Lee, Joon Ha;Kim, In-Woo;Kim, Mi-Ae;Yun, Eun-Young;Nam, Sung-Hee;Ahn, Mi-Young;Lee, Young Bo;Hwang, Jae Sam
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.31
no.1
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pp.14-19
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2015
In a previous report, we identified several candidate antimicrobial peptides through de novo RNA sequencing of the centipede Scolopendra subspinipes mutilans. Here, we identify and characterize one of these peptides, Scolopendrasin I. We identified the centipede antimicrobial peptide Cecropin from the centipede transcriptome using an SVM algorithm, and subsequently analyzed the amino acid sequence for predicted secondary structure using a GOR algorithm. We identified an alpha helical region of Cecropin and named it Scolopendrasin I. We then assessed antimicrobial and hemolytic activity of Scolopendrasin I. Scolopendrasin I showed antimicrobial activity against various microbes, including antibiotic-resistant Gram-negative bacteria, in a radial diffusion assay. Scolopendrasin I had potent antibacterial activity against acne-associated microbes in a colony count assay and showed no hemolytic activity in a hemolysis assay. In addition, we confirmed that Scolopendrasin I bound to the surface of bacteria via a specific interaction with lipoteichoic acid and lipopolysaccharide, two components of bacterial cell membranes. In conclusion, the results presented here provide evidence that this is an efficient strategy for antimicrobial peptide candidate identification and that Scolopendrasin I has potential for successful antibiotic development.
The bacterial toxin, tolaasin, causes brown blotch disease on the cultivated mushrooms by collapsing fungal and fruiting body structure of mushroom. Cytotoxicity of tolaasin was evaluated by measuring hemolytic activity because tolaasins form membrane pores on the red blood cells and destroy cell structure. While we investigated the inhibitions of hemolytic activity of tolaasin by $Zn^{2+}$ and $Cd^{2+}$, we found that $Ni^{2+}$ is another antagonist to block the toxicity of tolaasin. $Ni^{2+}$ inhibited the tolaasin-induced hemolysis in a dose-dependent manner and its Ki value was $\sim10$ mM, implying that the inhibitory effect of $Ni^{2+}$ is stronger than that of $Cd^{2+}$. The hemolytic activity was completely inhibited by $Ni^{2+}$ at the concentration higher than 50 mM. The effect of $Ni^{2+}$ was reversible since it was removed by the addition of EDTA. When the tolaasin-induced hemolysis was suppressed by the addition of 20 mM $Ni^{2+}$, the subsequent addition of EDIA immediately initiated the hemolysis. Although the mechanism of $Ni^{2+}$ -induced inhibition on tolaasin toxicity is not known, $Ni^{2+}$ could inhibit any of fallowing processes of tolaasin action, membrane binding, molecular multimerization, pore formation, and massive ion transport through the membrane pore. Our results indicate that $Ni^{2+}$ inhibits the pore activity of tolaasin, the last step of the toxic process.
Photobacterium damselae subsp. damselae and 4 Vibrio spp.(V. anguillarum, V. splendidus, V. harveyi and V. ordalii) were isolated from the diseased olive flounders, Paralichthys olivaceus. The isolates were tested on the pathogenicity in vitro. The properties of extracellular products(ECPs) were investigated with enzymatic activities, hemolytic activities toward the sheep and olive flounder erythrocytes, and cytotoxicity activities on the cell-line. And potential signal transduction pathways of the bacterial internalization were detected by using signal transduction inhibitors. P. damselae was high in phospholipase activity, hemolytic activity to olive flounder erythrocytes and cytotoxicity activity. And P. damselae had diversified internalizing pathways as compared to isolated vibrios. Therefore, these activities may be related with pathogenicity of P. damselae.
Our previous work confirmed that Sph2/LA1029 was a sphigomyelinase-like hemolyisn of Leptospira interrogans serogroup Icterohaemorrhagiae serovar Lai. Characteristics of both hemolytic and cytotoxic activities of Sph2 were reported in this paper. Sph2 was a heat-labile neutral hemolysin and had similar hemolytic behavior as the typical sphingomyelinase C of Staphylococcus aureus upon sheep erythrocytes. The cytotoxic activity of Sph2 was shown in mammalian cells such as BALB/C mouse lymphocytes and macrophages, as well as human L-02 liver cells. Transmission electron microscopic observation showed that the Sph2 treated BALB/C mouse lymphocytes were swollen and ruptured with membrane breakage. They also demonstrated condensed chromatin as a high-density area. Cytoskeleton changes were observed via fluorescence confocal microscope in Sph2 treated BALB/C mouse lymphocytes and macrophages, where both cytokine IL-$1{\beta}$ and IL-6 were induced. In addition, typical apoptotic morphological features were observed in Sph2 treated L-02 cells via transmission electron microscope and the percentage of apoptotic cells did increase after the Sph2 treatment detected by flow cytometry. Therefore, Sph2 was likely an apoptosis-inducing factor of human L-02 liver cells.
Kim, Mi-Sun;Shin, Woo-Chang;Kang, Dong-Kyoon;Sohn, Ho-Yong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.1
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pp.61-65
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2016
From the lees of bokbunja wine (LBW) made from Rubus coreanus Miquel, we have identified six compounds (1: trans-4-hydroxycinnamic acid; 2: trans-4-hydroxy-3-methoxycinnamic acid; 3: 3,4-dihydroxycinnamic acid; 4: 4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid; 5: 3,5-dimethoxy-4-hydroxybenzoic acid; and 6: 3,5-dimethoxy-4-hydroxycinnamic acid (sinapic acid)) through silica gel chromatography and UHPLC-MS. The compounds 1-6 showed strong anticoagulation and platelet aggregation inhibitory activities without hemolytic effect against human red blood cells. To date, this is the first report of the in vitro anti-thrombosis activity of sinapic acid. Our results suggest that different cinnamic and benzoic acid derivatives are closely linked to the anti-thrombosis activity of LBW, and sinapic acid could be developed as a promising anti-thrombosis agent.
Toxic peptides from hornet venom, mastoparan and mastoparan-B were synthesized us- ing the solid phase peptide synthesis method and investigated the interaction of them with phospholipid bilayer, antibacterial activity, and hemolytic activity. Both toxic peptides could induce dye release at a low concentration in neutral liposome. The binding affinity of mastoparan-B for neutral liposome was smaller than that for acidic one. Mastoparan and mastoparan-B had strong antibacterial activity for gram-positive bacteria, but weak or potent activity for gram-negative ones, respectively. Mastoparan and mastoparan-B lysed erythrocyte very little up to 5 $\mu$M.
The aim of this study was to enhance the antioxidant activity of salted squid by inoculation of two Weissella spp. strains (W. cibaria FB-069 and W. viridescens FB-077) isolated from traditional Korea salted squid. The safety and probiotic potential characteristics of these two strains were evaluated. The safety of these strains was analyzed based on hemolytic activity, mucin degradation, biogenic amino production, and resistance to antibiotics. These lactic acid bacteria showed probiotic potential, including resistance to gastrointestinal tract conditions, adhesion to Caco-2 cells, and aggregation. The low-salted squid fermented with Weissella strains had consistently higher antioxidant activity through changing their amino acid profiles. Therefore, W. cibaria FB-069 and W. viridescens FB-077 might be good candidates for fermentation of salted squid to develop functional food with enhanced health benefits.
The effects of his ($\beta$-amino-ethyl-oxo) oxalate and bis ($\alpha$-amino-methyl-oxo) oxalate on the toxicity of lead acetate in rast were examined. Rats were given intraperitoneally at the dose of lead acetate 45 mg/kg. The exposure of lead acetate showed the 70% decrease of ALAD ($\delta$-amino levulinic acid dehydratase) activity in red blood cell. In vivo 122 mg/kg administration of bis ($\beta$-amino-ethyl-oxo) oxalate and bis ($\alpha$-amino-methyl-oxo) oxalate showed the 50% increase of ALAD activity, whereas 149 mg/kg administeration of Ca-EDTA had no effect. In vitro, the same results were obtained. Both compounds had hemolytic activity at concentrations higher than that required for showing the 50% ALAD activity increase in vivo.
Effects of quercetin on the specific and non-specific immune responses were studied in vivo. Quercetin at a dose of 2.5, 5, 10, 20 and 40 mg/kg were orally administered to ICR male mice once daily for 28 consecutive days. Cyclophosphamide was injected intraperitoneally to ICR mice with a single dose of 5 mg/kg 2 days before secondary immunization. Mice were sensitized and challenged with sheep red blood cells (S-RBC). Immune responses were evaluated by humoral and cellular immune reponses and non-specific immune response. The results of this study were summarized as followings; 1. Quercetin significantly decreased the body weight, and introduced the atrophy of liver, spleen and thymus gland dose-dependently, but increased the numbers of white blood cell. 2. Querectin significantly depressed the hemagglutination titer, Arthus reaction and hemolytic plaque forming cell. 3. Quercetin significantly depressed the delayed type hypersensitivity and rosette forming cell. 4. Quercetin at a dose of 2.5, 5 and 40 mg/kg significantly depressed phagocytic activity. 5. Quercetin at a dose of 10 and 20 mg/kg significantly increased natural killer cell activity.
Four flavonoids (1-4), a phenylethyl glycoside (5), and a phenylpropanoid glycoside (6) were isolated from the flowers of Buddleia officinalis (Loganiaceae). Their structures were determined by chemical and spectral analysis. Among the isolated compounds, luteolin (1) and acteoside (6) exhibited the most potent antioxidative activity on the NBT superoxide scavenging assay. In addition, compounds 1-6 revealed weak antifungal activity, and no hemolytic activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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