Generation of myelination with neural cell cultures in rats and suppression of myelination by infection of sindbis virus

쥐의 신경세포 배양에 의한 수초 발생과 sindbis 바이러스 감염에 의한 수초 억제

  • Sa, Young-Hee (Department of Anesthesiology and Pain Medicine, Yonsei University College of Medicine) ;
  • Kim, Hyun Joo (Department of Anesthesiology and Pain Medicine, Yonsei University College of Medicine) ;
  • Lee, Bae Hwan (Department of Physiology, Yonsei University College of Medicine) ;
  • Hong, Seong-Karp (Division of Bio and Health Sciences, Mokwon University)
  • 사영희 (연세대학교 의과대학교 마취통증학과) ;
  • 김현주 (연세대학교 의과대학교 마취통증학과) ;
  • 이배환 (연세대학교 의과대학교 생리학실) ;
  • 홍성갑 (목원대학교 바이오건강학부)
  • Published : 2019.05.23

Abstract

The dorsal root ganglion (DRG) was isolated from mouse embryos and Schwann cells and neuronal cells were cultured in vitro. The neurons and Schwann cells were cultured separately and the two kinds of cells were cultured together for three weeks. Generation of myelination was confirmed by transmission electron microscope and confocal microscope using a myelinaion protein, myelin protein zero (MPZ) antibody. The sindbis virus was infected for three days in the myelinated culture cells and then demyelination was carried out. The process of demyelination was also confirmed by transmission electron microscopy and confocal microscopy using myelin protein zero (MPZ) antibody. The study was supported by a Basic Research Program through the National Research Foundation (NRF) funded by the Ministry of Science and Technology, ICT and Future Plans (NRF-2016R1A2B4016552 and 2017R1A2B3005753).

본 연구는 뉴런 세포와 슈반 세포의 공동 배양에 의한 수초화 발생 과정과 herpes simplex virus-1 감염에 의한 탈수초화 발생과정을 전자 현미경과 분자생물학적 분석에 의하여 확인하고자 하였다. 쥐의 배아로부터 후근신경절(dorsal root ganglion, DRG)을 분리하여 슈반(Schwann) 세포와 뉴런 세포(neuronal cell)를 in vitro에서 각각 배양하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 뉴런세포와 정제된 슈반 세포를 함께 공동 배양을 하여 수초화를 발생시켰다. 이렇게 수초화된 공동 배양 세포에 herpes simplex virus-1를 감염시켜 탈수초화를 진행시켰다. 수초 형성의 존재를 의미하는 myelin protein zero(MPZ) 항체를 사용하고 전자 현미경을 이용하여 수초 발생 및 탈수초화 과정을 관찰하였다. 이 연구는 과학 기술부, ICT 및 미래 계획 (NRF-2016R1A2B4016552 및 2017R1A2B3005753)이 자금을 지원하는 국립 연구 재단 (NRF)을 통한 기초 연구 프로그램의 지원을 받았다.

Keywords