Resveratrol, a phenolic antioxidant found in grapes, has been known to mediate various biological activities on the human body. In the present study, we tested the antifungal a ctivity of resveratrol against human pathogenic fungi before carrying out further studies to elucidate the antifungal mechanism(s) of resveratrol. Resveratrol displayed potent antifungal activity against human pathogenic fungi at concentration levels of 10-20 ${\mu}g$/mL. Furthermore, time-kill curve exhibited fungicidal effect of resveratrol on C. albicans, but the compound had no hemolytic activity against human erythrocytes. The destruction of C. albicans cells by resveratrol was confirmed by scanning electron microscopy. These results suggest that resveratrol could be employed as a therapeutic agent to treat fungal infections of humans.
해수클로렐라 (Chlorella elliposidea C020) 에탄올 추출물로부터 항균 및 항곰팡이 활성, 항산화활성, tyrosinase inhibitory 활성 (미백효과)과 용혈활성을 실험하였다. 효율적인 추출을 위해서 동결건조 후 95% 에탄올로 2시간 추출하는 것이 가장 좋다는 것을 알 수 있었다. 해수클로렐라 에탄올 추출물의 항균 및 항곰팡이에 대한 활성을 측정한 결과, B. subtilis PM125와 B. licheniformis, V. parahemolyticus와 E. tarda NUF251에서 활성을 나타내었다. 그러나, 곰팡이인 C. albicanse에 대하여서는 활성을 나타내지 않았으며, 인간의 적혈구로 용혈활성 실험한 결과, 아주 낮은 활성을 나타내었다. DPPH방법을 이용하여 항산화 능력을 측정한 결과, 2 mg/mL에서 75% 라디칼 소거능력을 나타내었다. 해수클로렐라 에탄올 추출물의 tyrosinase 저해활성 $IC_{50}$는 10.87 mg/mL로 나타났다. 이러한 결과를 바탕으로 해수클로렐라 에탄올 추출물로부터 다양한 생리활성물질을 개발하여 고부가가치 제품을 창출할 수 있을 것으로 판단된다.
This study was undertaken to identify and characterize hemolytic Bacillus cereus isolated from commercial ssam-jang. The physiological and biochemical properties of isolate were first examined. Using the BIOLOG system, the isolate was identified and assigned to B. cereus MH-2. Phylogenetic tree of MH-2 was plotted based on 16S rRNA sequence comparisons. Hemolytic activity was observed around wells of sheep blood agar plates seeded with MH-2 cultures; the zone of hemolysis gradually increased with increasing incubation time of the cultures. Zymographic analysis estimated the molecular weight of the presumed hemolysis-causing molecule to be about 30 kDa. Survival rates of MH-2 cells decreased with increasing NaCl concentrations in the media. The stress shock proteins (e.g., DnaK and GroEL) induced by NaCl were reduced in proportion to the NaCl concentration and exposure period to B. cereus MH-2. Analysis of SDS-PAGE and Western blot revealed that the stress shock proteins, 70-kDa DnaK and 60-kDa GroEL were decreased proportionate to the NaCl concentrations as well as exposure period in exponentially growing cultures. Scanning electron microscopy demonstrated the presence of perforations and irregular rod forms with wrinkled surfaces in cells treated with NaCl.
The garlic has been eaten widely regardless of easten and westen countries to cure the various disease like cancer, tuberculosis, dentalgia, toxemia and leprosy from ancient times. Even now it is reported that they lower the level of triglycerides and cholesterol in blood and that they also affect on the cohesive power of the platelets. In addition, it is also known that it lowers the glucose level in blood. Especially, the sulfur containing amine acid and the derivatives of the garlic has the counteracting effect to heavy metals. Nowadays, the garlic is known for its efficiency for the various kinds of cancer, neoplasms, hypertension, arteriosclerosis and apoplexy. However, it is reported that the intake of the excessive amount of garlic causes hemolytic anemia recently. The hemolytic anemia is more severe especially in HK phenotype dogs which has Na-K-ATPase activity. Therefore, this study was performed to examine the effect on the blood of the HK phenotype Jindo dogs when administered the excessive amount of garlic. HK phenotype group showed the significant decrease on RBC, WBC, PCV, Hb, MCV, MCHC, GSH, Met-Hb but LK phenotype group didn's show the significant decrease. AST, ALT, BUN, creatinine, CPK, glucose, and total protein values were within normal ranges during the period.
Vibrio mimicus is a closely related species with V. cholerae, and has been reported to be associated with gastrointestinal infections. Although extraintestinal infections of these vibrios have also been reported in Japan and Southeast Asia. But little research papers on V. mimicus was reported in Korea. Therefore, we tried to isolate V. mimicus from the environmental sea water from April to July in Pusan, Korea. Among the isolated strains, we selected the strongest hemolytic strain and then named V. mimicus SM-9. In this paper, we checked the antibiotic susceptibility and psychrotrophic characteristics of the isolated strain. Hemolytic activity of the hemolysin produced by the isolated strain was also measured. V. mimicus was not detected from the sea water samples in April and May, but its detection rate was relatively high in June and July in Pusan, Korea. The bacteriological characteristics of V. mimicus SM-9 were Gram-negative rods, motile, oxidase positive, Voges-Proskauer negative and sucrose negative. In 23 kinds of antibiotics susceptibility test, V. mimicus SM-9 showed susceptibility to the most of antibiotics submitted while it was resistive against lincomycin, oxacillin, rifampin and vancomycin. Hemolytic activity of the hemolysin produced by V. mimicus SM-9 was highest in stationary phase of the growth curve in BHI broth at 37$^{\circ}C$ and its activity was reached 18 HU per $m\ell$ of culture supernatant. For checking the psychrotrophic property of V. mimicus SM-9, the decreasing rate of the strain in phosphate buffer solution and yellowtail flesh homogenate was examined during the storage at 4, 0, -4 and -2$0^{\circ}C$. The decreasing rates of the selected strain stored in phosphate buffer solution were greater than those in fish homogenate. Decreasing rates of V. mimicus SM-9 stored in phosphate buffer solution were not significantly different by the storage temperatures. The viable cell counts of the strain were decreased as 5 log cycles after 120 hours at all the tested temperatures. While decreasing numbers of the strain in fish homogenates were 2*4 log cycles after 120 hours. The decreasing pattern of the strain numbers were very slow after 200 hours at all the stored temperatures.
재배버섯에 갈색의 침몰성 반점들로 나타나는 갈반병(brown blotch disease)은 Pseudomonas tolaasii의 펩티드성 독소인 tolaasin에 의해서 유발된다. Tolaasin은 18개의 아미노산으로 구성된 분자량 1,985 Da의 lipodepsipeptide이며, 생체막에 pore를 형성하여 버섯세포 뿐만 아녀라 세균, 곰팡이, 식물 및 동물세포를 파괴한다. Tolaasin의 활성은 용혈성 독소의 활성측정에 널리 쓰이는 적혈구를 이용하여 독소의 용혈활성을 측정함으로써 이루어졌다. Tolaasin의 용혈활성은 적혈구의 파괴시 방출되는 헤모글로빈 양을 420 nm에서의 흡광도 증가로 측정하거나, 잔존하는 적혈구에 의한 600 nm에서의 흡광도로 측정하였다. P. Tolaasii 배양액의 용혈활성은 배양중 정체기 초기에 증가하기 시작하여 정체기 후기에서 최대로 나타났다. Tolaasin의 용혈활성은 개와 쥐의 적혈구에서 높게 나타났으며, 상대적으로 토끼와 닭의 적혈구에서는 낮았다. Tolaasin의 용혈활성에 미치는 양이온들의 효과에서 $ZN^{2+}$ 뿐만 아니라, $Cd^{2+}$과 $L^{3+}$이 tolaasin의 용혈활성을 저해하였으며, 음이온의 경우 $CO_3^2$가 용혈활성을 지연시켰고, 반면 $PO_4^{2-}$의 경우 용혈활성을 증가시켰다.
Effects of beta-carotene on the immunobiological responses were studied in ICR mice. ICR male mice were divided into 8 groups (10 mice/group), and beta-carotene at doses of 4, 20 and 100 mg/kg were orally administered to ICR mice once daily for 28 consecutive days. Cyclophosphamide (CY) was injected intraperitoneally (i.p.) to ICR mice with a single dose of 5 mg/kg body weight at 2 days before secondary immunization. Mice were sensitized and challenged with sheep red blood cells (5-RBC). Immune responses were evaluated by humoral immunity, cellular immunity and non-specific immunity. The results of this study were summarized as follows: (1) Beta-carotene significantly increased the weight ratios of liver, spleen and thymus to body weight depending on dose, and significantly increased the increasing rate of body weight and the number of circulating leukocyte. (2) Beta-carotene dose-dependently increased hemagglutination titer, Arthus reaction and hemolytic plaque forming cell related to humoral immunity. (3) Beta-carotene significantly increased delayed-type hypersensitivity reaction and rosette forming cell related to cellular immunity. (4) Beta-carotene dose-dependently increased phagocytic activity, and significantly increased natural killer (NK) cell activity. (5) Beta-carotene dose-dependently inhibited reductions in humoral immunity, cellular immunity, NK cell activity and phagocytic activity by treatment with CY.
The full-length cDNA of the lumbrokinase fraction 6 (F6) protease gene of Lumbricus rubellus was amplified using an mRNA template, sequenced and expressed in E. coli cells. The F6 protease gene consisted of pro- and mature sequences by gene sequence analysis, and the protease was translated and modified into active mature polypeptide by N-terminal amino acid sequence analysis of the F6 protease. The pro-region of F6 protease consisted of the 44 residues from methionine-1 to lysine-44, and the mature polypeptide sequence (239 amino acid residues and one stop codon; 720 bp) started from isoleucine-45 and continued to the terminal residue. F6 protease gene clones having pro-mature sequence and mature sequence produced inclusion bodies in E. coli cells. When inclusion bodies were orally administrated rats, generated thrombus weight in the rat' venous was reduced by approximately 60% versus controls. When the inclusion bodies were solubilized in pepsin and/or trypsin solutions, the solubilized enzymes showed hemolytic activity in vitro. It was concluded the F6 protease has hemolytic activity, and that it is composed of pro- and mature regions.
We screened a small molecular library that was designed and independently synthesized in vitro and found a new drug (MY-03-01) that is active against ovarian cancer. We established that MY-03-01 effectively inhibited SKOV-3 cell survival in a dose-dependent manner, based on cell viability rates, and that it not only induced SKOV-3 apoptosis by itself, but also did so synergistically with paclitaxel. Secondly, when MY-03-01 was applied at $40{\mu}M$, its hemolytic activity was less than 10%, compared with the control, and there was almost no damage to nor mal cells at this concentration. In addition, we used DAPI staining and flow cytometry to show that MY-03-01 could significantly induce apoptosis of SKOV-3 cells. Finally, we found that MY-03-01 likely induced SKOV-3 apoptosis by activating caspase3 and caspase9 through the mitochondrial pathway.
The members of the genus Vibrio include harmless aquatic strain as well as strains capable of causing infections in human and fish. Pathogenic mechanisms are only understood for Vibrio cholerae O1 and O139 and not for the majority of Vibrio species. Twelve clinical and nonclinical strains were examined by in vitro and in vivo experiments for the importance of extracellular enzymes as a virulence determinant of Vibrio species. In vivo cytotoxicity assay was performed by injecting approximately $10^{8}$ cells/mL into mice (BALB/c). V. harvyi and V. vulnificus showed 100% lethality within 3hr after bacterial injection. V. fluvialis and four strains of V. parahaemolyticus showed 50% lethality within 4hr. V. mimicus, V. alginolyticus and V. furnissii revealed 30% lethality within 9hr. Nonclinical strains, V. campbellii and V. ordalii, did not show any lethality. In vitro protease and hemolytic activities were also good indicators for clinical and nonclinical strains of Vibrio species. The clinical strains showed much higher activities than nonclinical strains. The activity of some clinical strains of re-isolates was evidently increased. Most clinical strains had $\beta$ hemolytic activity. The results demonstrate that the prevalent distribution of extracellular proteases in pathogenic Vibrio sp. implies their importance as a virulence determinant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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