• 생명과학회지
• /
• 제23권2호
• /
• pp.175-181
• /
• 2013

우리나라에서 A형 간염바이러스는 IA 유전자형이 주된 양상이었으나 최근 일부 다른 유전자형이 점차 늘어나는 보고들이 발표되고 있다. 따라서 본 연구의 목적은 최근 우리나라에서 유행한 A형 간염의 바이러스 유전자형을 분석하고자 하였다. 2010년 4월에서 2011년 4월까지 광주광역시에 위치한 K 병원에 입원한 급성 A형 간염환자 20명의 검체와 서울에 위치한 S 검사센터에 의뢰된 Anti-HAV IgM 양성인 36개의 검체를 대상으로 하여 검사를 실시하였다. 또한 Anti-HAV IgM 양성인 56개의 검체인 serum에서 RNA를 분리한 후 VP1/P2A junction 부위에 대해서 RT-PCR을 통하여 증폭 한 후 염기서열을 분석하여 기존의 발표된 유전자형과 비교하였다. 유전자형 분석결과 바이러스가 분리된 50명에서 4명(8%)은 IA 유전자형을, 46명(92%)은 IIIA 유전자형을 보였다. 이번 연구를 통하여 우리나라에서 발생한 A형 간염환자의 유전자형 분석에서 과거와는 달리 IA 유전자형이 아닌 IIIA 유전자형으로 변하였다는 것을 확인 할 수 있었다.

• BMB Reports
• /
• 제38권4호
• /
• pp.399-406
• /
• 2005

A sensitive method for detection of Hepatitis A virus (HAV) by utilizing gold-DNA probe on an array was developed. Amino- modified oligodeoxynucleotides at the 5' position were arrayed on an activated glass surface to function as capture probes. Sandwich hybridization occurred among capture probes, the HAV amplicon, and gold nanoparticle-supported oligonucleotide probes. After a silver enhancement step, signals were detected by a standard flatbed scanner or just by naked eyes. As little as 100 fM of HAV amplicon could be detected on the array. Therefore, the array technology is an alternative to be applied in detection of HAV due to its low-cost and high-sensitivity.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
• /
• 제4권2호
• /
• pp.191-198
• /
• 2001

목적: 건강한 소아를 대상으로 혈청에서 H. pylori와 HAV에 대한 IgG 항체가를 동시에 측정하여 연령에 따른 항체 양성률과 두 감염의 혈청학적 양성률의 일치성 여부를 조사하고자 본 연구를 시행하였다. 방법: 1998년 1월부터 1999년 12월까지 전남대학교병원 소아과에 내원한 환아중 상부 위장관 질환을 의심할만한 증상을 호소하지 않고, HAV 예방접종을 받지 않았으며 간 질환을 앓은 기왕력이 없는 건강한 소아 315명을 대상으로 하였다. H. pylori에 대한 IgG 항체가는 대상 소아 315명 모두에서 측정하였고, HAV에 대한 IgG 항체가는 대상 소아중 215명에서 측정하였다. H. pylori에 대한 IgG 항체 측정은 효소 면역법을 이용하여 측정하였으며, HAV에 대한 IgG 항체는 competitive radio-immunoasay로 측정하였다. 결과: H. pylori에 대한 IgG 항체의 양성률은 1세 미만에서 21.2%, 1~3세는 9.2%, 4~6세는 8.9%, 7~9세는 26.7%, 10~12세는 38.7%, 13세 이상에서는 37.0%로 대상 소아 315명 중 55명(17.5%)에서 양성을 보였으며 연령이 증가함에 따라 의의 있게(p<0.05) 증가하였다. HAV에 대한 혈청 IgG 항체의 양성률은 1세 미만이 66.1%, 1~3세는 21.8%, 4~6세는 10.9%, 7-9세는 10.0%, 10~12세는 9.5%, 13세 이상은 41.2%로 대상 소아 215명 중 65명(30.2%)에서 양성을 보였고, 연령이 증가함에 따라 양성률이 의의 있게(p<0.05) 증가하였다. H. pylori와 HAV에 대한 IgG 항체가 모두 양성인 경우는 9.8%, 모두 음성인 경우는 62.8%, H. pylori에 대해서만 양성인 경우는 7.0%, HAV에 대해서만 양성인 경우는 20.5%이었다. H. pylori와 HAV 감염 사이에 항체 양성률과 음성률에 있어 카파(${\kappa}$) 값은 0.26이었다. 결론: H. pylori와 HAV에 대한 항체는 연령이 증가함에 따라 항체의 양성률도 증가하였고, 두 감염에 대한 혈청 IgG 항체의 양성과 음성사이에 약간의 일치성을 보여 두 감염의 전파 양식에 약간의 유사성이 있음을 보였다.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
• /
• 제14권1호
• /
• pp.59-66
• /
• 2011

목 적: 본 저자들은 급성 A형 간염 환아에서 EBV의 재활성화가 증가하였고 EBV의 재활성화가 A형 간염의 경과에 영향을 미치는 지 보고한 바 있으나 과거 연구의 한계를 극복하고자 중합효소연쇄반응을 시행하여 EBV의 재활성화가 확인된 급성 A형 간염 환아들의 임상경과를 분석하기로 하였다. 방 법: 과거 연구와 동일한 대상으로 2008년부터 2010년까지 세브란스병원에서 급성 A형 간염으로 진단받은 19세 이하의 환자 중 EBV PCR을 추가로 시행한 34명으로 제한하여 입원 당시의 나이, 성별, 간염으로부터 완전히 회복될 때까지 걸린 기간, 혈청검사 결과, 초음파검사 결과를 조사하였다. 대상 환아를 EBV의 비활성화군과 재활성화군으로 나누어 결과를 비교 하였고 10세를 기준으로 환아를 나누어 비활성화군과 재활성화군을 비교하였으며 이번 연구 결과와 과거연구 결과에서 유의하게 나온 항목을 비교분석하였다. 결 과: 재활성화된 비율은 35.3%였고 비활성화군과 재활성화군을 비교하였을 때 AST (p=0.001), ALT (p<0.001), AST/ALT ratio (p=0.002), 이환 기간 중의 최소 단백량(p<0.001), 이환 기간 중의 최소 알부민(p<0.001), 비정형림프구의 백분율(p=0.001), PT-INR (p<0.001), 간염회복기간(p<0.001), 비장비대(p<0.001)가 통계적으로 유의한 차이를 보였고 10세 미만에 비해 10세 이상의 환아에서 EBV가 재활성화 되었을 때 임상양상이 더 좋지 않았다. 지난 연구결과와 비교하였을 때 최소 혈청 단백농도(p<0.001)가 추가로 유의하였으며 10세 미만의 환아군에서 PT-INR의 차이가 사라지고 10세 이상의 환아군에서 최소 혈청 단백농도가 추가로 유의한 결과를 보였다. 결 론: 중합효소연쇄반응을 이용한 본 연구에서도 급성 A형 간염 환아에서 EBV의 재활성화가 흔하며 간염의 경과에 좋지 않은 영향을 미치고 나이가 많은 환아에서 더 좋지 않은 영향을 미치는 것으로 확인할 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제18권7호
• /
• pp.1317-1325
• /
• 2008

Viral safety is an important prerequisite for clinical preparations of plasma-derived pharmaceuticals. One potential way to increase the safety of therapeutic biological products is the use of a virus-retentive filter. In order to increase the viral safety of human antihemophilic factor IX, particularly in regard to non-enveloped viruses, a virus removal process using a polyvinylidene fluoride membrane filter (Viresolve NFP) has been optimized. The most critical factor affecting the filtration efficiency was operating pH and the optimum pH was 6 or 7. Flow rate increased with increasing operating pressure and temperature. Recovery yield in the optimized production-scale process was 96%. No substantial changes were observed in the physical and biochemical characteristics of the filtered factor IX in comparison with those before filtration. A 47-mm disk membrane filter was used to simulate the process performance of the production-scale cartridges and to test if it could remove several experimental model viruses for human pathogenic viruses, including human hepatitis A virus (HAV), porcine parvovirus (PPV), murine encephalomyocarditis virus (EMCV), human immunodeficiency virus type 1 (HIV), bovine viral diarrhea virus (BVDV), and bovine herpes virus (BHV). Non-enveloped viruses (HAV, PPV, and EMCV) as well as enveloped viruses (HIV, BVDV, and BHV) were completely removed during filtration. The log reduction factors achieved were $\geq$6.12 for HAV, $\geq$4.28 for PPV, $\geq$5.33 for EMCV, $\geq$5.51 for HIV, $\geq$5.17 for BVDV, and $\geq$5.75 for BHV. These results indicate that the virus filtration process successfully improved the viral safety of factor IX.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제37권4호
• /
• pp.377-382
• /
• 2009

사람과 동물 유래의 혈장, 세포, 조직 등을 이용하여 생물의약품을 생산하기 위해서는 바이러스 안전성 확보가 필수적이다. 바이러스 안전성 보증을 위해 생물의약품 제조공정은 바이러스 불활화/제거 단계를 포함하여야 한다. 짧은 파장자외선(UVC) 조사는 바이러스 불활화 효과가 매우 높은 것으로 알려졌지만, UVC 조사로 인한 단백질의 변성과 대상 물질에 동일하게 조사를 할 수 있는 기계적 장치 개발의 어려움으로 인해 UVC 조사는 생물의약품 제조 공정에 사용되지 못했다. 최근에 이러한 결점을 해결한 연속 유동 UVC 반응기(UVivatec)가 개발되었다. UVivatec의 바이러스 불활화 효과 및 단백질 회수율을 검증하기 위해 단백질 의약품을 대상으로 적용가능성을 조사하였다. 최적화된 $3,000\;J/m^2$ 조사 공정에서 단백질의 회수율은 98%이상이었다. UVC 조사에 의한 human immunodeficiency virus(HIV), hepatitis A virus(HAV), bovine herpes virus(BHV), bovine viral diarrhea virus(BVDV), porcine parvovirus(PPV), bovine parvovirus(BPV), minute virus of mice(MVM), reovirus type 3(REO), bovine parainfluenza virus type 3(BPIV) 불활화 효과를 평가하였다. HAV, PPV, BPV, MVM, REO와 같은 비외피(nonenvelope) 바이러스는 $3,000\;J/m^2$ 조사량에 의해 검출한계 이하로 완벽하게 불활화되었다. HIV, BVDV, BPIV 같은 외피(envelope) 바이러스도 $3,000\;J/m^2$ 조사량에 의해 검출한계 이하로 완벽하게 불활화되었다. 또한 BHV도 매우 민감하게 불활화되었다. UVC 조사에 의한 각 바이러스들의 로그 감소율은 HIV는 ${\geq}3.89$, HAV는 ${\geq}5.27$, BHV는 5.29, BVDV는 ${\geq}5.96$, PPV는 ${\geq}4.37$, BPV는 ${\geq}3.55$, MVM은 ${\geq}3.51$, REO는 ${\geq}4.20$, BPIV는 ${\geq}4.15$이었다. 이와 같은 결과에서 UVivatec을 이용한 UVC 조사는 바이러스 불활화에 매우 효과적인 방법임을 확인하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제38권2호
• /
• pp.168-176
• /
• 2010

사체 피부에서 면역반응을 일으킬 수 있는 세포들을 제거한 무세포 진피는 다양한 의료용 소재로 사용되고 있다. Trin-butyl phospahate(TnBP)와 deoxycholic acids를 세포제거 용액으로 사용하여 피부조직 내 진피층의 3차원적 구조를 손상시키지 않고 다양한 구조 단백질 및 성분들을 유지한 상태에서 면역반응의 대상인 세포성 항원만을 선별적으로 제거한 이식용 동종 무세포 진피인 $SureDerm^{TM}$을 개발하였다. $SureDerm^{TM}$ 제조공정은 감염성 위해인자 불활화 공정으로 70% 에탄올 처리와 산화에틸렌 가스 처리 공정을 포함하고 있다. 본 연구에서는 SureDermTM 제조공정 중 70% 에탄올 소독 공정, 세포제거용액(0.1% TnBP와 2% deoxycholic acids) 처리 공정, 산화에틸렌 가스 멸균의 바이러스 불활화 효과를 검증하기 위해 국제적 가이드에 따라 5종의 바이러스 [human immunodeficiency virus type 1(HIV-1), bovine herpes virus(BHV), Bovine viral diarrhoea virus(BVDV), hepatitis A virus(HAV), porcine parvovirus(PPV)]를 생물학적 지표로 사용하였다. 피부조직에 각 생물학적 지표를 첨가한 후 불활화 공정을 실시한 다음 각 바이러스를 회수하여 정량한 후 불활화 정도를 비교하였다. 70% 에탄올 20분처리 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV 같은 외피 바이러스는 처리 시간 2.5분 안에 불활화되었지만, HAV와 PPV 같은 비-외피 바이러스는 에탄올에 저항성을 나타내어 20분 처리 후 log 바이러스 감소인수가 각각 1.85와 1.15였다. 세포제거용액 처리 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV는 각각 5분, 30분, 5분 안에 검출한계 이하로 불활화되었다. 산화에틸렌 가스처리에 의해 본 연구에 사용한 모든 바이러스가 검출한계 이하로 불활화되었다. 3가지 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV, HAV, PPV에 대한 log 바이러스 감소인수 합은 각각 $\geq12.71$, $\geq18.08$, $\geq14.92$, $\geq6.57$, $\geq7.18$이었다. 이와 같은 결과에서 $SureDerm^{TM}$ 제조공정은 바이러스 안전성을 보증할 수 있는 충분한 바이러스 불활화 능력을 갖고 있는 것으로 판단된다.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
• /
• 제15권2호
• /
• pp.91-99
• /
• 2012

Purpose: The aims of this study was to compare and evaluate the clinical characteristics, laboratory data, and prognosis for infants under age 1 year with CMV hepatitis and those with viral hepatitis of unknown etiology. Methods: A retrospective study was conducted of infants under age 1 year who were admitted with acute hepatitis. The exclusion criteria consisted of: autoimmune, genetic, metabolic, toxic, HAV, HBV, HCV, toxoplasma, rubella, herpes simplex, and Epstein-Barr virus. The 30 patients included were divided into two groups based on markers for CMV (IgM anti-CMV, CMV PCR in urine, CMV culture in urine). Results: The median age of patients (n=15) was 2.8 months. No other organ involvement was detected in any patient. Peak serum total bilirubin levels (n=4) ranged from 2.6 to 6.7 mg/dL. Peak serum ALT levels ranged from 51 to 1,581 IU/L. The duration of ALT elevation ranged from 1.5 weeks to 26 weeks (median 9 weeks). All had recovered in full without ganciclovir; there were no cases of hearing loss. The median age of controls (n=15) was 2.5 months. Peak serum total bilirubin levels (n=4) ranged from 1.6 to 9.1 mg/dL. Peak serum ALT levels ranged from 26 to 1,794 IU/L. No significant differences were observed between both groups regarding the peak serum ALT levels, peak serum total bilirubin levels, duration of hyperbilirubinemia and ALT elevation. Conclusion: Although it was not possible to differentiate congenital infection with perinatal infection in this study, the prognosis of patients with CMV hepatitis without other organ involvement was good without ganciclovir treatment.

• 생명과학회지
• /
• 제12권1호
• /
• pp.49-54
• /
• 2002

굴 소비자의 보호를 위해서는 매우 민감하고 특이적으로 바이러스를 모니터링할 수 있는 신속진단법의 개발이 필수적이다. 굴 조직은 흔히 비교적 소량의 바이러스와 검출단계를 방해할 수 있는 다른 물질들을 함께 함유한다. 따라서 굴으로부터 바이러스의 검출에서 가장 중요한 과정은 시료의 가공단계이다. 본 연구에 의하면 한번의 sucrose 구배 초원심분리에 의하여 10%와 50% 사이에서 소량의 바이러스를 분리할 수 있음을 제시하였다. 우리는 두 종류의 primer 세트를 이용하여 HAV와 poliovirus를 동시에 굴 조직으로부터 검출할 수 있었다. 또한, 이 방법은 높은(>95%) 바이러스 회수율을 나타내었다. 이 방법은 24시간이내에 5 g의 굴조직으로부터 2 pfu의 HAV를 검출할 수 있을 정도로 신속하고 민감한 검사법이다.

• Pediatric Infection and Vaccine
• /
• 제4권2호
• /
• pp.232-239
• /
• 1997

목 적 : 최근 20년간 경제적인 발전으로 생활 환경과 위생 상태가 향상되면서 소아에서 A형 간염 바이러스 감염이 급격히 감소하였다. 이러한 항체 보유율의 감소 추세는 청장년층의 현증 A형 간염의 위험성을 시사하며, 성인에서 고위험군의 예방접종과 함께 소아 예방접종의 필요성이 대두되었다. 본 연구는 소아 및 청소년을 대상으로 A형 간염 항체 보유율과 자연 감염률을 조사하여 이 연령층에서 A형 간염 바이러스 감염 실태 및 예방에 대한 기초 자료를 얻고자 시행하였다. 방 법 : 경기도에 거주하는 20세 미만의 소아 및 청소년 334명을 대상으로 A형 간염 항체를 검사하여 연령별 항체 보유율을 조사하였으며, 경기도 소재 4개군(양평, 김포, 파주, 화성)과 4 개시(구리, 수원, 부천, 의정부) 초등학교 학생 584명을 대상으로 1993 년에 수집한 혈청과 1996년에 수집한 동일인의 혈청을 가지고 A형 간염 항체의 자연 양전률을 조사하였다. 결 과 : 1) 경기도에 거주하는 20세 미만 334명의 검사 대상자 중 A형 간염 항체 양성은 5.4%였다. 연령별 항체 보유율은 1 세 미만이 27.3%(3/11), 1~4세가 0.0%(0/81), 5~9세가 0.0%(0/57), 10~14세가 2.9%(3/105), 15~19세가 15.0%(12/80)로 조사되었다. 2) 경기도 소재 8개 초등학생 584명을 대상으로 A형 간염 항체의 추적 검사를 시행하였다. 1993년에 1명(0.2%)이 양성이었고 1996년에는 다른 3명(0.5%)이 양성으로 나타나, A형 간염 자연 항체 양전률은 0.5%(3/583)였다. 자연 항체 소실률은 0.2%(1/584)로 조사되었다. 3) 본 연구의 A형 간염 항체 보유율을 1979년과 1989년 조사와 비교하였다. 20세 미만에서 A형 간염 항체 보유율은 1979년에 63.8%, 1989년에 47.3%였으나 1996년에는 5.4%로 감소하였다. 결 론 : 소아에서 A형 간염 항체의 자연 획득이 거의 일어나지 않는 상황에서는 성인의 현성 감염이 증가할 가능성이 있다. 따라서 우선적으로 A 형 간염의 위험성이 높은 지역으로의 여행이나 기타 고위험군을 대상으로 예방접종을 시행할 필요성이 있으며 성인에서의 HAV 감염 기회를 줄이기 위한 방법으로 소아에서의 선별 예방접종도 고려해야 할 것으로 생각된다.