We investigated the inhibitory effects of solvent extracts from dried yam on $H_2O_2$-induced oxidative stress and growth of cancer cell lines (HT1080 human fibrosarcoma and HT-29 human colon cancer cells). Yam (Dioscoreacea) has been recognized as a healthy food due to its various biological activities, such as anti-obesity, anti-constipation, anti-proliferation, and anti-mutagenic activities, as well as its ability to decrease blood glucose and cholesterol levels. In order to determine the protective effect on $H_2O_2$-induced oxidative stress, DCFH-DA (dichlorodihydrofluorescin diacetate) assay was conducted. Acetone with methylene chloride (A+M) extract of dried yam appeared to reduce the levels of intracellular reactive oxygen species (ROS) with dose responses. Among the fractions, 85% aq. methanol fraction showed the highest protective effect on production of lipid peroxides. Inhibitory effects of A+M and methanol (MeOH) extracts on the growth of HT1080 and HT-29 cancer cells increased in a dose dependent manner. The treatments of n-hexane, 85% aq. methanol and n-butanol fractions (${\geqq}0.5$ mg/ml concentrations) significantly inhibited the growth of both cancer cells (p<0.05). From these results, 85% aq. methanol fraction showed inhibitory effects on cellular oxidation and growth of human cancer cells, suggesting that this fraction may contain active compounds of dried yam.
Viticis fructus (fruits of Vitex rotundifolia) is the dried fruit from Vitex rotundifolia; is a traditional medicine for treating inflammation, migraines, chronic bronchitis, headaches, eye pain, and gastrointestinal infections; and demonstrates various bioactivities, including anti-allergic, anti-cancer, and anti-inflammatory effects, which are partly due to its phenolic compound content. This study examines the inhibitory effects of viticis fructus (fruits of Vitex rotundifolia) on MMP-2 and MMP-9 expression using gelatin zymography and RT-PCR in phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA)-induced HT-1080 fibro-sarcoma cells. Fruits of Vitex rotundifolia were extracted twice using dichloromethane ($CH_2Cl_2$) and methanol (MeOH). The combined crude extracts ($CH_2Cl_2$ and MeOH) significantly inhibited MMP-2 and MMP-9 activities in gelatin zymography. The combined extracts were fractionated into n-hexane, 85% aqueous methanol (85% aq. MeOH), n-butanol, and water, successively according to polarity. Among all solvent-partitioned fractions, 85% aq. MeOH fractions showed the strongest inhibition on the activation of MMP-2 and MMP-9 in gelatin zymography. In PMA-stimulated HT-1080 cells, the expression levels of MMP-2 and MMP-9 mRNA were also greatly inhibited by the 85% aq. MeOH fraction. These results suggest that viticis fructus can be used as an excellent source for anti-invasive agents.
Kim, You-Ah;Lee, Jung-Im;Kim, Hae-Jin;Kong, Chang-Suk;Nam, Taek-Jeong;Seo, Young-Wan
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.52
no.4
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pp.180-186
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2009
Whole plants of Vitex rotundifolia were extracted for 2 days with methylene chloride ($CH_2Cl_2$) followed by extraction of the residue for an additional 2 days. The same procedure was also applied using methanol (MeOH). The two crude extracts were combined and partitioned between $CH_2Cl_2$ and $H_2O$. The organic layer was further partitioned between n-hexane and 85% aq. MeOH, and the aqueous layer was also further fractionated with n-BuOH and $H_2O$, successively. From the 85% aq. MeOH fraction, one compound was isolated through the repeated HPLC. According to the results of physicochemical data including NMR and MS, the chemical structure of the compound was determined as artemetin (1). The antiproliferative effects of the crude extracts, fractions, and compound against HT1080, AGS, MCF-7 and HT-29 human cancer cells were compared with the control by using MTT assay. In the comparative analysis, the 85% aq. MeOH fraction exhibited the strongest antiproliferative effects on human cancer cell lines in a dose-dependent manner (p<0.05). In addition, exposure of compound 1 isolated from 85% aq. MeOH fraction led to strong antiproliferative effect in HT1080 cancer cell lines. These results suggest that the extracts and compound isolated from V. rotundifolia may be used as potential chemopreventive and chemotherapeutic agents.
Whole plants of Zostera asiatica were extracted twice with acetone/methylene chloride (A+M) and methanol (MeOH) in turn. The combined crude extracts were evaporated in vacuo and then the residue was partitioned between water and methylene chloride. The aqueous layer was fractionated into $H_2O$ and n-butanol and then the organic layer was also fractionated into 85% aq. MeOH and n-hexane, successively. The crude extracts and their solvent fractions were evaluated for their inhibitory effect on growth of human cancer cells AGS, HT-29, MCF-7, and HT-1080 cells by MTT reduction assay. Among samples tested, 85% aq. MeOH and n-hexane fractions showed strong cytotoxic effect against AGS, HT-29, and MCF-7 cells. On the other hand, for HT-1080 cell, 85% aq. MeOH fraction exhibited the strongest cytotoxic effect.
Kim, You-Ah;Lee, Jung-Im;Kong, Chang-Suk;Yea, Sung-Su;Seo, Young-Wan
KSBB Journal
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v.24
no.2
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pp.201-206
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2009
Whole plants of Corydalis heterocarpa were extracted twice with $CH_2Cl_2$ and MeOH in turn. The combined crude extracts were concentrated in vacuo and then partitioned between $CH_2Cl_2$ and $H_2O$. The organic layer was fractionated with n-hexane and 85% aq. MeOH, and the aqueous fraction was also further fractionated with n-BuOH and $H_2O$, successively. Growth inhibition effects of crude extracts and their solvent fractions were evaluated in AGS, HT1080, U-937, MCF-7 and HT-29 human cancer cells using MTT assay. The inhibitory effects of solvent fractions were increased in a dose-dependent manner. Among these tested samples, 85% aq. MeOH fraction showed the most potent inhibitory effect on the growth of human cancer cells. These results suggest that active compounds having much stronger anticancer effect can be isolated from Corydalis heterocarpa.
We investigated the chemical components of red onion powder dried using the low temperature vacuum method and the inhibitory effects of solvent extracts of the dried red onion powder on the growth of HT-1080 human fibrosarcoma and HT-29 human colon cancer cells and $H_2O_2$-induced oxidative stress. The moisture content of the dried red onion powder was 17.95%, while the vitamin C content was 96 mg/100 g and the total phenols content was 39.1 mg/mL. The inhibitory effects of acetone with methylene chloride (A+M) and methanol (MeOH) extracts of the red onion powder on the growth of HT-1080 and HT-29 cancer cells increased in a dose dependent manner (p<0.05). The inhibitory effect was greater on the growth of HT-29 cells, while the A+M extracts had a higher inhibitory effect than the MeOH extracts. Treatment with the hexane, 85% aq. methanol, butanol and water fractions of the extract led to significant inhibition of the growth of both cancer cell lines (p<0.05). Among the fractions, the hexane and 85% aq. methanol fractions showed a greater inhibitory effect. To determine the protective effect on $H_2O_2$-induced oxidative stress, a DCFH-DA (dichlorodihydrofluorescin diacetate) assay was conducted. All fractions, including the crude extracts of dried red onion, appeared to lead to a significant reduction in the levels of intracellular reactive oxygen species (ROS), and these reductions occurred in a dose dependent fashion (p<0.05). Among the fractions, the 85% methanol fraction showed the greatest protective effect on the production of lipid peroxides.
To examine the effect of Shiquandabutang on the metastasis of cancer, the following experiments were made. Before the main experiments, the cytotoxicity was measured by putting Shiquandabutang sample in HT1080. Then zymography was made to examine the change of gelatinolytic activity. And western blotting was carried out to examine the changes of Fos, Jun, Ets, the transcription factors of MMP-2, MMP-9, and Erk, JNK on signal transduction pathway to AP-1. Third, in vitro invasion assay with transwells coated by collagen and matrigel was carried out. From the results of the above the following conclusions were obtained. 1. The experimental result about cytotoxicity of Shiquandabutang against HT1080 was as below. The stained cell count after being treated by Shiquandabutang sample $400{\mu}g/ml$ for 24 hours was 0.9% of total cells, and the stained cell count by Shiquandabutang sample $100{\mu}g/ml$ was 1.5% of total cells. Both were near the level of control group which showed 0.6% stained. 2. The result of collagenase assay was as below. In Shiquandabutang sample $400{\mu}g/ml$, MMP-2 was reduced as compared with TPA control group, and the band of MMP-9 induced by TPA disappeared. In Shiquandabutang sample $800{\mu}g/ml$, both bands of MMP-2 and MMP-9 disappeared. 3. The results of western blots for Jun, Fos, Ets, Erk, JNK were as below. In Shiquandabutang sample $200{\mu}g/ml$, Ets was reduced, and Fos were increased. 4. The result of invasion assay was as below. The number of cells which migrated across transwell membrane in Shiquandabutang-treated group was less than that of +TPA control group. From the above results, it was concluded that Shiquandabutang might control the appearing and acting of collagenase not by the MMP-2, -9 promoter but by other way.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.2
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pp.360-367
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2009
The purpose of this study was evaluated physiological activity of processed sulfur with Cordyceps militaris mycelium that antioxidative and antiinflammatory effects. Proliferation of processed sulfur (PS) with Cordyceps militaris mycelium was increased in dose-dependent manner. In organic sulfur contents of Cordyceps militalis mycelium fortified processed sulfur, CM+PSH (CM+3000 ppm of PS) was significantly higher than other groups. However, CM+PSL (CM+1500 ppm of PS) was almost changed organic sulfur. Content of total polyphenol compounds was similarity to CM, CM+PSL and CM+PSH. The EDA (electron donating ability) and SOD-like activity was increased in dose-dependent manner and the activity of CM were significantly higher than CM+PSL and CM+PSH. We examined cytotoxicity, nitric oxide production of Raw 264.7 cell and inhibition of HT 1080 cell by MTT assay. CM, CM+PSL and CM+PSH do not have any toxic effects in macrophages (Raw 264.7). And CM+PSL and CM+PSH inhibited the production of nitrite in Raw 264.7 cells activated with LPS. The antitumor effects of processed sulfur with Cordyceps militaris mycelium on HT 1080 cell was indicated a significantly inhibition activity. These results suggested that processed sulfur with Cordyceps militaris mycelium have activities of antioxidant, antiinflammatory effects.
Kim, Hae-Ja;Kim, Wan-Gyeom;Cho, Hwa-Eun;Choi, Yun-Hee;Lee, Ki-Nam;Chong, Myong-Soo
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.2
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pp.473-479
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2009
The purpose of this study was evaluated physiological activity effect of organic germanium in culture broth of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium and germanium-fortified yeast. Proliferation Tricholoma matsutake mycelium and yeast was inhibited by addition of germanium. Contents of organic germanium in Tricholoma matsutake mycelium and yeast was increased in dose-dependent manner. And low concentration(1,000 ppm) of germanium in mycelium was almost changed organic germanium. In the result of antioxidant activity as SOD-like activity, contents of total polyphenol compound and electron donating ability, activity of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium was higher than that of germanium-fortified yeast. To evaluate of antitumor effects in vitro, we examined nitric oxide production of Raw 264,7 cell and cytotoxicity of HT1080 cell by MTT assay. Nitric oxide production of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium was shown low level in low concentration(1,000 ppm) than other groups. The anticancer effect of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium on HT 1080 cell was indicated a strong inhibitory effect in low concentration(1,000 ppm). These results suggest that organic germanium in culture broth of germanium-fortified Tricholoma matsutake mycelium has valuable physiological activities as antioxidant and anticancer effect, and it was higher than that of germanium-fortified yeast.
Kim, Hae-Ja;Han, Choong-Ho;Kim, Nan-Young;Lee, Eun-Kyoung;Lee, Ki-Nam;Cho, Hwa-Eun;Choi, Yun-Hee;Chong, Myong-Soo
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.24
no.1
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pp.111-117
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2010
The purpose of this study was to investigate the effect of garlic(Allium sativum L.) extracts with extraction conditions on antioxidant and anticancer activity. The extracts prepared for garlic by hot temperature extraction (HG), low temperature extraction (LG), UMPM extraction (UG), fermentation (FG) and black garlic hot temperature (BG) method. Content of total polyphenol compound was the BG higher than other extracts. The EDA (electron donating ability) and SOD-like activity was increased in dose-dependent manners, and the activity of BG and UM was significantly higher than LG and FG. We examined cytotoxicity, nitric oxide production of Raw 264.7 cell and inhibition of HT 1080 cell by MTT assay. All extracts does not have any toxic effects in macrophages(Raw 264.7). And UG inhibited the production of nitrite in Raw 264.7 cells activated with LPS. The antitumor effects of LG and UG on HT 1080 cell was indicated a significantly inhibition activity. These results suggested that UG (UMPM extraction of garlic) have activities of antioxidant, anticancer effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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