• 제목/요약/키워드: HeLa $S_3$ cell

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몰약(沒藥)이 자궁경부암세포(子宮經部癌細胞)(HeLa Cell)의 Apoptosis에 미치는 영향(影響) (Myrrha-induced Apoptosis in Human Cervical Carcinoma HeLa Cells)

  • 박종규;조옥현;김송백;조한백
    • 대한한방부인과학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.97-110
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    • 2006
  • Purpose : To address the ability of Myrrha (MY) to induce cell death, we investigated the effect of MY on apoptosis. In human cervical carcinoma HeLa cells, apoptosis occurred following MY exposure in a dose-dependent manner. Methods : We have tested several kinds of anti-oxidants to investigate the MY-induced apoptotic mechanism. Among the anti-oxidants, N-acetyl cysteine(NAC) or reduced glutathione (GSH) protects MY-induced apoptosis. NAC is an aminothiol and synthetic precursor of intracellular cysteine and GSH. To confirm the role of GSH in MY-induced apoptosis, methionine and cystathionine-glutathione extrusion inhibitors were treated in the presence of MY. Results : NAC, GSH, methionine or cystathionine led to protective effect against MY-induced apoptosis in HeLa cells. The GSH and GSH-associated reagents regulate MY-induced cytochrome c release and the resultant caspase-3 activation. Furthermore, the two specific inhibitors of carrier-mediated GSH extrusion, methionine and cystathionine demonstrate GSH extrusion occurs via a specific mechanism. While decreasing GSH extrusion and protecting against MY-induced apoptosis, methionine and cystathionine failed to exert anti-apoptotic activity in cells previously deprived of GSH. Conclusion : the target of the protection is indeed GSH extrusion. This shows that the protective effect is achieved by forcing GSH to stay within the cells during apoptogenic treatment. All this evidence indicates the extrusion of GSH precedes andis responsible for the apoptosis, probably by altering the intracellular redox state, thus giving a rationale for the development of redox-dependent apoptosis in MY-treated human cervical carcinoma HeLa cells.

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Enzyme-Linked, Biotin-Streptavidin Bacterial-Adhesion Assay for Helicobacter pylori Lectin-Like Interactions with Cultured Cells

  • Murillo, Guzman;Antonia, Maria;Ascencio, Felipe
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제11권1호
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    • pp.35-39
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    • 2001
  • A simple method for studying the lectin-like interactions between Helicobacter pylori and cultured human epithelial cell lines was developed using an enzyme-linked, biotin-streptavidin bacterial-adhesion assay. The present study suggests that this method is suitable for evaluating the participation of lectin interactions in the adhesion of H. pylori to cultured HeLa S3 and Kato III cells, both fixed and glycosidase-treated cells, as well as assessing glycoconjugated binding inhibition studies. The time-course and dose-dependent kinetics of the biotin-labeled H. pylori adhesion th the formaldehyde-fixed Hela S3 and Kato III cell lines exhibited saturation. In addition, the binding of the biotin-labeled H. pylori to the formaldehyde-fixed cultured cells was partially blocked by pre-incubation with glycoconjugates and polyclonal antibodies against a heparan sulfate binding protein from H. pylori.

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HeLa 세포에서 Estrogen이 Na,K-ATPase활성에 미치는 영향 (Estrogen Effect on the Na,K-ATPase Activity Repressed by IgE-Dependent Histamine-Releasing factor in HeLa Cells)

  • 이시내;김화정;이경림
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제33권4호
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    • pp.322-326
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    • 2005
  • IgE-dependent histamine-releasing factor (HRF) is found extracellularly to regulate the degranulation process of histamine in mast cells and basophils and known to play a predominant role in the pathogenesis of chronic allergic disease. HRF has been also identified in the intracellular region of the cell. Previously, we reported that HRF interacts with the 3rd cytoplasmic domain of the alpha subunit of Na,K-ATPase and inhibits Na,K-ATPase activity. Since it is known that estroaen activates the sarcolemmal Na,K-ATPase, we tested whether estrogen recovers the Na,K-ATPase activity repressed by HRF. In this study, we showed that estrogen activates Na,K-ATPase repressed by HRF. RT-PCR and western blot analysis showed that estrogen doesn't reduce the expression level of HRF in HeLa cell, suggesting that this recovery effects of estrogen probably occur via indirect mechanism on HRF and Na,K-ATPase.

다섯 가지 해조류 에탄올 추출물의 항돌연변이 활성 및 암세포 성장억제 효과 (Antimutagenic and Cytotoxic Effects of Ethanol Extracts from Five Kinds of Seaweeds)

  • 김성애;김진;우미경;곽충실;이미숙
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.451-459
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    • 2005
  • 한국과 일본을 비롯한 극동아시아 지역에서 널리 사용되고 항암효과가 있는 것으로 알려진 톳, 다시마, 미역, 파래, 김을 대상으로 각 해조류 에탄을 추출물을 Ames test를 이용하여 돌연변이 유발 억제능을 검색하고, MTT assay를 이용하여 HeLa cell, MCF-7 cell과 SNU-638 cell에 대한 암세포 성장억제 효과를 비교한 결과는 다음과 같다. 5종의 해조류 에탄올 추출물의 2-anthramine에 대한 간접작용 돌연변이능 억제효과를 S. Typhimurium TA 98에서 측정한 결과, 톳$(100\%)$, 다시마$(94.2\%)$가 3.5 mg/plate에서, 파래 $(68.5\%)$가 4.5 mg/plate에서 효과적인 돌연변이 억제능을 나타냈고, S. Typhimurium TA 100에서는 파래$(100\%)$, 톳$(100\%)$, 다시마$(94.1\%)$가 각각 1.5 mg/plate, 2.5 mg/plate, 4.5 mg/plate의 농도에서 최대 돌연변이 억제 효과를 보였다. 반면 미역과 김은 간접작용 돌연변이 억제 효과가 없는 것으로 나타났다. 직접 작용 항돌연변이능을 S. Typhimurium TA 98로 측정한 결과, 톳, 미역과 파래 모두 4.5 mg/plate의 농도에서 각각 $83\%,\;73\%,\;73\%$의 저해율을 보여 2-nitro-flouorene의 돌연변이능에 대한 저해율이 비교적 높은 것으로 나타났다. 또한 S. Typhimurium TA 100에서 sodium azide의 돌연변이능에 대한 저해효과가 가장 큰 해조류는 톳, 다시마와 파래로 세 가지 해조류 모두 3.5 mg/plate의 농도에서 $100\%$ 저해율을 보였다. 반면, S. Typhimurium TA 98에서 미역과 김은 4.5 mg/plate의 농도에서 각각 $73\%,\;50%$ 정도의 저해율을 나타냈고, S. Typhimurium TA 100에서는 $0\%$ 저해율을 보여 직접작용돌연변이에 대한 저해 능력이 적은 것으로 나타났다. MTT assay를 이용하여 HeLa cell과 MCF-7 cell, SNU-638 cell에 대한 암세포 성장억제 효과를 관찰한 결과, 5종 해조류의 에탄을 추출물 모두 암세포 증식을 억제하였다. HeLa cell의 성장을 $90\%$ 이상 저해한 해조류는 톳, 다시마, 미역, 파래였고, 그 효과를 건조무게로 비교하면 파래, 미역, 다시마, 톳의 순이었다. 김은 $56\%$ 저해율을 나타냈다. MCF-7 cell에 대한 세포 성장억제 효과 역시 $90\%$ 이상 저해율을 나타낸 해조류는 파래, 미역, 다시마, 톳의 순이었고, 김은 $50\%$의 저해율을 나타냈다. SNU-638 cell에 대한 세포 성장억제 정도는 HeLa cell이나 MCF-7 cell에 대한 세포성장 억제 효과보다는 다소 낮았다. 저해율이 $70\%$ 이상인 해조류는 파래, 미역, 다시마, 톳이었고, 김은 $68\%$로 나타나 해조류 간에 차이는 적었다. 이상에서 Ames test와 MTT assay를 통해 해조류 에탄올 추출물의 항돌연변이 효과와 암세포 성장억제 효과를 검색한 결과, 톳, 파래와 다시마는 항돌연변이 효과 및 암세포 성장억제 효과가 우수한 것으로 나타났고, 암세포에 대한 항암 효과는 각 시료마다 정도의 차이는 있으나 5종의 해조류 모두 암세포 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 이 결과는 해조류가 개발 가능한 고부가가치의 기능성식품 소재임을 확인한 것으로서, 이를 위해서는 갈조류, 녹조류, 홍조류 등의 해조류에 함유된 암예방 또는 항암작용을 가진 새로운 생리활성물질을 탐색할 필요가 있다.

Detection of Anticancer Activity from the Root of Angelica gigas In Vitro

  • Ahn, Kyung-Seop;Sim, Woong-Seop;Kim, Ik-Hwan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제5권2호
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    • pp.105-109
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    • 1995
  • Anticancer activity of a fraction of the ethanol extract from the root of Korean angelica (Angelica gigas Nakai) was recognized in human cancer cell lines HeLa $S_3$, K-562, and Hep $G_2$. The extract blocked the phorbol ester-inducing megakaryocytic differentiation of K-562 cells, which indicated the modification of protein kinase C (PKC) activity. In vitro assay showed the activation of PKC by the extract. An effective fraction of the Angelica gigas extract, of which $R_f$ value was 0.64 in a thin layer chromatography, was a different component from those of European angelicas. The $ED_50$ value of the fraction was 8, 9, and $16\;\mu\textrm{m}/ml$ against HeLa $S_3\;Hep\;G_2$, and K-562 cells, respectively, while the fraction showed higher $ED_50$ values against normal cell lines.

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황기에 표고버섯 균사체를 배양한 추출물이 항암효과 및 알레르기 억제효과에 미치는 영향 (Effect of Mycelia Extracts from Lentinus edodes Mushroom-Cultured Astragalus membranaceus Bunge on Anti-cancer and Anti-allergy Activities)

  • 배만종;김광중;김수정;예은주
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제36권1호
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    • pp.8-13
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    • 2007
  • 황기를 이용하여 황기균사체를 접종, 배양하여 얻어진 황기균사체 추출액의 간암세포, 유방암세포, 자궁경부암세포 그리고 고형암의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 3가지 암세포의 형태변화 및 증식억제에 미치는 영향은 황기균사체 추출물이 황기추출물보다 효과적인 것으로 나타났으며, 황기균사체를 간암세포에 3 mg/mL로 처리했을 때 65.23%, 유방암세포에 5 mg/mL로 처리했을 때 69.42%의 높은 암세포 증식 억제 효과가 있었다. 자궁경부암세포에서는 황기균사체를 3 mg/mL로 처리했을 때 황기를 처리했을 때보다 암세포 증식억제효과가 23.82%더 높았다. 특히 간암세포와 유방암세포에서 황기균사체 추출물을 처리하였을 때 강력한 암세포 증식억제효과가 있는 것으로 나타났다. 고형암 억제효과에서도 대조군에 비해 황기균사체 추출물이 47%의 고형암 억제효과가 있었고, 황기추출물보다 고형암 억제 효과 10% 더 높았다. 히스타민 유리 억제효과를 측정한 결과 compound 48/80 처리군에 비해 황기추출물은 7.6%, 황기균사체 추출물은 44.6%의 히스타민 분비 억제효과가 있는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 한방기능성 소재에 균사체 배양기법의 접목으로 효능의 상승과 복합기능을 기대할 수 있겠다.

Condurango (Gonolobus condurango) Extract Activates Fas Receptor and Depolarizes Mitochondrial Membrane Potential to Induce ROS-dependent Apoptosis in Cancer Cells in vitro -CE-treatment on HeLa: a ROS-dependent mechanism-

  • Bishayee, Kausik;Mondal, Jesmin;Sikdar, Sourav;Khuda-Bukhsh, Anisur Rahman
    • 대한약침학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.32-41
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    • 2015
  • Objectives: Condurango (Gonolobus condurango) extract is used by complementary and alternative medicine (CAM) practitioners as a traditional medicine, including homeopathy, mainly for the treatment of syphilis. Condurango bark extract is also known to reduce tumor volume, but the underlying molecular mechanisms still remain unclear. Methods: Using a cervical cancer cell line (HeLa) as our model, the molecular events behind condurango extract's (CE's) anticancer effect were investigated by using flow cytometry, immunoblotting and reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Other included cell types were prostate cancer cells (PC3), transformed liver cells (WRL-68), and peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Results: Condurango extract (CE) was found to be cytotoxic against target cells, and this was significantly deactivated in the presence of N-acetyl cysteine (NAC), a scavenger of reactive oxygen species (ROS), suggesting that its action could be mediated through ROS generation. CE caused an increase in the HeLa cell population containing deoxyribonucleic acid (DNA) damage at the G zero/Growth 1 (G0/G1) stage. Further, CE increased the tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) and the fas receptor (FasR) levels both at the ribonucleic acid (RNA) and the protein levels, indicating that CE might have a cytotoxic mechanism of action. CE also triggered a sharp decrease in the expression of nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$) both at the RNA and the protein levels, a possible route to attenuation of B-cell lymphoma 2 (Bcl-2), and caused an opening of the mitochondrial membrane's permeability transition (MPT) pores, thus enhancing caspase activities. Conclusion: Overall, our results suggest possible pathways for CE mediated cytotoxicity in model cancer cells.

표고버섯 렉틴의 림프구 자극 분열 및 암 세포 응집 효과 (Mitotic Stimulation and Cancer Cell Agglutination of the Lectin from Lentinus edodes)

  • 문익재;정시련;전경희
    • 약학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.260-267
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    • 1995
  • A lectin from the edible mushroom, Lentinus edodes, was purified through physiological saline extraction, ammonium sulfate fractionation and column chromatographies. On polyacrylamide gel electrophoresis, 0.05M fraction from hydroxyapatite column exhibited adjacent four sharp bands. The partially purified lectin agglutinated the erythrocytes of rabbit, mouse and rat, but not agglutinated human erythrocytes. The lectin's mitogenic effects were tested by its application to human and murine splenic lymphocytes. The results showed that the 0.05M fraction from hydroxyapatite was mitogenic, and the optimal dose of Lentinus edodes lectin was slightly lower than Con A by the culture with murine splenic and human peripheral lymphocytes. Meanwhile, its ability to agglutinate transformed cells was tested by its administration to continuous cell lines L1210 and HeLa cells. The leetin was found to be an agglutinin of tumor cell lines tested by L1210 and HeLa cells.

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감초로 배양한 표고버섯 균사체 추출물이 항암 효과 및 알레르기 억제 효과 검증 (Anti-Cancer and Anti-Allergy Activities of Mycelia Extracts of Lentinus edodes Mushroom-Cultured Glycyrrhiza radix)

  • 배만종;이성태;예은주
    • 동아시아식생활학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.43-50
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    • 2007
  • This study investigated the effects of mycelia of Lentinus edodes mushroom-cultured Glycyrrihiza radix(LMG) on cancer cell lines and sarcoma 180(S-180), as well as on human mast cells. In an anti-cancer tests using Hep3B(hepatic cancer cell), MCF-7(breast cancer), and HeLa(uterine cancer) cells, LMG extract exhibited greater anti-proliferation effects than Glycyrrihiza glabra(GG) extract. LMG extract multiplication restraining effects were 60% that of ethanol at 3 mg/mL extract also displayed tumor suppressive effects in mice injected with S-180 cells. The growth-inhibition rates against tumor cells were 56% for LMG and 37% for GG. When LMG was added to human mast cells, the Intensity of RT-PCR products using primers($FC{\varepsilon}RI\;c-kit$) decreased. significantly compared with that of control. These results suggest that Lentinus edodes Mushroom-Cultured Glycyrrhiza glabra has an anti-proliferation effects against cancer cell lines(Hep3B, MCF-7 and HeLa) and S-180 tumors and will be also beneficial in treating allergic reactions.

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발효 차가버섯 추출물이 인체 종양세포주 증식에 미치는 영향 (Effects of Water Extract from fermented Chaga Mushroom(Inonotus obliquus) on the Proliferation of Human Cancer Cell Lines.)

  • 차재영;박상현;허진선;조영수
    • 생명과학회지
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    • 제17권5호
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    • pp.671-677
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    • 2007
  • 발효 및 비발효 차가버섯 수용성 추출물이 정상 세포주 NIH3T3 mouse normal fibroblast cell 및 인체 종양 세포주 AGS human gastric cancer cell(위암), HCT-15 human colon cancer cell(대장암), Hep3B human hepatoma cancer cell(간암), MCF-7 human breast cancer cell(유방암), HeLa human cervical cancer cell(자궁경부암)에서 MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) assay 방법에 의한 세포 증식 억제와 암세포 증식억제의 기전 연구의 일환으로 apoptosis가 일어날 때 나타나는 DNA fragmentation을 agarose gel electrophoresis 방법으로 검토하였다. 인체 종양 세포주의 생육저해 효과가 발효 차가버섯 추출물이 비발효 차가버섯 추출물보다 강한 것으로 나타났다. 그러나 동일한 실험조건하에서 마우스 정상 세포주 NIH3T3은 80% 이상의 생존율을 나타내어 정상 세포주에는 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 특히, 발효 및 비발효 차가버섯 추출물에서 본 실험에 사용한 세포주 중에서 대장암 세포주 HCT-15에 대해 가장 세포 증식 억제효과가 뛰어났으며, 이러한 효과는 첨가 농도 의존적 이였다. 발효 및 비발효 차가버섯 추출물에 의한 암세포 증식억제가 기전 연구로 apoptosis가 일어날 때 나타나는 DNA fragmentation을 세포로부터 genomic DNA를 분리하여 agarose gel electrophoresis 방법으로 조사한 결과, 정상세포인 NIH3T3 세포는 DNA fragmentation이 거의 일어나지 않아 세포 생존율 결과와 유사한 경향을 보였으나, 특히 대장암 세포주인 HCT-15에서는 발효 차가버섯뿐만 아니라 비발효 차가버섯 추출물에서도 DNA fragmentation이 많이 일어나는 것이 관찰되어 암세포 증식억제 효과가 높다는 결과를 뒷받침 해주고 있다.