In order to explore the brassinosteroid-active components in Zea mays seeds, the methanol extract was purified by the sequences of solvent fractionation, silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, charcoal adsorption chromatography and Bondesil chromatography. The activity of brassinosteroid was monitored by the rice inclination test and its presence could be confirmed in each purification step. The purified active components were separated by silica gel adsorption chromatography. Brassinosteroid substances in separated active fractions were identified as castasterone and teasterone by HPLC. The content of brassinosteroid in Zea mays seeds as converted into brassinolide was 3-8ng/g fresh weight.
This study was undertaken to separate and identify antifungla substances produced by Gilocladium virens G1, a biocontrol agent used for the control of plant diseases caused by Rhizoctonea solani. The culture of G. virens G1 effectively inhibited the growth of R. solani, Colletotrichum gloeosporioides, and Phytophthora capsici, but less that of Fusarium oxysporum. The n-hexane extract of the G. virens culture, which was used for the purification of responsible substances, strongly inhibited R. solani and C. gloeosporioides, but not P. capsici, although the n-butanol extract was effective on all of the pathogens tested. An antifungal substance was purified using the n-hexane extract by Silica gel column chromatography and HPLC. The substance was examined for purity by HPLC and for nature by UV spectrometry, which differed from known antibiotic compounds such as gliotoxin, viridin and gliovirin. The antifungal substance was very liphophilic based on its solvent-solubility and Rf values on TLC, and more inhibitory to C. gloeosporioides than other fungal pathogens tested.
Nastic, Natasa;Borras-Linares, Isabel;Lozano-Sanchez, Jesus;Svarc-Gajic, Jaroslava;Segura-Carretero, Antonio
Journal of Industrial and Engineering Chemistry
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v.68
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pp.282-292
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2018
This study aimed to compare the chemical composition of Morus nigra leaves extracts, obtained by maceration, accelerated solvent (ASE) and supercritical fluid extraction (SFE) under different extraction conditions. With regards to chemical composition, mainly phenolic acids and flavonoids were identified. HPLC-ESI-QTOF-MS allowed the identification of 13 new compounds reported in M. nigra leaves for the first time. ASE as a fast, green and innovative approach, seems to be the best choice for extracting compounds of different polarities within the shortest extraction time. The present study also highlights the potential application of M. nigra extracts as constituents of new added-value formulations.
A new application of high pressure liquid chromatography for the determination of fenitrothion and cis- and trans-neopynamin in insecticidal preparations was investigated. Optimum conditions for a good separation and determination were determined; solvent system: dichloromethane + n-hexane = 17 + 83; Bow rate: 0.5ml/min; column: u-porasil ($4mm{\times}3Ocm$); absorbance wavelength: 254nm; 0.05 AUFS and sample size: 30 ul. Recovery of fenicrothion, cis- and trans-neopynamin from mixed artificial preparations was 99.6%, 99.7% and 99.8% respectively. Also reproducibility tests showed that the coefficient of variation was 0.89% for fenitrothion, 0.74% cis-neopynamin and 1.1% for trans-neopynamin. There was no interference with insecticidal preparation containing DDVP, allethrin, S-421 and kerosene. HPLC method was rapid, accurate and it gave better reproducibility and higher sensitivity than any other analytical method. It was considered that HPLC could be greatly applied to the analysis of fenitrothion and neopynamin in insecticidal preparations.
In order to facilitate the quantification in autumnal Hamamelidaceae leaves, a HPLC method was used for the determination of two chlorophyll catabolites and their isomers: bilin-type (1) and bilinone-type (2) ones. The separation was done on a RP-C4 column with a gradient solvent system of 0.1% trifluoroacetic acid aqueous-methanol at the flow-rate of 0.2 mL/min and detected at 244 nm. The quantity of bilin-type (1) and bilinone-type (2) chlorophyll catabolite isomers from ten species of Hamamelidaceae autumnal leaves methanol extracts: Corylopsis pauciflora, Corylopsis spicata, Forthergilla major, Hamamelis intermedia, Hamamelis japonicum, Hamamelis japonicum var. flavopurpurscens, Hamamelis virginiana, Parrotiopsis jacquemontiana, Parrotia persica and X Sycoparrotia semidecidua were from 0.85 mg/g ~ 57.50 mg/g for bilin-type isomers (1) and 3.40 mg/g ~ 49.30 mg/g for bilinone-type isomers (2). The results obtained gave insight in quantitative bilintype (1) and bilinone-type (2) chlorophyll catabolite composition of the Hamamelidaceae plant species autumnal leaves.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.27
no.6
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pp.590-598
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2005
An adequate method to identify chromium separation, Cr(III) and Cr(VI), in water samples were studied by using High Performance Liquid Chromatography(HPLC) coupled with Inductively Coupled Plasma Mass Spectometer(ICP-MS) equipped with Dynamic Reaction Cell(DRC). The characteristic distribution of Cr(III) and Cr(VI) in the raw water taken at the six water intake stations in Seoul, was analyzed by the method developed by the authors. The chromium species separated by HPLC was isocratically conducted by using tetrabutylammonium phosphate monobasic(1.0 mM TBAP), ethylenediaminetetraacetic acid(0.6 mM EDTA) and 2% v/v methanol as the mobile phase. 5% v/v methanol was used as flushing solvent. A reactive ammonia($NH_3$) gas was used to eliminate the potential interference of $ArC^+$. Several Parameters such as solvent ratio, pH, flow rate and sample injection volume were optimized for the successful separation and reproducibility. Although it has been reported thai the separation sensitivity of Cr(III) is superior to that of Cr(VI), the authors observed Cr(VI) was more sensitive than Cr(III) when ammonia($NH_3$) gas was used as the reaction gas. It took less than 3 minutes to analyze chromium species with this method and the estimated detection limits were $0.061\;{\mu}g/L$ for Cr(III) and $0.052\;{\mu}g/L$, for Cr(VI). According to the results from the analysis on chromium species in the raw water of the six intake stations, the concentrations of Cr(III) ranged from 0.048 to $0.064\;{\mu}g/L$(ave. $0.054\;{\mu}g/L$) while that of Cr(VI) ranged from 0.014 to $0.023\;{\mu}g/L$(ave. $0.019\;{\mu}g/L$). Recovery ratio was very high($90.1{\sim}94.1%$). There were two or three times more Cr(III) than Cr(VI) in the raw water.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.10
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pp.1614-1618
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2014
To utilize Smilax china L. leaves as a natural preservatives, solvent fractions from crude methanol extract were prepared and investigated their antioxidant and antimicrobial activities against Staphylococcus aureus. Antioxidant activities were examined by 1,1-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical scavenging and ferric ion reducing antioxidant power assays. Ethyl acetate fraction from Smilax china L. leaves exhibited the strongest antioxidant and antimicrobial activities among the fractions (P<0.05), as well as the highest total phenolic and total flavonoid contents. Caffeic acid, ferulic acid, quercetin, and kaempferol contents in the ethyl acetate fraction from Smilax china L. leaves were determined by TLC and HPLC. In aqueous phase, as well as the n-butanol and n-hexane fractions, quercetin, ferulic acid, and kaempferol were detected in small amounts. Ferulic acid, which showed the highest content, is the major active compound from Smilax china L. leaves.
Cholesterol and cholesterol oxidation products (COPs) may accumulate in foods of animal origin during processing or storage. An effective and sensitive analytical method was developed by increasing the UV absorption of compounds through derivatization by attaching a chromophore to the functional groups of cholesterols (cholesterol, 20-hydroxycholesterol, 7-ketocholesterol, cholestane-$3{\beta}$-$5{\alpha}$-$6{\beta}$-triol, 25-hydroxycholesterol, and $5,6{\alpha}$-epoxycholesterol). The influences of the reaction time, volume of reaction solvent, amounts of derivatizing reagent, and extraction solvents were investigated, as they may influence the reaction and extraction yield. The derivatized COPs were analyzed simultaneously on a C18 column (2.1 mm i.d. ${\times}$ 100 mm length, $3.5{\mu}m$ particle size) using a gradient elution with water and acetonitrile. The derivatized COPs showed increased sensitivity and selectivity in HPLC/UV-Vis. The LOD and LOQ were in the concentration ranges of 0.018-0.55 mg/kg and 0.059-1.84 mg/kg from the powdered milk. And the accuracy and precision were 78.1-116.7% and 1.1-9.9%, respectively.
Ceramide III was prepared by the cultivation of Saccharomyces cerevisiae. Ceramide III was partitioned from the cell extracts by solvent extraction and analyzed by Normal Phase High Performance Liquid Chromatography (NP-HPLC) using Evaporative Light Scattering Detector (ELSD). We experimentally determined the mobile phase composition to separate ceramide III with NP-HPLC. Three binary mobile phases of n-hexane/ethanol, n-hexane/lsoprophyl Alcohol(IPA) and n-hexane/n-butanol and one ternary mobile phase of n-hexane/IPA/methanol were demonstrated. For the binary mobile phase of n-hexane/ethanol, the first mobile phase composition, 95/5(v/v), was step-increased to 72/23(v/v) at 3 min. In the binary mobile phase, the retention time of ceramide III was 7.87min, while it was 4.11 min respectively in the ternary system, where the mobile phase composition of n-hexane/IPA/methanol, 85/7/8(v/v/v), was step-increased to 75/10/15(v/v/v) at 3 min. However, in the ternary mobile phase, the more peak area of ceramide III was observed.
A liquid chromatographic method, using matrix solid-phase dispersion (MSPD) is developed for the extraction of residual furazolidone in chicken eggs. Blank or fortified egg samples (0.5 g) were blended with Octadecylsilyl (Bulk $C_{18}$, 40${\mu}{\textrm}{m}$, 18%. load, endcapped. 2 g) derivatized silica. After homogenization, $C_{18}$/egg and Na$_2$S $O_4$matrix were transferred to a column made of 10 ml glass syringe and filter paper and compressed 4.0∼4.5 ml volume. The column was washed with 8 ml of hexane and dried under $N_2$ gas. Furazolidone was eluted with acetonitrile (8 ml) under gravity. The eluate containing furazolidone was free from interfering compounds when analyzed by HPLC with UV detection (365 nm, photodiode array). Calibration curves were linear (r = 0.99985) and inter- (1.47%) and intra-assay (5.29%) variabilities for the concentration range examined (7.8∼497 ng/g of eggs, 20 ${mu}ell$ injection volume) were indicative of an acceptable methodology for the analysis of furazolidone. Average recovery of furazolidone added to egg was 96.2%. The limit of detection for the proposed method was 1 ng/g for furazolidone. The method using MSPD is proposed as an alternative assay to the classical method which involves the use of large volumes of a harmful solvent and requires a long tedious separation and clean-up processes prior to its determination.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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