Park, Si-Hyang;Moon, Sung-Sil;Xie, Cheng-Liang;Choung, Se-Young;Choi, Yeung-Joon
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.8
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pp.1166-1173
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2014
This study investigated the detoxification effects of enzymatic hydrolysate from oyster on acetaminophen-induced toxicity using HepG-2 cells. Oyster hydrolysate was made with 1% Protamex and 1% Neutrase after treatment with transglutaminase (TGPN) or without (PN). Two types of oyster hydrolysate were added to human-derived HepG-2 hepatocytes damaged by acetaminophen, after which the survival rate of HepG-2 cell was measured. In addition, glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic pyruvic transaminase (GPT) activities in the culture media were evaluated. The survival rates of HepG-2 cells were $136.2{\pm}1.4%$ at $100{\mu}g/mL$ of TGPN and $179.6{\pm}3.8%$ at $200{\mu}g/mL$ of TGPN. These cell survival rates were higher compared to that of the negative control group ($60.7{\pm}3.2%$) treated only with acetaminophen. GOT activity was $38.3{\pm}0.2$ Karmen/mL in the negative control group, whereas it was $19.9{\pm}0.5$ for TGPN ($200{\mu}g/mL$) and $22.0{\pm}2.4$ Karmen/mL for PN ($200{\mu}g/mL$). GOT and GTP activities were shown to be dependent on TGPN concentration, and significant reduction in activities could be conformed. The detoxification efficacy of TGPN was higher compared to that of PN. These results suggest that oyster hydrolysate has potential as a healthy food or pro-drug for liver protection.
Objectives : This study was performed for the investigation of anticancer effects of methanol extract of Rheum Rhizoma (MeOH-RR) on a human liver cancer cell line (HepG2). Methods : To study the cytotoxic effect of MeOH-RR on HepG2 cells, the cell viability was determined by XTT reduction method and trypan blue exclusion assay. The cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP), a substrate for caspase-3 and a typical sign of apoptosis, and the activation of procaspase-3, -8 and -9 were examined by western blot analysis. Furthermore, MeOH-RR-induced apoptosis was confirmed by DNA fragmentation. The release of cytochrome c from mitochondria to cytosol, the level of Bcl-2 and Bax were examined by western blot analysis. Results : MeOH-RR reduced proliferation of HepG2 cells in a dose-dependent manner at 24 h and 48 h treatment. MeOH-RR induced the activation of caspase-3, -8, and -9 and the cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP), a substrate for caspase-3. Furthermore, treatment with MeOH-RR resulted in internucleosomal DNA fragmentation, evidenced by the formation of a DNA ladder on agarose gel, a hallmark of cells undergoing apoptosis. MeOH-RR downregulated Bcl-2, upregulated Bax, and increased the release of cytochrome c from the mitochondria into cytosol in a dose-dependent manner. Moreover, MeOH-RP increased caspase-3 activity. Conclusion : There results suggest that MeOH-RR induce apoptosis via mitochondrial pathway and caspase-3-dependent pathway in HepG2 cells. There results suggest that MeOH-RR is potentially useful as a chemotherapeutic agent in human liver cancer.
The nucleoside analogue, L-FMAUS was synthesized from L-FMAU which has been shown to have significant antiviral acitivity against hepatitis B virus (HBV). The anti-HBV activity and toxicity of the L-FMAUS were examined by a cell culture system using a hepatitis B virus (HBV) producing cell line, HepG2 2.2.15. L-FMAUS was assayed for the inhibition of HBV multiplication by measurement of HBV DNA and surface antigen (HBsAg) levels in the extracellular medium of HepG2 2.2.15 cells after an 8-day treatment. (omitted)
Kim, Young-Chul;Lee, Jang-Hoon;Woo, Hong-Jung;Yi, Jong-Hoon
The Journal of Internal Korean Medicine
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v.21
no.3
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pp.363-368
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2000
Objective : This study was carried out to examine the effect of five fractions of an aqueous extract from Artemisia capillaris $T_{HUNB}$. Methods : The queous extract from Artemisia capillaris $T_{HUNB}$. was fractionized into 5 kinds of material. We observed the effect of each fractions on etoposide-induced apoptosis, cell viability, cell cycle progression and mRNA expression of apoptosis-related genes in human hepatocyte cell line HepG2. Results and Conclusions : The data shows that butanol fraction of Artemisia capillaris $T_{HUNB}$. has no relation with cell cycle, however, it inhibits apoptosis significantly and the action may be due to the suppression of Fas and Sax genes and activation of Bcl-2 gene.
An OTHBVS cell line from HepG2 was established. This cell line stably expresses the human hepatitis B virus (HBV) middle S protein that includes the preS2 region which is important for HBV particle entry into the hepatocyte. To establish this cell line, the middle S open reading frame (ORF), with a promoter located in the 5' region and enhancer located in the 3' region, was cloned downstream from the metallothionine (MT) promoter of the OT1529 vector. In this vector, expression of the middle S protein was constructed to be regulated by its own promoter and enhancer. Expression of the large S protein which contains the preS1 region in addition to the middle S protein was designed to be regulated by the MT promoter. When extracts of OTHBVS cells were examined with an S protein detection kit (RPHA, Korea Green Cross Co.), an S protein was detected. Total mRNA of OTHBVS cell examined by northern blot analysis with an S ORF probe revealed small/middle S transcripts (2.1 kb). When the MT promoter was induced by Zn, large S transcripts (2.4 kb) were detected. The GP36 and GP33 middle S proteins were presumably detected, but large S proteins were not detected by immunostain analysis using anti-preS2 antibody.
Park, Jung-Sun;Kim, Yoon-Jung;Park, Sam Young;Chung, Kyung-Yi;Oh, Sang-Jin;Kim, Won-Jae;Jung, Ji-Yeon
International Journal of Oral Biology
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v.45
no.4
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pp.169-178
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2020
L-ascorbic acid (L-AA; vitamin C) induces apoptosis in cancer cells. This study aimed to elucidate the molecular mechanisms of L-AA-induced apoptosis in human laryngeal epidermoid carcinoma Hep-2 cells. L-AA suppressed the viability of Hep-2 cells and induced apoptosis, as shown by the cleavage and condensation of nuclear chromatin and increased number of Annexin V-positive cells. L-AA decreased Bcl-2 protein expression but upregulated Bax protein levels. In addition, cytochrome c release from the mitochondria into the cytosol and activation of caspase-9, -8, and -3 were enhanced by L-AA treatment. Furthermore, apoptosis-inducing factor (AIF) and endonuclease G (EndoG) were translocated into the nucleus during apoptosis of L-AA-treated Hep-2 cells. L-AA effectively inhibited the constitutive nuclear factor-κB (NF-κB) activation and attenuated the nuclear expression of the p65 subunit of NF-κB. Interestingly, L-AA treatment of Hep-2 cells markedly activated Akt and mitogen-activated protein kinase (MAPK; extracellular signal-regulated kinase 1/2, p38, and c-Jun N-terminal kinase [JNK]) and and LY294002 (Akt inhibitor), SB203580 (p38 inhibitor) or SP600125 (a JNK inhibitor) decreased the levels of Annexin V-positive cells. These results suggested that L-AA induces the apoptosis of Hep-2 cells via the nuclear translocation of AIF and EndoG by modulating the Bcl-2 family and MAPK/Akt signaling pathways.
A human hepatoma cell line, Hep G2 cells, is reliable for the study of alcohol-induced hepatotoxicity. The aim of this study is to determine the relationship between TNF-${\alpha}$, IL-$1{\alpha}$ production and EtOH-induced cytotoxicity on Hep G2 cells. The cells were incubated with EtOH in the presence of Artemisia Capillaris Herba(AC) for 24 hours and in the absence of AC for 48 hours. Cytoviability and cytokines release were analyzed by MTT assay and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), respectively. After 24 hours of EtOH exposure, the cytoviability had markedly decreased, and the release of cytokines had increased. The increased amount of cytokines contributed to EtOH-induced cytotoxicity. Anti-TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\alpha}$ antibodies almost abolished it. Interestingly, EtOH-induced cytotoxicity and cytokines production were inhibited by AC. Moreover, when AC was used in combination with antibodies, there was a marked inhibition of EtOH-induced cytotoxicity. These results suggest that EtOH-induced cytotoxicity may regulate, by various factors, and AC may prevent the cytotoxicity through partial inhibition of the $TNF-{\alpha}$ and IL-$1{\alpha}$ secretion.
Objective: The study aim was to prepare poly-DL-lactide-poly (PELA) microspheres encapsulating recombinant tissue inhibitors of metalloproteinase-1 (TIMP-1) in an adenovirus to investigate its inhibition on the proliferation of hepatocellular carcinoma cells HepG2. Methods: Microspheres were prepared by encapsulating the recombinant TIMP-1 adenovirus into biodegradable PELA. The particle size, viral load, encapsulation efficiency and in-vitro release were measured. Microspheres were used to infect HepG2 cells, then infection efficiency was examined under a fluorescent microscope and ultrastructural changes assessed by TEM. Expression of TIMP-1 mRNA in HepG2 cells was examined by semi-quantitative RT-PCR and proliferation by MTT and cell growth curve assays. Results: We successfully prepared microspheres encapsulating recombinant TIMP-1 adenovirus with a diameter of $1.965{\mu}m$, an encapsulation efficiency of 60.0%, a viral load of $10.5{\times}10^8/mg$ and approximate 60% of virus release within 120 h, the total releasing time of which was longer than 240 h. The microspheres were confirmed to be non-toxic with blank microspheres. Infected HepG2 cells could stably maintain in-vitro expression of TIMP-1, with significantly effects on biological behaviour Conclusion: PELA microspheres encapsulating a recombinant TIMP-1 adenovirus can markedly inhibit the proliferation of HepG2 cells, which provides an experimental basis for polymer/chemistry-based gene therapy of hepatocellular carcinomas.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.19
no.6
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pp.1594-1598
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2005
Scopoletin (6-methoxy-7-hydrorycournarin) is a phenolic coumarin and a member of the phytoalexins. In this study we investigated whether scopoletin causes apoptosis in human hepatoma HepG2 cells and, if so, by what mechanisms. We report that scopoletin induced apoptosis as confirmed by a chromatin condensation. The signal cascade acivated by scopoletin included the activation of caspase-3 as evidenced by increased pretense activity. Activation of caspase-3 resulted in the cleavage of 116 kDa poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) to 85 kDa cleavage product in a dose-dependent fashion. Also, scopoletin-induced apoptotic mechanism of HepG2 cells involved the generation of hydrogen peroxide. Taken together, these results suggest that scopgletin induces hydrogen peroxide generation, which, in turn, causes activation of caspase-3, degradation of PARP, and eventually leads to apoptotic cell death in HepG2 cells.
Kim, Hyun-Young;Hwang, In-Guk;Kim, Tae-Myoung;Kim, Dae-Joong;Park, Dong-Sik;Kim, Jae-Hyun;Lee, Jun-Soo;Jeong, Heon-Sang
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.8
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pp.1107-1112
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2010
This study was conducted to investigate the effect of 70% ethanol and water extract of Korean rough rice ('Ilpum', 'Goami2', 'Keunnun', 'Sulgaeng', 'Baegjinju', and 'Heugkwang') before and after germination on proliferation of human cancer cell lines (HepG2, PC-3, and MCF-7). Antiproliferation effect was higher in ethanol extract than water extract, and was higher in after germination. 'Ilpum' ethanol extract after germination showed higher anti-proliferation effect on HepG2 and PC-3 cell lines than before germination. The cell viability on HepG2 and PC-3 cell lines of 'Ilpum' ethanol extract after germination was 27.23% and 5.05% at 1.0 mg/mL, respectively. The anti-proliferation effect on MCF-7 was the highest in 'Ilpum' and 'Heugkwang' 70% ethanol extract after germination and those cell viabilities were 7.27% and 17.00% at 0.5 mg/mL, respectively. These results suggest that germinated rough rice might have a potentially preventive effect on human cancer cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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