To develop low endotoxic and multi-immunogenic outer membrane vesicles (OMVs), a deletion mutant of the msbB gene in Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium) was used as a source of low endotoxic OMV, and an expression vector of the canine parvovirus (CPV) VP2 epitope fused to the bacterial OmpA protein was constructed and transformed into the Salmonella ${\Delta}msbB$ mutant. In a lethality test, BALB/c mice injected intraperitoneally with the Salmonella ${\Delta}msbB$ mutant survived for 7 days, whereas mice injected intraperitoneally with the wild type survived for 3 days. Moreover, all mice inoculated orally with the ${\Delta}msbB$ mutant survived for 30 days, but 80% of mice inoculated orally with the wild type survived. The OmpA::CPV VP2 epitope fusion protein was expressed successfully and associated with the outer membrane and OMV fractions from the mutant S. Typhimurium transformed with the fusion protein-expressing vector. In immunogenicity tests, sera obtained from the mice immunized with either the Salmonella msbB mutant or its OMVs containing the OmpA::CPV VP2 epitope showed bactericidal activities against wild-type S. Typhimurium and contained specific antibodies to the CPV VP2 epitope. In the hemagglutination inhibition (HI) assay as a measurement of CPV-neutralizing activity in the immune sera, there was an 8-fold increase of HI titer in the OMV-immunized group compared with the control. These results suggested that the CPV-neutralizing antibody response was raised by immunization with OMV containing the OmpA::CPV VP2 epitope, as well as the protective immune response against S. Typhimurium in BALB/c mice.
Kim, Doo;Jeoung, Seok-young;Ahn, So-jeo;Jung, Jong-ho;Park, Son-il
Journal of Veterinary Clinics
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v.21
no.1
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pp.1-6
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2004
This study was undertaken to provide the appropriate vaccination protocol of canine parvovirus (CPV) vaccine for the companion dogs in Korea. A total of 120 healthy pups (20 pups per group) at 6 weeks of age were randomly assigned to one of four commercially available vaccines [C, G, K, and V groups] and one of vaccination schedules [V2 and V4 groups]. The serological responses to the CPV component of the vaccines were determined by measuring HI titers. The maternal antibodies was declined to under the protective level at 6 weeks of age. Therefore, it was considered that vaccination of pups for CPV should be started at 6 weeks of age. And when the combination vaccine was used, the immunogenicity of V vaccine was superior to the other vaccines and optimum vaccination schedule was 3 times vaccination with 3 weeks-interval starting vaccination at 6 weeks of age. Although pups were vaccinated at 6 weeks of age, the geometric mean CDV titers of pups in all groups by 9 weeks of age were under the protective level. So, hygienic measures including avoiding to exposure to the high risk areas were needed to prevent CPV infection in this period.
Effect of Growell a herbomineral premix was evaluated on performance, organ weight, humoral immune response, tissue and serum trace element profile of boilers. Day old 50 Babcock broiler chicks were randomly divided in two groups (C and T) and reared on deep litter system for 6 weeks of age. Chicks from group C were given basal diet while chicks from T group were fed basal diet supplemented with Growell at the rate 0.35 g/Kg. The chicks were vaccinated with Lasota strain of NCDV at $4^{th}$ and $28^{th}$ day of age. The birds receiving Growell treatment had higher body weight with better feed conversion ratio as compare to that of control chicks. Growell treatment had significantly reduced per cent weight of spleen and kidney, whereas that of bursa was increased. There was no effect of treatment on relative weight of thymus. HI antibody titer against NCDV in Growell treated chicks were higher as compare to untreated chicks indicating better humoral immune status. Growell treatment had no effect on serum Fe and Zn concentration. Dietary supplementation of Growell had significantly increased iron content of liver, kidney and muscle; zinc content of kidney and muscle; copper content of kidney and muscle and Mn content of kidney. Growell treatment improved the body weight, FCR and humoral immune status of broilers. Similarly, deposition of trace minerals in various organs was also increased in comparison to control.
The gene encoding F protein of CBP-1 strain, a heat-stable Newcastle disease virus (NDV) isolated from the diseased pheasants in Korea, was characterized by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), nucleotide and amino acid sequences. Virus RNA was prepared from the chorioallatoic fluid infected with NDV CBP-1 virus and cDNA was amplified by RT-PCR, cloned and sequenced to analyze. The PCR was sensitive as to detect the virus titer above $2^5$ hemagglutination unit. 1.7kb (1,707bp) size of the cDNA was amplified and cloned into BamHI site of pVL1393 Baculo transfer vector. The nucleotide sequences for F protein were determined by dye terminator cyclic sequencing using four pairs of primers, and 553 amino acid sequences were predicted. In comparison of the nucleotide sequence of F gene of CBP-1 with those of other NDV strains, the homology revealed 88.8%, 98.5% and 98.7% with Kyojungwon (KJW), Texas GB and Beaudette C strains, respectively. As the deduced 553 amino acid sequences of F protein of CBP-1 were compared with those of other NDV strains, the homology appeared 89.9%, 98.7% and 98.9% with KJW, Texas GB and Beaudette C strains, respectively. The putative protease cleavage site (112-116) was R-R-Q-K-R, indicating that CBP-1 strain is velogenic type. The amino acid sequences include 6 sites of N-asparagine-linked glycosylation and 13 cysteine residues. These data indicate that the genotype of CBP-1 strain is more closely associated with the strains of Texas GB and Beaudette C than KJW strain.
Immune response to two methods of Newcastle disease virus vaccine, one inactivated and the other attenuated was observed and the data presented. (1) Administration of inactivated virus vaccine in an amount of 1.0 ml. by intramuscular route gave an appreciable immunity to Newcastle disease for a period of at least three-and-half months. (2) The chickens given attenuated virus vaccine in the drinking water produced satisfactory immunity as manifested by the fact that immunized birds showed resistance when challenged 105 days after the vaccination and maintained high degree of HI titer for a period of 75 days. (3) Vaccination with the attenuated virus vaccine in drinking water is very simple and time saving in procedure, although the duration of immunity seems to be slightly shorter than that proced by inactivated virus vaccine. The author wishes to express his appreciation, to Drs. Kyu Myung Lee, Chang Koo Lee, and Ryong Sook Kee of their suggestions and help. The author is also indebted to Dr. Chang Hi Lee, Director of Anyang Veterinary Laboratory, who allowed the use of the facilities of the laboratory, whitout which this experiment could not have been undertaken.
Im, So Hi;Shin, Sung Hwan;Song, Myung Jun;Kim, Jin Woo;Kim, Seung Joon;Lee, Sook Young;Kim, Young Kyoon;Park, Sung Hak
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.56
no.5
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pp.550-554
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2004
A paragonimiasis infestation is caused by the paragonimus species. It is commonly found in the lung but has also been found to exist extrapulmonary infestations including cerebral, spinal, subcutaneous, hepatic, splenic, abdominal, urinary, and gynecologic infestation. On the other hand, a cutaneous infestation is extremely rare. Human infestation is caused by ingesting raw or undercooked intermediate hosts. Because paragonimus westermani larva mature to an adult worm in the lung, the possibility of identifying the adult worm of paragonimus westermani at extrapulmonary region is very rare. Case : After ingesting a fresh-water crab 1 month prior to the hospital visit, a 45-year old female patient was suffering from right pleuritic chest pain during that 1 month. The patient also complained of a palpable mass that was movable and migrating, and it was localized at the right upper quadrant of the abdomen. The eosinophil fraction of the white blood cell of peripheral blood and pleural fluid was elevated to 55.1% and 90%, respectively. Parasite eggs were not found in her sputum and stool examination. By using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), the paragonimus-specific IgG antibody titer was elevated to 0.28. During incisional biopsy, we were able to find the young adult worm of paragonimus westermani. We experienced the rare case of ectopic paragonimiasis with pleural effusion that was confirmed by identifying the adult worm of paragonimus westermani within the abdominal subcutaneous tissue. We report a case with brief literature reviews.
The gene encoding the HN protein from the CBP-1 strain, a heat stable Newcastle disease virus (NDV) isolated from diseased pheasants in Korea, was characterized by reverse transcriptase- polymerase chain reaction(RT-PCR) and the nucleotide and amino acid sequences were analyzed following cloning of the HN gene. In all of the NDV strains studied, a 1.75 kb size cDNA fragment for the HN gene was generated by RT-PCR and smaller specific band sizes harboring the internal portions of the HN gene were also detected by using four pairs of primers. The RT-PCR was sensitive enough to detect viral transcripts when the virus titer was above 25 hemagglutination units. The amplified 1.75 kb cDNA was cloned into a BamHI site of the pVL1393 Baculo transfer vector. The nucleotide sequences of the 1,758 bp HN gene from the CBP-1 strain were determined by the dye terminator cyclic sequencing method. The gene sequences were compared among the strains of CBP-1, Texas GB, Beaudette C, LaSota, B1 and Ulster. The homology of the CBP-1 HN gene to other HN variants was 97.8% to Texas GB, 98.4% to Beaudette C, 95.4% to LaSota, 95.6% to B1 and 90.2% to Ulster. As the deduced 577 amino acid sequences were compared among the strains, the homology for CBP-1 HN appeared to be 96.7% to Texas GB, 97.9% to Beaudette C, 95.5% to LaSota, 95.5% to B1 and 92.7% to Ulster. It was evident that the amino acid sequences included 5 sites for N-asparagine linked glycosylation and 12 cysteine residues. The three conserved leucine residues within the predicted transmembrane domain of the HN protein are amino acid 30, 37 and 44. The three antigenic sites on the HN protein of NDV are amino acids 347(Glu), 481(Asn) and 495(Glu). These data indicate that the genotype of the CBP-1 strain is more closely associated with the strains of Texas GB and Beaudette C than it is for the LaSota, B1 and Ulster strains.
Detection of antibody against pathogenic fungi in serum specimens of the patients with pulmonary tuberculosis or other lung diseases has been carried out(male) using the indirect fluorescence antibody technique and immunodiffusion tests. Immunodiffusion tests revealed that 104(36.5%) out of 285 patients examined showed a positive precipitin reaction against one or more of fungal antigens. The majority of ID positive patients 64(61.5%) reacted with Aspergillus fumigatus antigen and 49(47.1%) patients reacted with Candida albicans antigen ID positive reaction to A. fumigatus was found little more frequently among male patients, while Candida albicans reactors were found more frequently among female patients. Age distribution of ID positive reactors was high(49.1-43.3%) in age group of 40-59 years, but least or none in age group of less than 30 years. Age of fungal mycelium used as antigen did not effect sensitivity of the indirect flubrescence (IF) technique in detecting antibody to A. fumigatus. Antibody class against A. fumigatus that showed highest titer was IgG and thus FITC labeled anti-IgG immunoglobulin shoul be preferable. As relatively large amount of cell wall components of Aspergilli shared antigenically, a considerable cross-reaction was observed among A. fumigatus, A. flavus and A. niger, but not much with C. albicans. While (IF) has much better sensitivity when compared with ID, relative specificity of the latter procedure cannot to be overried, so that they could be batter used together in order to obtain quantitative measurement of antibody with relative specificity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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