The collagenase gene from Vibrio parahaemolyticus 04 was subcloned into an expression vector pET-29b. The recombinant collagenase was expressed in Escherichia coli BL2l(DE3) and partially purified by Hi-Trap affinity and Sephacryl S-100 size exclusion chromatographies. The recombinant enzyme was purified by 43.7-fold and the yield was 73%. SDS-PAGE revealed that the molecular weight of the enzyme was approximately 35 kDa. Substrate specificity study of the enzyme displayed that the enzyme showed the highest activity with the type I collagen and the synthetic peptide, Z-GPGGPA, indicating that the enzyme was indeed a collagenase. The enzyme showed broad pH optimum around pH 6-12 and was stable between pH 5.5 and 11.5. The optimum temperature for the type I collagen degradation was $35^{\circ}C$. The thermostability measurement of the enzyme indicated that the enzyme was stable up to $55^{\circ}C$, but the activity was diminished quickly above $60^{\circ}C.$
Traditional screening techniques have missed up to 99% of microbial resources existing in the nature. Strategies of direct cloning of environmental DNAs comprising tine genetic blueprints of entire microbial metagenomes provide vastly more genetic information than is contained in the culturable. Therefore, one way to screening the useful gene in a variety of environments is the construction of metagenomic DNA library. In this study, the water samples were collected from Daecheong Reservoir in the mid Korea, and analyzed by T-RFLP to examine the diversity of the microbial communities. The crude DNAs were extracted by SDS-based freezing-thawing method and then further purified using an $UltraClean^{TM}kit$ (MoBio, USA). The metagenomic libraries were constructed with the DNAs partially digested with EcoRI, BamHI, and SacII in Escherichia coli DH10B using the pBACe3.6 vector. About 14.0 Mb of metagenomic libraries were obtained with average inserts 13 ${\sim}$ 15 kb in size. The genes responsible for degradation of 1, 2-dichloroethane (1, 2-DCE) via hydrolytic dehalogenation were identified from the metagenomic libraries by colony hybridization. The 1, 2-dichloroethane dehalogenase gene (dhlA) was cloned and its nucleotide sequence was analyzed. The activity of the 1, 2-DCE dehalogenase was highly expressed to the substrate. These results indicated that the dhlA gene identified from the metagenomes derived from Deacheong Reservoir might be useful to develop a potent strain for degradation of 1, 2-DCE.
A fluidized bed reactor made of quartz with 0.055m I.D. and 1.0m in height was employed for the thermocatalytic decomposition of propane to produce $CO_2-free$ hydrogen. The fluidized bed was proposed for the continuous withdraw of product carbons from the reactor The propane decomposition rate used carbon black DCC-N330, Hi-900L as a catalyst. The propane decomposition reaction was carried out at the temperature range of $600-800^{\circ}C$, propane gas velocity of $1.0U_{mf}$ and the operating pressure of 1.0 atm. Effect of operating parameters such as reaction temperature on the reaction rates was investigated. Resulting production in our experiment were not only hydrogen but also several by products such as methane, ethylene, ethane, and propylene.
Osmotically sensitive fungal protoplasts were liberated from the mycelium of several kinds of molds by mixed enzyme system of cellulase from Trichoderma viride $TO_4$ and chitinase from the culture filtrate of Streptomyces sp. 115-5. Relatively higher number of protoplast were released from young mycelium of Zygomycetes strains than Ascomycetes strains by using 10 mM phosphate buffer (pH 6.0) and 0.6 M NaCl as osmotic stabilizer. Protoplasts were released through ruptures in the wall, initially at the apices, but later also from old party of the hyphae.
Renchinkhand, Renchinkhand;Bae, Hyoung Churl;Jeong, Seok Geun;Nam, Myoung Soo
Korean Journal of Agricultural Science
/
v.39
no.4
/
pp.561-568
/
2012
The aim of this study was to introduce a simple method for isolation of ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin and bovine serum albumin from cow's milk, and peptides produced by enzymatic hydrolysis of ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin and bovine serum albumin with alcalase. Whey protein were precipitated from whey by ammonium sulfate and, ${\alpha}$-lactalbumin and ${\beta}$-lactoglobulin were isolated using Hi Prep 26/60 Sephacryl S-100 column gel filtration chromatography. Bovine serum albumin and ${\beta}$-lactoglobulin were isolated by Mono-Q 5/50 GL column anion exchange chromatography of the 50% Ammonium Sulfate-supernatant. Isolated whey proteins were hydrolyzed by proteolytic alcalase. Tricine SDS-PAGE and reverse-phase HPLC analyses revealed that almost hydrolyzed all the ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin and bovine serum albumin with alcalase. Molecular weight of various peptides derived from alcalase hydrolysate were small molecular weight than 3.5 kDa.
Park, Junkyu;Nam, KiJeon;Heo, SungKu;Lee, Jonggyu;Lee, In-Beum;Yoo, ChangKyoo
Korean Chemical Engineering Research
/
v.58
no.2
/
pp.235-247
/
2020
Simulation study and validation on 50 L/hr pilot-scale Bunsen process was carried out in order to investigate thermodynamics parameters, suitable reactor type, separator configuration, and the optimal conditions of reactors and separation. Sulfur-Iodine is thermochemical process using iodine and sulfur compounds for producing hydrogen from decomposition of water as net reaction. Understanding in phase separation and reaction of Bunsen Process is crucial since Bunsen Process acts as an intermediate process among three reactions. Electrolyte Non-Random Two-Liquid model is implemented in simulation as thermodynamic model. The simulation results are validated with the thermodynamic parameters and the 50 L/hr pilot-scale experimental data. The SO2 conversions of PFR and CSTR were compared as varying the temperature and reactor volume in order to investigate suitable type of reactor. Impurities in H2SO4 phase and HIX phase were investigated for 3-phase separator (vapor-liquid-liquid) and two 2-phase separators (vapor-liquid & liquid-liquid) in order to select separation configuration with better performance. The process optimization on reactor and phase separator is carried out to find the operating conditions and feed conditions that can reach the maximum SO2 conversion and the minimum H2SO4 impurities in HIX phase. For reactor optimization, the maximum 98% SO2 conversion was obtained with fixed iodine and water inlet flow rate when the diameter and length of PFR reactor are 0.20 m and 7.6m. Inlet water and iodine flow rate is reduced by 17% and 22% to reach the maximum 10% SO2 conversion with fixed temperature and PFR size (diameter: 3/8", length:3 m). When temperature (121℃) and PFR size (diameter: 0.2, length:7.6 m) are applied to the feed composition optimization, inlet water and iodine flow rate is reduced by 17% and 22% to reach the maximum 10% SO2 conversion.
The acid-catalyzed hydrolysis reaction of poly(vinyl acetate) (PVAc) in water/acetic acid solution at $35^{circ}C$ was studied at two different solvent compositions. The mole fractions of vinyl acetate (Vac) and vinyl alcohol (VA) during the course of the reaction were determined by NMR, and the equilibrium constant $K_{eq}$ of the reaction was determined using the molar ratio of VAc to VA at the chemical equilibrium. $K_{eq}$ was 0.75 (${\pm}0.01$) when the VAc mole faction at the equilibrium was 0.78 (${\pm}0.01$) and it was 0.69 (${\pm}0.01$) when the VAc mole fraction was 0.57 (${\pm}$0.02). The reaction was found to be a pseudo 1-st order reaction with the rate coefficient at $3.4{\times}10^{-6}/sec$.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
/
v.10
no.6
/
pp.1287-1291
/
2009
The genes of cyanide hydratase(CHT), a kind of nitrilases whichhydrolyze cyanide to formamide were extracted from N. crassa and A. nidulans, the two fungal strains. The recombinant forms of the CHT originated from N. crassa and A. nidulans were prepared with N-terminal hexahistidine purificationtags or no tags, and expressed in E. coli. The enzymes were purified using immobilized metal affinity chromatography. They were compared according to their pH activity profiles, and kinetic parameters. The N. crassa CHT has the wider pH range of activity above 50% and three-fold higher turnover rate (6.6 ${\times}$$10^8$$min^{-1}$) than the A. nidulans, meanwhile the CHT of A. nidulans has the higher $K_m$ value. Expression of CHT in both N. crassa and A. nidulans were induced by the presence of KCN, regardless of any presence of nitrogen sources. Max. 82% of KCN was degraded in 60 min for biological degradation tests.
This study examined the enzymatic digestion, average molecular weight distribution and structural changes of Bombyx mori silk gland fibroin using gel penneation chromatography and nuclear magnetic resonance methods. The pure-separation of calcium chloride-treated fibroin hydrolysates was carried out by gel filtration chromatography. Also, the effects of fibroin's enzymatic hydrolysis were investigated using an edible enzyme. The average molecular weight of three hydrolysate samples (silk gland fibroin (SF), SF-calcium chloride (SFC), and SFC-enzyme) were measured to compare their characteristics. The molecular weights of SF, SFC, and SFC-enzyme were approximately 108,000, 65,000, and 1,000 Da, respectively. Finally, we determined the structural characteristic changes of the different enzymatically digested samples by $^{13}C$ nuclear magnetic resonance methods. For the enzymatically digested fibroin, the glycine $^{13}C^{\alpha}$ resonance indicated that the amino acid was dramatically changed and/or separated out; however, this was not shown for the normal Bombyx mori silk gland fibroin.
SI process is a thermochemical process producing hydrogen by decomposing water while recycling sulfur and iodine. Various technologies have been developed to improve the efficiency on Section III of SI process, where iodine is separated and recycled. EED(electro-electrodialysis) could increase the efficiency of Section III without additional chemical compounds but a substantial amount of $I_2$ from a process stream is loaded on EED. In order to reduce the load, a crystallization technology prior to EED is considered as an $I_2$ removal process. In this work, $I_2$ particle sinking behavior was modeled to secure basic data for designing an $I_2$ crystallizer applied to $I_2$-saturated $HI_x$ solutions. The composition of $HI_x$ solution was determined by thermodynamic UVa model and correlation equations and pure properties were used to evaluate the solution properties. A multiphysics computational tool was utilized to calculate particle sinking velocity changes with respect to $I_2$ particle radius and temperature. The terminal velocity of an $I_2$ particle was estimated around 0.5 m/s under considered radius (1.0 to 2.5 mm) and temperature (10 to $50^{\circ}C$) ranges and it was analyzed that the velocity is more dependent on the solution density than the solution viscosity.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.