본 연구에서는 3T3-L1 전지방세포를 이용하여 발효 삼정환의 지방 분화 억제 효과를 확인하고자 하였다. 삼정환을 5가지 주요 유산균으로 각각 발효시킨 후, Oil Red O 염색법으로 지방세포 분화 억제 여부를 알아보고, 이의 기전을 알기 위해서 지방생성에 핵심적인 역할을 하는 transcription factor 및 지질 조절 효소의 유전자 발현량을 비교하여 보았다. Oil Red O 염색 분석에서는 Lactobacillus plantarum, Enterococcus faecium으로 발효한 삼정환에서 지방구 수의 감소를 확인할 수 있었다. 또한 transcription factor로 $C/EPB{\alpha}$, $PPAR{\gamma}$, UCP-2 및 콜레스테롤 조절과 관련된 효소인 HMG-CoA reductase의 4가지 유전자 발현 정도를 분석하였는데, 발효시키지 않은 삼정환의 경우 농도가 $100{\mu}L/mL$ 이상일 때 네 가지 항목에서 억제 효과를 나타냈으며, 발효시켰을 때는 유산균의 종류에 따라 효과 억제효과가 있었는데, Lactobacillus plantarum으로 발효한 삼정환이 효과가 가장 좋은 것으로 나타났다. Lactobacillus plantarum으로 발효한 삼정환은 동일 농도의 발효하지 않은 삼정환과 비교했을 때, Oil Red O 실험에서 염색된 지방구 수가 더욱 감소하였으며, $PPAR{\gamma}$, UCP-2, HMG-CoA reductase의 경우 농도가 $200{\mu}L/mL$일 때 각각 35%, 57%, 54%로 5가지 발효 삼정환 중 가장 높은 억제율을 나타내었다. 이에 지방분화 억제 효과를 가진 삼정환을 발효시키면 그 효과가 더욱 증가하는 것으로 나타났는데, 특히 Lactobacillus plantarum으로 발효한 삼정환은 $PPAR{\gamma}$, UCP-2, HMG-CoA reductase의 유전자 발현조절을 통해 지방 분화를 억제시키는 것으로 밝혀져 발효 삼정환은 항비만 혹은 항고지혈증 약물로 개발 가능성이 있는 것으로 사료된다.
The primary objective of these studies was to screen the materials showing inhibitions of HMG-CoA reductase in vitro. The secondary objective was to determine the effect of garlic, lovastatin and copper on cholesterol concentrations in plasma. liver and brease muscle of pullets. In experiment 1, the degree of inhibition of the selective samples on HMG-CoA reductase activity was determined in vitro. The inhibition rate of water soluble garlic extracts, lovastatin and copper to HMG-coA reductase activity were 51.3%, 87.5%, and 82.0% respectively . In experiment 2, control diet (basal diet), garlic powder (3% in diet) , lovastatin (300mg/kg of diet) and copper(200mg/kg of diet) were fed to pullets in order to investigate the changes of cholesterol concentration in plasma and tissues. Plasma total cholesterol , and LDL-cholesterol were significantly reduced in pullets fed a diet containing 3 % garlic powder. However, coper significantly increased total cholesterol compared to controls and lovastatin did not affect plasma chholesterol concentration . Total cholesterol inlover and breast muscle inpullets were not affectedb y adding cholesterol lowering materials to the diets. The data suggests that it is not easy for HMG-CoA reductase inhibitors to reduce cholesterol levels in the body due to complication in cholestrol metabolism . However, garlic administration can lower the levels of plasma cholesterol in pullets.
Protein methylation occurs ubiquitously in nature and involves N-methylation of lysine, arginine, histidine, alanine, proline and glutamine, O-methylesterfication o dicarboxylic acids, and S-methylation of cysteine and methionine. In nature, methylated amino acids accur in highly specialized proteins such as histones, flagella proteins, myosin, actin, ribosomal proteins. hn RNA-bound protein, HMG-1 and HMG-2 protein, opsin, EF-Tu, EF-$1\alpha$, porcine heart citrate synthase, calmodulin, ferredoxin, $1\alpha$-amylase, heat shock protein, scleroderma antigen, nucleolar protein C23 and IF-3l.
고콜레스테롤 식이 횐쥐에서 xylooligo당이 간장에서의 콜레스테롤대사에 미치는 영향을 관찰하였다. 실험동물은 100$\pm$10g의 Sprague-Dawley 횐쥐를 이용하여 정상 식이군과 1% 고콜레스테롤 실험군으로 나누고 다시 실험군은 1%의 고콜레스테롤 식이에 xylooligo당을 0%, 5%, 10% 및 15% 농도 첨가군(C, C5XO, C10XO 및 C15XO군)으로 나누어 4주간 자유섭식시킨 후 콜레스테롤 대사 개선효과를 알아보았다. 간조직중의 중성지방과 콜레스테롤함량은 정상군에 비해 C군에서는 각각 3.9배, 20배씩 증가되었으며 C군에 비해 C10XO군은 거의 절반으로 감소되었다. 간조직의 HMG-CoA reductase 활성은 정상군에 비해 C군은 45% 감소되었으나, xylooligo당 공급군에서는 정상군 수준이었다. 간조직중의 지방산 조성은 oleic acid( $C_{18:1}$)과 linoleic acid( $C_{18:2}$)은 정상군에 비해 C군에서 유의적(p<0.05)으로 증가되었고, ara chidonic acid( $C_{20:4}$)는 감소되었으나 xylooligo당 공급으로 증가되었다. 총포화지방산(SFA)은 정상군에 비해 고콜레스테롤 식이로 인해 감소되 었으나, xylooligo당 공급으로 정상화되었다. 고콜레스테롤군에서는 총 단일불포화지방산(MUFA)은 증가되었으나, xylooligo당 공급으로 감소되었다. 항혈전지수인 n-3/n-6 지방산 비는 정상군에 비해 C군에서 감소되었으나, xylooligo당 10% 공급군에서는 C군에 비해 유의적으로 증가하였다. 결론적으로 식이 xylooligo당은 고콜레스테롤 식이로 인한 고콜레스테롤 혈증이나 고지혈증의 위험인자인 콜레스테롤을 감소시킬 수 있는 콜레스테롤 대사 개선 기능이 우수하므로 기능성 식품 신소재나 식이섬유의 대용품으로도 활용될 수 있으리라 생각된다.다.
Lipid lowering properties from three plant water extracts, Rosa rugosa, Crataegus pinnatifida and Polygonum cuspidatum, were tested by supplementing a 1% high-cholesterol diet with them in rats. Plasma triglyceride levels in Rosa fugosa, Crataegus pinnatifida and Polygonum cuspidatum groups were significantly lower compared to that of the control. by 29% , 24% and 47% respectively. hepatic trigylceride levels in Rosa rugosa and Crataegus pinnatifida groups were significantly lower compared to the control by 11% and 15% respectively. Hepatic HMG-CoA reductase activity in Rosa rugosa group was significantly greater compared to the control by 406%. Hepatic ACAT activity was significantly lower in Polygonum cuspidatum group compared to the control by 28%. by multiple regression results, only plasma cholesterol was associated significantly (p<0.05) with liver HMG-CoA reductase activity. Plasma cholesterol explained 12% of thevariance of the liver HMG-CoA redctase activity. In conclusion, we have showen that hot water extracts from Rosa rugosa, Crataegus pinnatifida and Polygonum cuspidatum lowered plasma triglycerides in rats fed on a high-cholesterol diet. Data suggests that these extracts could potentially prevent or treat hypertriglyceridemia induced by a high fat diet and fatty liver.
The study was designed to observe the effect of dietary calcium and fats on plasma cholesterol level, hepatic microsomal fluidity and HMG-CoA reductase activity as well as the excretion of fecal bile acids and neutral sterols in 1, 2-dimethylhydrazine(DMH)-treated rats. Male Sprague Dawley rats, at 7 weeks of age, were divided into 2 groups, 0.3% and 1.0% Ca levels and each group again subdivided into 2 groups of corn oil and perilla oil. Each rat was intramuscularly infused with DMH for 6 weeks to give total dose of 180mg/kg body weight and also fed experimental diet containing 15%(w/w) different fit and Ca(0.3% or 1.0%) for 20 weeks. High dietary calcium(1.0%) did not significantly influence on plasma cholesterol as well as hepatic microsomal fluidity and HMG CoA reductase activity, but significantly reduced the excretion of total bile acid per gram of faces and increased the excretion of total neutral sterol. However, high dietary Ca reduced the excretion of secondary bile acid(deoxycholic and lithocholic acids) which was known as promoter for colon cancer. Perilla oil rich in n-3 ${\alpha}$-linolenic acid significantly decreased plasma cholesterol by increasing hepatic microsomal fluidity compared with corn oil, but did not influence on HMG CoA reductase activity. Perilla oil did not influence on fecal excretion of total and primary bile acids, but reduced the excretion of secondary bile acids. Therefore, it could be recommended to consume more fish product and food rich in calcium and use more perilla oil in meal preparation to prevent from coronary hear disease and colon cancer especially when high fit diet has been practiced. (Korean Nutrition 31(9) : 1394-1403, 1998)
육계사료 내 마늘분말의 첨가급여가 육계의 성장성적과 간 HMG-CoA reductase의 발현에 미치는 영향을 규명하기 위해 본 연구를 수행하였다. 1일령의 육계 Ross 수평아리에게 마늘분말을 0%(항생제 첨가 또는 항생제 무첨가), 1%, 3% 및 5%의 수준으로 첨가한 실험사료를 각각 6주간 급여하였다. 증체량은 항생제 무첨가 대조구에 비하여 마늘분말 3% 및 5%를 첨가한 처리구에서 유의하게 증가하였으며(P<0.05), 사료섭취량은 처리구간 차이가 없었다. 육계 사료 내 5%까지의 마늘분말의 첨가급여는 증체량과 사료섭취량에 부정적인 영향을 주지 않았다. 간, 비장, 맹장 및 가슴 근육에 대한 상대적 중량은 처리가 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 근육 내 콜레스레롤 함량은 항생제 첨가 대조구에 비해 감소하였으나 통계적인 유의차는 나타나지 않았다. IB 항체 생성량은 항생제 무첨가 대조구에 비하여 유의적으로 증가하였다(P<0.05). 간의 HMGCoA reductase mRNA의 발현은 대조구에 비해 마늘분말을 첨가한 모든 처리구에서 저하된 것으로 관찰되었다. 본 연구에서 사료 내 마늘의 첨가급여는 육계의 성장촉진 효과를 나타내었으며, 콜레스테롤 대사에 영향을 미칠 수 있음이 시사되었다.
식용 임산자원인 산채류를 기능성 식품으로 개발하고자 산마늘을 비롯한 총 13종의 에탄올 조추출물에 대한 콜레스테롤 저하활성을 검정하였다. 즉, 콜레스테롤 생합성 과정 초기에 관여하는 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase(HMG-CoA reductase)와 후기에 관여하는 squalene synthase의 효소 활성을 조사한 결과 산마늘 잎 에탄올 추출물이 두 효소의 활성을 공히 70% 이상 저해하여 활성이 가장 우수한 것으로 나타났다. 그리고 이러한 콜레스테롤 저하활성과 관련이 있는 물질을 탐색하고자 산마늘로부터 물질 단리를 시도하여 디클로로메탄 가용부로부터 kaempferol과 quercetin을 단리하였다. 또한 유전자 레벨에서의 콜레스테롤 저하 활성을 조사하기 위해 단리물질과 분획물을 C100세포(햄스터 유래 HMG-CoA reductase 고발현 세포주)에 각각 5 ㎍/㎖과 10 ㎍/㎖로 24시간 처리하여 HMG-CoA reductase와 squalene synthase의 mRNA 발현 정도를 조사하였다. 그 결과 10 ㎍/㎖로 kaempferol과 quercetin을 처리한 경우 두 효소의 mRNA가 전혀 발현하지 않는 것으로 나타나 유전자 레벨에서의 콜레스테롤 생합성 저해 효과를 확인할 수 있었다. 이상의 결과 산마늘 잎 에탄올 추출물은 콜레스테롤 생합성에 관여하는 HMG-CoA reductase와 squalene synthase의 활성을 저해하며 이러한 활성 저해 효과는 kaempferol과 quercetin에 기인하는 것으로 사료되었다. 특히 kaempferol과 quercetin은 여러 식물의 성분으로서 이미 알려진 화합물이지만 콜레스테롤 저하활성이 있는 것으로 밝혀진 것은 이번이 처음으로 금후 이들 물질과 이들 물질을 함유하고 있는 식물 활용에 필요한 자료를 제공하였다고 사료된다.
Background: Inorganic arsenic is a human carcinogen that can target the liver, but its carcinogenic mechanisms are still unknown. Inorganic arsenic induces a spectrum of tumors including hepatocellular carcinoma in mice. Methods: Pregnant C3H mice were supplied with drinking water containing 50 ppm sodium arsenite during their pregnancy. The protein expression profile in the liver of 0.5-day-old. male offsprings exposed transplacentally to sodium arsenite was analyzed using protein 2D gel electrophoresis followed by mass spectrometry (MALDI-TOF). Results: Expression of proteins such as hydroxymethylglutaryl-CoA synthase mitochondrial precursor (HMG-CoA synthase), ${\beta}$-actin (cytoplasmic 1) and apolipoprotein A-IV precursor (Apo-AIV) were induced in mouse liver by sodium arsenite, while uricase (urate oxidase), guanine nucleotidebinding protein beta subunit 2-like 1 (RACK1) and fructose-bisphosphate aldolase B (Aldolase 2) were down-regulated. Summary: Expression of proteins that have been implicated in carcinogenesis, such as HMG-CoA, ${\beta}$-actin, and RACK1, was regulated in the liver of mice transplacentally exposed to inorganic arsenic.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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