on the successes we have had in our laboratory in scaling up out production system for the DISC HSV-2 from small 1-L cultures to a 50-L vessel with the maintenance of the viral productivity. Ease of use, reproducibility and the need to minimise overall production time were factors which were taken into consideration whils developing our procedures. We were aware of the need to keep a production train simple and as short as possible as this was the amall scale study for an envisaged manufacturing process.
Objective : This study was undertaken for discovering the characteristics of sleep in ordinary symptoms based on the Sasang Constitution. The result of this study could be helpful to understand and to identify patients such as Taeumin, Soyangin Soeumin or Taeyangin. Methods : There were 1,229 patients (529 men), who answered the questionnaire about their ordinary sleeping patterns. They were diagnosed, including their clinical Sasang Constitution, by the Sasang Constitution specialist at Bundang Oriental Hospital of Dongguk University. By applying the multinomial and binary logistic regression analysis to those collected materials, we can measure the characteristics and the influence of ordinary sleeping patterns to the dependent variable (Sasang Constitution). Results : In order of the item's influence that had decided one's constitution, between Taeumin and Soeumin, Taeumin snored frequently or well more than Soeumin, Soeumin had more dreams and more sleeping times than Taeumin, and Taeumin struggled frequently or well more than Soeumin. Between Soyangin and Soeumin, Soeumin dreams more frequently than Soyangin, Soyangin snored frequently or well more than Soeumin, and Soeumin has more sleeping times than Taeumin. Between Taeumin and Soyangin, Taeumin snored frequently or well more than Soyangin. Between Taeyangin and a group of the other constitutions, Taeyangin felt unwell after sleeping more than the other constitutions, the other constitutions awaked frequently more than Taeyangin during sleeping. Conclusion : This study will be used for identifying patients as Taeumin, Soyangin, Soeumin or Taeyangin by contrast with each other.
To examine whether HSV, VZV, H. pylori and Candida that are known to be microorganisms causing ulcerative disease in oral cavity and have the relatively high contigiousness are detected in saliva of patients with RAU and related to the development with RAU, PCR and culture were performed on the saliva of 29 patients with RAU and 29 control subjects who visited the Department of Oral Medicine, Dental Hospital, Chosun University. The results were obtained as follows; 1. HSV DNA was detected in 41.4% patients with RAU, and 55.2% control subjects, however, a significant difference between the two groups was not detected, (P>0.05), and VZV DNA was not detected in both groups. 2. H. pylori DNA was detected in 27.6% patients with RAU, and 48.3% control subjects, however, a significant difference between the two groups was not detected (P>0.05). 3. Candida was cultured in 13.8% patients with RAU, and 6.9% control subjects, however, a significant difference between the two groups was not detected (P>0.05). This results suggest that HSV, VZV, H. pylori and Candida can not be regarded to play a direct role in the development of RAU. Thus it is considered that in future, on a larger sample, also, it has to be examined whether other microorganisms acts as a trigger factor of the development of RAU.
In order to search for anti-Herpes simplex virus (HSV) type-1 agents from Korean medicinal herbs and Korean traditional prescriptions (herb complexes), we selected 80 medicinal herbs and 45 prescriptions, based on a review of the Korean traditional medicine books. Both methanol extracts and boiling-water extracts were tested by means of the MTT assay (tetrazolium based colorimetric assay). Ten of the 125 methanol extracts: CM-11, CM-18, CM-19, CM-21, CM-22, CM-39, MM-3, MM-18, MM-29, MM-73 (see explanation of nomenclature below), showed efficacy against HSV-1. Twelve of the water extracts: CW-2, CW-3-I, CW-3-II, CW-18, MW-3, MW-5 MW-6, MW-12, MW-47, MW-69, MW-73 and MW-79 were active. #3 (individual herb) and #73 (individual herb) were interesting because both water and methanol extracts were active. Especially, #3 is a part of composition of Hong-il-$laksamd{\check{u}}ngbang$ and Hojanghaedokt'ang which have anti-HSV-1 activitives. The SI value of MW-69 and CW-18 was relative high as $10.2{\pm}0.7$ and $11.8{\pm}2.2$. The cytotoxic effect on Vera cells of $Panch'{\check{o}}nch'onch'{\check{o}}ngbang$, Taraxacum platycarpum H. Dahlst. and acycloguanosine was determined by MTT assay. Water extracts of $Panch'{\check{o}}nch'onch'{\check{o}}ngbang$ (prescription) and Taraxacum platycarpum H. Dahlst. showed very weak cytotoxic effects on Vero cells at > $100\;{\mu}g/ml$ but acycloguanosine showed strang cytotoxic effects on Vera cells at > $100\;{\mu}g/ml$. As a result, #3, #73, MW-69 and CW-18 are considered as potentially useful for anti-HSV-1 agent and will be the focus of further research. Abbreviations: CM - methanol extracts of traditional prescriptions; CW - water extracts of traditional prescriptions; MM - methanol extracts of individual herbs; MW - water extracts of individual herbs.
Uyangaa, Erdenebileg;Choi, Jin Young;Ryu, Hyung Won;Oh, Sei-Ryang;Eo, Seong Kug
IMMUNE NETWORK
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v.15
no.2
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pp.91-99
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2015
Herpes simplex virus (HSV) is a common causative agent of genital ulceration and can lead to subsequent neurological disease in some cases. Here, using a genital infection model, we tested the efficacy of vinegar-processed flos of Daphne genkwa (vp-genkwa) to modulate vaginal inflammation caused by HSV-1 infection. Our data revealed that treatment with optimal doses of vp-genkwa after, but not before, HSV-1 infection provided enhanced resistance against HSV-1 infection, as corroborated by reduced mortality and clinical signs. Consistent with these results, treatment with vp-genkwa after HSV-1 infection reduced viral replication in the vaginal tract. Furthermore, somewhat intriguingly, treatment of vp-genkwa after HSV-1 infection increased the frequency and absolute number of $CD3^-NK1.1^+NKp46^+$ natural killer (NK) cells producing interferon (IFN)-${\gamma}$ and granyzme B, which indicates that vp-genkwa treatment induces the activation of NK cells. Supportively, secreted IFN-${\gamma}$ was detected at an increased level in vaginal lavages of mice treated with vp-genkwa after HSV-1 infection. These results indicate that enhanced resistance to HSV-1 infection by treatment with vp-genkwa is associated with NK cell activation. Therefore, our data provide a valuable insight into the use of vp-genkwa to control clinical severity in HSV infection through NK cell activation.
To establish in vivo antiviral evaluation system by using murine herpesvirus intracerebral infection model, 5-6 female BALB/c mice per group aged 5 weeks were inoculated i.c. into cerebrum with different inocular HSV-1 F. Signs of clinical disease noted everyday for one month. Observed were body weight decrease, neurological signs and death caused by encephalitis. Mice discontinued body weight decrease were recovered from the disease, and keratitis was often observed during recovery. The groups inoculated with higher than 1,000 PFU showed 100% mortaltiy and $LD_{50}$ was <100 PFU/mouse. To study the effect of virus inoculum sizes on antiviral effect of acyclovir (ACV), mice inoculated with different inocula were administered i.p. with different doses of ACV immediately after infection, and twice a day for 5 days. The higher inculum size, the less protective. $ED_{50}$ of ACV was >25, >25, 18.4 and 8.0 mg/kg b.i.d. in the group infected with 1,000,000, 100,000, 10,000 and 1,000 PFU/mouse, respectively. $LD_{50}$ of ACV was 62.5 mg/kg b.i.d. Therapeutic index of ACV was <2.5, <2.5, 3.0 and 7.0 in the groups with inocula 1,000,000, 100,000, 10,000 and 1,000 PFU/mouse, respectively. Inoculum size 1,000 PFU/mouse showing 100% mortaltiy and 5-6 days mean time to death, 5 days drug administration and 14 days observation will be future experimental conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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