자색고구마 (자미) anthocyanin 색소의 분석을 위하여 1% HCl 함유 methanol로 추출한 자색고구마 색 소액을 Amberlite IRC-50 양이온교환수지관을 통과시켜 정체하고 paper chromatography로 개별색소를 분리, 3개의 band를 얻었다. Paper chromatography에 의해 분리된 각 개별색소 에 대해 부분가수분해, aglycone의 확인, acyl group의 확인, 결합당의 확인, paper chromatography 그리고 HPLC 등을 기초로 한 각종 기기분석 결과 자색고구마의 anthocyanin 색소는 caffeic acid와 ferulic acid로 acylation된 peonidin-3-diglucoside-5-glucoside의 구조를 나타냄을 알 수 있었다.
HPLC-UV방법을 이용하여 밀전분 지방질의 주성분인 LPC를 정량하기 위해 HRW 밀전분 지방질로부터 순수한 LPC를 분리하여 LPC의 표준곡선을 작성하였다. 밀 품종별 LPC에서 대한 HPLC peak responses는 시료간 큰 차이를 보여주지 않아 HRW 밀전분 지방질로부터 만든 LPC의 HPLC-UV 표준곡선은 밀전분 지방질에 함유되어 있는 LPC의 함량을 신속하고 정확하게 정량하는 데 이용할 수 있음을 보여 주었다.
We describe here the conditions of thin layer chromatography (TLC) and high pressures liquid chromatography (HPLC) to improve the analytical method of phosphotyrosine (p-Tyr) in biological sample. TLC was performed on silica plate with the mixture of propanol and water (2.1 : 1 v/v) as a mobile phase and $R_1$ values were 0.42, 0.39 and 0.33 for phosphotyrosine, phosphothreonine and phosphoserine, respectively. HPLC was performed on $NH_2$ column with a mobile phase of potassium biphosphate solution by UV deterction at 192 nm. The optimum condition of HPLC was obtained at 0.01 M, pH 4.5 with a clear separation within 12 min. These procedures have been applied to the analysis of phosphotyrosine obtained from tyrosine-phosphorylated enolase. Both TLC and HPLC methods were suitable to analyze tyrosine-phosphorylated protein without being affected by contaminants from hydrolysates.
미역엽상부의 MeOH추출물에 포함되어 있는 brassinosteroid활성물질을 검색하기 위하여 용매분획, CCD, silica gel흡착 chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, charcoal 흡착 chromatography, Bondesil chromatography, 그리고 reverse phase의 HPLC등의 수법을 이용하여 분리 정제하고 각 단계에서 생물검정법으로 활성을 검정한 결과, 해조류인 미역에도 brassinosteroid활성물질의 존재가 인정되었는데, 그 함량은 타 식물의 영양조직에 비교하여 낮은 수준이었다.
Complex, ill-defined mixtures of natural origin are often used as nutrients in the production of biological products through microbial fermentation. Product yields are affected by variation in these natural products. Yeast extract is a typical example of these natural products. Since it is a mixture of amino acids, peptides and nucleic acids, its composition is not well characterized. In this study, we investigated the properties of thiamine hydrochloride, riboflavin and pyridoxine hydrochlride in yeast extract by using a gel filtration chromatography, ion exchange chromatography and high performance liquid chromatography. Yeast extract solution was fractionated by gel filtration chromatography and ion exchange chromatography, and then, each fraction was analyzed by using a high performance liquid chromatography.
Kil, Hyun Woo;Rho, Taewoong;Seo, Young Ju;Yu, Aram;Yoon, Kee Dong
Natural Product Sciences
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제26권3호
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pp.236-243
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2020
Salvia plebeia R. Br. is a plant which has been used as an edible crop and traditional medicine in Asian countries. In this study, HPLC-PDA analysis and countercurrent chromatography (CCC) coupled with reversed-phase (RP) HPLC method were applied to isolate ten isolates from 3.3 g of n-butanol soluble extract from hot-water extract of S. plebeia. The use of CCC enabled us to efficiently fractionate the starting material with less sample loss and facilitate the isolation of compounds from S. plebeia extract using RP-HPLC. The isolates were determined to be caffeic acid (1), 6-hydroxyluteolin 7-O-β-D-glucoside (2), eudebeiolide B (3), (R)-rosmarinic acid (4), homoplantaginin (5), eudebeiolide D (6), plebeiolide C (7), salpleflavone (8), eupafolin (9) and hispidulin (10) based on the spectroscopic evidence.
High-performance countercurrent chromatography (HPCCC) coupled with reversed-phase highperformance liquid chromatography (RP-HPLC) method was developed to isolate dihydrophaseic acid 3'-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (DHPAG) from the extract of Nelumbo nucifera seeds. Enriched DHPAG sample (2.3 g) was separated by HPCCC using ethyl acetate/n-butanol/water system (6:4:10, v/v/v, normal-phase mode, flow rate: 4.0 mL/min) to give 23.1 mg of DHPAG with purity of 88.7%. Further preparative RP-HPLC experiment gave pure DHPAG (16.3 mg, purity > 98%). The current study demonstrates that utilization of CCC method maximizes the isolation efficiency compared with that of solid-based conventional column chromatography.
자소자의 탈지시료로부터 FPA, SPA 및 IPA 형태의 phenol성 물질을 추출하여 이중 항산화활성이 가장 강한 FPA 추출물에 존재하는 항산화성분을 column chromatography 및 HPLC에 의하여 분리하였다. Chlorogenic acid를 표준물질로하여 측정한 탈지된 자소자에 함유되어 있는 phenol성 물질의 총함량은 0.38% 였고, 총 phenol성 물질중 FPA, SPA 및 IPA 추출물이 차지하는 비율은 71.1%, 15.8% 및 13.1%였다. 세가지 형태의 phenol성 물질의 항산화활성을 electron donating ability (EDA)와 linoleic acid를 기질로 하여 TBA값을 측정하여 비교하였을 경우 FPA 추출물이 가장 높은 항산화활성을 나타내었다. 항산화활성이 가장 높게 나타난 FPA 추출물을 silica gel column chromatography로 분획하여 항산화활성을 비교한 결과 acetone : methanol의 비가 8 : 2인 획분에서 가장 높은 항산화활성을 나타내었다. 항산화활성이 가장 높았던 획분을 HPLC에 의하여 분리한 결과 HPLC chromatogram 상에서 5가지 활성물질 획분이 분리되었으며, 이들 획분을 분취하여 항산화활성을 비교한 결과 F-I 획분이 가장 높은 항산화활성을 나타내었다.
인삼의 유효약리성분으로 밝혀진 saponin중의 각 ginsenosides를 효과적이고 능률적으로 분리하기 위하여 대량분취전용 고속액체 chromatograph인 preparative HPLC의 응용을 검토하였다. 조(粗) saponin획분을 preparative HPLC인 Prep LC/system-500를 사용하여 부분분획을 하고 각 획분에 함유되어 있는 ginsenosides의 조성을 Analytical HPLC로 동정한 후 Semi-preparative HPLC를 사용하여 인삼주성분 saponin을 단리했다. 그 결과 인삼 주성분 saponin인 $ginsenoside-Rb_1,\;-Rb_2,\;-Rc,\;-Rd,\;-Re$ 및 $-Rg_1$은 약 20 mg / 2.0 ml / injection으로 chromatography를 행하여 $300{\sim}400mg/day$로 대량분취가 가능하였다. 따라서 ginsenosides의 약리 및 임상효능 연구에 크게 기여하게 될 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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