Glycyrrhizae Radix aqua-acupuncture solution (GRAS) and Glycyrrhizae Radix water-extracted solution (GRWS) were prepared and tested for organ toxicities, antitumor activities, and immunomodulatory effects. The organ-toxicity of GRAS to male ICR mice was studied by the measurements of glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic pyruvate transaminase (GPT), lactate dehydrogenase (LDH), and alkaline phosphatase (ALP-s) activities after injection of GRAS for 7 days. The activities of GOT, GPT, LDH, ALP-s were decreased with GRAS. It was shown to possess considerable toxicity toward various tumor cell lines. Concentration of GRAS at 1.5g/ml and 3g/ml resulted in more than 80% inhibition of growth in Ehrlich ascites tumor cells (EATC), Hepa1c1c7, and HeLa cells. Toxicity of GRAS to A549 revealed that 68% inhibition of growth. GRWS at the concentration of 3g/ml showed more than 80% inhibition of growth with EATC, Hepalclc7, A549 and HeLa. In morphological study, the number of cells were decreased, and the shape of cells was round-form in EATC, Hepalclc7, A549 and HeLa cells with GRAS. Administration of GRAS inhibited the growth of EATC in vivo. Mice given EATC at 1.5g/ml or 0.3g/ml GRAS had 16.7% to 50% survival after 21 days. GRAS increased the proliferation of T and B cells and the cytolytic activity of purified T cell. The biosyntheses of nucleic acid and protein of EATC, Hepalclc7, A549 and HeLa cells were inhibited by GRAS.
The p53 gene is inactivated by the human papillomavirus (HPV) E6 protein in the majority of cervical cancers. Treatment of HeLa S3 cells with siRNA for HPV E6 permitted adenovirus-mediated transduction of a p53 gene linked to an upstream estrogen response element (ERE). Our previous study in non-siRNA treated HHUA cells, which are derived from an endometrial cancer and express estrogen receptor ${\beta}$, showed enhancing effects of an upstream ERE on adenovirus-mediated p53 gene transduction. In HeLa S3 cells treated with siRNA for HPV E6, adenovirus-mediated transduction was enhanced by an upstream ERE linked to a p53 gene carrying a proline variant at codon 72, but not for a p53 gene with arginine variant at codon 72. Expression levels of p53 mRNA and Coxsackie/adenovirus receptor (CAR) mRNA after adenovirus-mediated transfer of an ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) were higher compared with those after non-ERE-linked p53 gene transfer in siRNA-treated HeLa S3 cells. Western blot analysis showed lower ${\beta}$-tubulin levels and comparatively higher p53/${\beta}$-tubulin or CAR/${\beta}$-tubulin ratios in siRNA-treated HeLa S3 cells after adenovirus-mediated ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) transfer compared with those in non-siRNA-treated cells. Apoptosis, as measured by annexin V binding, was higher after adenovirus-mediated ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) transfer compared with that after non-ERE-linked p53 gene transfer in siRNA-treated cells.
바이러스 치료제 개발을 위하여 합성된 핵산유도체 11개에 대한 in vitro 항바이러스 약효검색을 수행하였다. 검색대상 바이러스로서 외피보유 DNA 바이러스인 human herpesvirus에 속하는 herpes simplex virus type 1과 type 2에 대해서는 Vero 세포체계에서 3일 후 CPE 저해정도를 MTT 검색법으로 cytomegalovirus에 대해서는 HEL 세포체계에서 7일 후 Giemsa 염색법으로 약효를 측정하였다. 외피비보유 RNA 바이러스인 picornavirus에 속하는 poliovirus type 1과 type 3과 coxsackie B virus type 3에 대한 약효를 HeLa 세포체계에서 2일 후 CPE 저해정도를 MTT 검색법으로 측정하였다. 아울러 selectivity index를 구하기 위하여 Vero와 HeLa 세포에 대한 약물자체의 독성인 cytocidal effect를 MIT 검색법으로 측정하였다. 그 결과 항 herpesvirus 약효는 어떤 물질에서도 발견되지 않았으나 한 물질이 poliovirus type 1과 3에 대하여 selectivity index 10정도 (CC$_{60}$ 38 ug/ml, EC$_{50}$ 1-4 ug/ml)를 나타내었고 자세한 기작은 좀 더 조사할 필요가 있다.
DNA 回復合成과 染色體交換과의 聯關性을 추구하기 위해 알킬화제 突然變異誘發原인 MMC, MNNG, MMS를 培養한 사람의 淋巴球와 HeLa $S_3$ 細胞에 處理하여 다음과 같은 結果를 얻었다. 1. 이들 알킬화제에 의해 誘發된 DNA 回復合成은 MMC, MNNG, MMS의 濃度가 각각 $3 \\times 10^-7, 1 \\times 10^-6, 5 \\times 10^-4 M$에서 檢出되었다. 이는 MMC가 가장 强力한 DNA 回復合成 誘發原이며 다음이 MNNG 그 다음이 MMS임을 뜻한다. MMC와 MNNG는 濃度增加에 따른 DNA 回復合成에 큰 차이를 보이지 않으나 MMS는 현저한 增加를 보인다. 2. MMC에 의한 染色體異常은 濃度가 增加함에 따라 그 率에 현저한 增加를 보이나 染色體交換率에는 별차이가 없다. 그러나 MNNG는 染色體異常率에 차가 없고 染色體交換은 觀察되지 않았다. MMS는 染色體異常 및 染色體交換 모두 濃度의 增加에 따른 그 率의 增加를 나타낸다. 이러한 結果는 突然變異誘發原에 의한 DNA 回復合成이 染色體交換 및 染色體異常과 직접적인 연관성이 없음을 시사하는 것이다.
IgE-dependent histamine-releasing factor (HRF) is found extracellularly to regulate the degranulation process of histamine in mast cells and basophils and known to play a predominant role in the pathogenesis of chronic allergic disease. HRF has been also identified in the intracellular region of the cell. Previously, we reported that HRF interacts with the 3rd cytoplasmic domain of the alpha subunit of Na,K-ATPase and inhibits Na,K-ATPase activity. Since it is known that estroaen activates the sarcolemmal Na,K-ATPase, we tested whether estrogen recovers the Na,K-ATPase activity repressed by HRF. In this study, we showed that estrogen activates Na,K-ATPase repressed by HRF. RT-PCR and western blot analysis showed that estrogen doesn't reduce the expression level of HRF in HeLa cell, suggesting that this recovery effects of estrogen probably occur via indirect mechanism on HRF and Na,K-ATPase.
Guarino Guarini(1624-1683) is one of great Baroque architects who developed new spatial concept in architecture. He refused to static space typically appeared in Renaissance architecture. Instead, to make it possible to generate complicate form and moving space, he made use of generative diagram. It provide him with an abstract machine to generate automatically architectural inferiority. His generative diagram consists of three types: single circle diagram, matrix diagram and longitudinal diagram. The first diagram uses single circle as primary generator and develop this by means of overlap and equiangular division. La Cappella della Santissima Sindone, Sanctuary of Chiesa di Oropa, Chiesa dei Padri Somaschi, San Gaetano are designed according to this diagram. The generator of the second diagram is nine circles in $3{\times}3$ matrix, which provide the base for the interpenetration of space in Guarini's architecture. He inspired this diagram from Kepler's $\ulcorner$Harmonices mundi$\lrcorner$. The Churches of San Lorenzo, Ste-Anne-la-Royale, San Filippo Neri, San Gaetano are generated by this diagram. The third diagram has several circles in Lantin-cross plan. Guarini adopted this diagram because he had chances to design several churches in Northern Europe. The churches of Santa Maria di Ettinga, Immacolata Concezione, San Maria della Divina Providenza, Church without Name, San Filippo Neri are representative examples for this diagram.
A simple method for studying the lectin-like interactions between Helicobacter pylori and cultured human epithelial cell lines was developed using an enzyme-linked, biotin-streptavidin bacterial-adhesion assay. The present study suggests that this method is suitable for evaluating the participation of lectin interactions in the adhesion of H. pylori to cultured HeLa S3 and Kato III cells, both fixed and glycosidase-treated cells, as well as assessing glycoconjugated binding inhibition studies. The time-course and dose-dependent kinetics of the biotin-labeled H. pylori adhesion th the formaldehyde-fixed Hela S3 and Kato III cell lines exhibited saturation. In addition, the binding of the biotin-labeled H. pylori to the formaldehyde-fixed cultured cells was partially blocked by pre-incubation with glycoconjugates and polyclonal antibodies against a heparan sulfate binding protein from H. pylori.
목적 : 분자 표적의 선택적 억제가 방사선 세포 살상 효과를 증진시키는 것으로 알려져 있으므로 선택적 COX-2 억제제와 EGF 수용체 차단제를 HeLa 세포주에 처리한 후 방사선 효과의 상승작용을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 자궁경부암 세포주인 HeLa세포에서 EGF 수용체 차단제 AG 1478, 선택적 COX-2 억제제 NS 398과 방사선을 복합 투여하여 세포성장 억제 분석(cell graph inhibition assay)과 세포사멸 분석(apoptosis assay)을 시행하였고, 방사선 감수성 변화를 살펴보기 위해 세포생존 분석(clonogenic survival assay)을 시행하였다. 방사선 감수성 인자로는 2 Gy에서의 세포생존분획($SF_2$)과 linear-quadratic model을 이용한 dose enhancement ratio (DER)를 사용하였다. 방사선 감수성에 대한 작용기전 분석을 위해 flow cytometry로 세포주기 분석(cell cycle analysls)을 시행하였고, western blot 분석을 통하여 bcl-2와 bax 단백질의 발현 변화를 살펴보았다. 결과 : HeLa세포에 NS 398과 AG 1478을 방사선과 함께 복합 투여한 실험 군에서 세포사멸 정도가 가장 높게 나타났다($8.49\%$ vs. $22.70\%$). 세포주기 분석 결과, 방사선과 복합 약물 처리군에서 $G_0/G_l$ 세포주기 정체와 5 세포 분획 소실이 나타났으며 이러한 변화는 72시간 이후까지 지속되었다 세포생존 분석 결과로는 방사선과 AG 1478군에서 $SF_{2}0.68{\pm}0.07$, DER 1.12를 보인 반면, 방사선과 복합약물처리군에서는 $SF_{2}0.12{\pm}0.01,\;DER\;3.00$으로 나타났다. Western blot분석에서는 방사선과 복합약물처리군에서 bcl-2와 bax 단백질 발현이 모두 감소하는 양상을 보였다. 결론 : 신호전달 체계를 억제하는 분자 표적 약제인 선택적 COX-2 억제제와 EGF 수용체 차단제를 방사선과 복합투여함으로써 HeLa세포의 방사선 감수성이 증가됨을 확인하였다.
Membrane associated guanylate kinase inverted-3 (MAGI-3)는 세포-세포 연접의 형성을 유도하는 막단백질인 membrane associated guanylate kinases (MAGUKs)의 한 종류 단백질로 140 kDa 크기를 가진다. MAGI-3는 PTEN/MMAC와 함께 협력하여 AKT/PKB의 kinase 활성을 조절하거나 MAPKs 신호전달경로로 ERK 활성을 조절로 한다. Coxsackievirus B3 (CVB3)는 가장 일반적으로 감염된 심근 세포 사멸으로 인한 바이러스성 심근염을 일으키는 enterovirus에 속하는 인간 병원체이다. 이전 연구에서 protein kinase B (PKB, 또는 AKT)와 extracellular signal-regulated kinases 1/2 (ERK1/2)의 활성은 HeLa 세포에서 CVB3 복제를 위해 필수적임이 밝혀졌다. 본 연구에서 enterovirus 복제와 AKT 신호 활성조절에서 MAGI-3의 역할을 검증하였다. MAGI-3-Flag의 발현은 CVB3 감염 후에 AKT 신호 활성과 viral capsid protein VP1의 발현을 유도하였으며 이는 MAGI-3에 의한 enterovirus 증식 조절을 보여주었다. AKT 신호는 MAGI-3 발현에 의해 enterovirus 감염과 함께 유의하게 증가하고 이것은 감염 바이러스의 증식을 활발하게 유도함을 확인하였다. 이 결과는 MAGI-3의 발현은 AKT와 ERK의 활성이 증가하고, 더 나아가 바이러스 증식과 연관이 있다는 것을 입증한다. MAGI-3는 아마도 AKT 신호 조절을 통해 enterovirus 증식 조절에 중요한 역할을 할 것으로 생각된다.
This study is about Le Corbusier's early years of loarning and training at La Chaux-de-Fonds. It is an attempt to show how Le Corbusier's groundwork was laid which characterize his work throughout the life. Charles Edouard Jeanneret was trained as a watch engraver and wished to be a painter. C. L'Eplattenier was to play a decisive role in shaping the young introspective boy's future. He encouraged Jeanneret's habit of the close study and observation of nature. Jeanneret was not the product of an established school, but instead made the unusual choice of educating himself. He found two indispensible sources of inspiration in study the past and in contemplating nature. His four years of self-education consisted of extensive reading, summer travels and winter layovers in larger cities-Vienna, Paris, Berlin-while sketching in museums or apprenticing local architects-Pellet, Behrens-. All these impressions then blended together to become part of a comprehensive source book of knowledge and imagination of the later Le Corbusier. A largely self-taught man, he never stopped making notes, drawing and writing, always aspiring to a clearer understanding of the meaning and underlying principles of objects and architecture. Jeanneret's five villas in La Chaux-de-Fonds are barometers which show the sequences of his development and change as an architect. In 1917, being thirty, he uprooted himself from his hometown to get a wider range of opportunities and moved to Paris. By that time Jeanneret was almost ready to blossom into Le Corbusier It was during this formative years of his life that Le Corbusier established the working method, mind-set and philosophical basis that determined the course of an architect in the making.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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