목 적 : 소아 HBV 만성 감염 환자들에 대한 연속적인 임상적 소견, 생화학 검사 및 혈청학적 표지자의 변화를 분석하여 이들간의 연관성을 알아보았다. 방 법 : 1995년 7월 1일부터 2000년 6월 30일까지 5년간 가톨릭대학교 성빈센트병원 소아과를 방문하여 6개월 이상 추적이 가능하였던 HBV 만성감염 소아 90명을 대상으로 하였다. 이들 모두는 HBV 표지자인 HBsAg, anti-HBs, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgG와 간기능 검사를 시행하였다. 결 과 : 첫 내원시 대상 모두가 무증상이었고 HBV 만성 감염의 가족력이 83%에서 있었다. HBeAg 양성이 81%, HBeAg 음성, anti-HBe 양성이 16%, HBeAg, anti-HBe 모두 음성인 경우가 3%로 성별간의 차이는 없었고, 대상군의 연령을 0~5, 6~10, 11~15세로 나누었을 때 HBeAg 양성은 각각 90%, 96%, 61%로 10세 이하의 양성률이 11~15세에 비해 의미있게 높았다(P=0.001). 혈청 ALT치는 40 IU/L 이하, 41~80 IU/L, 81~200 IU/L, 201 IU 이상인 경우가 각각 64%, 17%, 10%, 9%이었고 HBeAg 양성군이 음성군에 비해 ALT의 비정상인 경우가 의미있게 많았다(P=0.036). HBeAg에서 anti-HBe로 전환된 경우가 73명 중 11명에서 발생하였고 이들 모두에서 anti-HBe의 전환 전에 ALT치의 증가가 관찰되었다. HBeAg 및 HBsAg의 연간 자연소실율은 각각 9.7%, 0.6%이었다. 결 론 : HBV 표지자 및 생화학적 검사치의 변화양상을 숙지하는 것은 이와 관련된 연구를 시행할 때 대상을 선정하고 또한 질환에 대한 치료 여부, 치료제의 선택 및 효과를 검토할 때 필요한 사항이며 각 개인의 HBV 만성 감염의 악화 예후인자를 찾기 위하여 증상이 없더라도 보유자에 대한 계속적인 관찰은 매우 중요하다고 생각된다.
To investigate the annual distribution of hepatitis B surface antigen(HBs Ag) in healthy adults, this study was performed by means of counter-immunoelectrophoresis with sera obtained from 4,856 healthy adults who reside in Seoul and Gyunggi-Do area from January to December, 1981. The experimental procedures were same with the previous reports. The subjectives were consisted of two groups: one is mass life group(3.853 adults) and the other, home life group(1.003 adults). The results were as follows: 1. Among the 4.856 cases tested, 326 cases(6.71%) showed HBs Ag positive. HBs Ag positive rates in the group of mass life and home life were 6.51% and 7.48%, respectively. 2. It showed slightly high positive rates in the home life and long term duration group, and upper class group showed slightly high positive rate. 3. In seasonal variation, it showed relatively high positive rate(7.38%) in winter, and A blood group showed higher rate(7.60%) than the other blood groups. And then, boundary area of Seoul city showed slightly high positive rate(7.36%) in areal distribution.
In order to elucidate the prevalence of anti-HEV, anti-HCV and HBsAg in ALT (Alanine Aminotransferase)-elevated patient group and healthy person control group, we examined anti-HEV, anti-HCV and HBsAg in 92 persons, respectively. The prevalence of anti-HEV in ALT-elevated patient group (4.3%) was not significantly higher than that (2.2%) of healthy person control group(P>0.05). While in healthy person control group the prevalence of anti-HEV in female (2.4%) was higher than that (2.0%) in male, and in ALT-elevated group male (4.8%) was higher than female (3.3%), there were no significances. The positive rate of anti-HEV was not significantly increased with age between healthy person control and ALT-elevated patient group. The odds ratio's of HEV, HCV and HBV with ALT-elevated patient group were 2.05 (95% CI: 0.31-16.54), 8.67 (95% CI: 1.06-188.63) and 7.23 (95% CI: 2.47-22.71), respectively, but had no significance. It was turned out that HCV and HBV were significantly correlated with ALT-elevated patient group, but HEV had no significance with it in this paper.
In this report, we describe the high-yield secretory expression of the recombinant human anti-HBsAg Fab fragment from Pichia pastoris that was achieved by co-integration of the genes encoding the heavy and light chains (both under the control of alcohol oxidase promoter) into the genome of the yeast cells. The fed-batch fermentations were carried out in a 5 L scale. Both chains of the Fab were successfully expressed upon methanol induction. The absorbance ($OD_{600}$) of the broth can reach 350~500 at the end of fed-batch phase. After the induction, the expression level of the recombinant Fab (soluble) reached 420~458 mg/L. The recombinant Fab fragment was purified from the crude culture supernatant by ion exchange chromatography and the purity of the recombinant Fab fragment was over 95%. The affinity activities of the crude fermentation supernatant and the purified Fab were analyzed by indirect ELISA, which showed that the purified recombinant Fab fragment had high affinity activity with hepatitis B surface antigen.
The author was performed to investigation of current status of prevalence for anti-hepatitis C virus (HCV) among the health-checkup adults in Jeonbuk province. A toal of 1,553 (male 1,046, female 507) serum samples were diagnosed by 3rd generation enzyme immunoassay (EIA) for anti-HCV. Total prevalence of anti-HCV was 0.9%, and prevalence of male and female were 0.8% and 1.2%, respectively. The prevalence of female was higher than male. According to ages group, prevalence of anti-HCV was highest in 60 age group, but it was not found in 20 age group. 14 samples with anti-HCV positive were diagnosed by EIA for hepatitis B virus surface antigen (HBs Ag), by chemiluminescence immunoassay (CLIA) for serum albumin, alanine transaminase (ALT) and asparagine transaminase (AST). Positive for HBs Ag was not found. The mean of serum albumin levels was 4.5 g/dL, and mean of ALT and AST were 34.3 IU and 31.9 IU, respectively. Through this study, I know that the prevalence of anti-HCV among adults in Jeonbuk, and suggest that the positive of anti-HCV persons who have lower serum albumin, normal to mild elevations in serum enzymes are chronic hepatitis.
미나리의 엽조직을 agroinfiltration 및 동시배양을 수행하기 전에 NaOH 용액에서 3 min 처리를 실시하였다. MTT를 이용한 세포사멸실험에서 0.7% NaOH 용액처리까지는 엽조직 세포활성에 안전한 것으로 판단되었다. GUS 효소활성의 형광분석 결과 0.5% NaOH를 처리한 미나리 엽조직에 대하여 Agrobacterium cells ($OD_{600}=0.5$에서 1.0)을 이용한 vacuum infiltration (20 min)을 실시할 경우 효율적 형질전환이 이루어짐을 알 수 있었다. 이러한 조건은 western blotting과 ELISA에 의한 HBsAg의 발현 검정에서 확인할 수 있었다.
목 적: 소아 만성 B형간염의 치료제로 interferonalpha(IFN)가 널리 이용되어 왔으며 약 30~40%에서 치료효과가 나타나는 것으로 보고되어 왔다. 그러나 우리나라에서 소아를 대상으로 IFN 치료를 시행한 후 장기 추적관찰을 통한 연구는 충분히 이루어지지 않은 상태로, 본 연구에서는 소아 만성 B형간염에서의 IFN 치료 효과와 그에 영향을 미치는 요인들을 장기 추적하여 분석하고자 하였다. 방 법: 1982년 5월부터 2002년 7월까지 약 20년 동안 연세의대 세브란스병원 소아과에 내원하여 HBsAg, HBeAg 및 HBV-DNA가 6개월 이상 양성 소견을 보여 만성 B형간염으로 진단받은 환아 378 명 중 IFN 치료를 시행받은 113명을 대상으로 하였으며, 남녀 비는 2.3 : 1이었고, 진단 당시의 평균 연령은 $11.1{\pm}4.1$세이었다. IFN은 300만 unit를 주 3회 근육 주사하였으며, 주기적으로 외래에서 B형 간염 표지자와 간기능검사를 시행하였다. 치료받은 환아는 4~114개월($48.1{\pm}33.4$개월) 동안 추적 관찰하였으며, IFN 치료 후 재발한 경우는 lamivudine 또는 IFN 재치료를 시행하였다. 결 과: IFN 치료에 대한 반응은 HBeAg과 HBV-DNA의 음전 및 ALT값의 정상화로 정의하였으며 반응군은 82례(72.6%), 비반응군은 32례(28.3%)로 두 군 간에 임상적으로 유의한 차이는 없었다. IFN 치료 후 HBeAg은 총 113례 중 87례(77%)에서 음전 되었고, anti-HBe는 79례(70%)에서 양전, HBV-DNA는 84례(74.3%)에서 음전되었다. HBeAg, HBV-DNA 모두 음전 된 환아는 82례(72.6%), HBV-DNA 만 음전된 환아는 2례(1.8%)였으며, HBeAg만 음전된 환아는 5례(4.4%)였다. HBsAg은 6례(5.3%)에서 음전, anti-HBs는 11례(9.7%)에서 양전되었다. ALT 값은 91례(80.5)에서 정상화되었다. IFN 치료 후 HBeAg 및 anti-HBe, HBV-DNA, HBsAg 및 anti-HBs의 음전 및 양전이 일어나는 기간을 생명표를 이용하여 통계 분석한 결과 HBeAg의 5년 음전율은 78%, 10년 음전율은 90%로 최고조를 보였으며, anti-HBe는 5년 양전율이 77%, 10년 양전율이 84%로 최고조를 보였다. 또한 치료 후 HBV-DNA의 5년 음전율은 80%였고, 10년 음전율은 88%로 최고조를 이루었다. 또한 HBsAg의 음전율과 anti-HBs 의 양전율은 5년 후 각각 6.7% 및 13%로 최고조를 이룬 후 계속 추적 관찰하는 동안 변화가 없었다. IFN 치료 후 HBeAg의 음전 및 anti-HBe의 양전은 각각 평균 $14.1{\pm}17.0$개월 및 $16.1{\pm}17.7$개월 걸렸고, HBV-DNA의 음전은 평균 $14.2{\pm}14.1$개월이 소요되었다. HBsAg은 단지 5%의 환아에서만 음전되었으며 평균 $14.2{\pm}12.1$개월이 걸렸다. 치료 후 혈청 ALT값이 정상화 되는 데는 평균 $11.1{\pm}14.4$개월이 걸렸다. 시간의 경과에 따른 치료 전 혈청 ALT값, HBV-DNA값, 치료 전 환아의 연령이 B형 간염 표지자의 반응에 미치는 영향을 Cox model로 분석한 결과, 치료 전 ALT값이 높을수록 HBV-DNA가 통계학적으로 가장 의미 있게 음전되었다(p=0.027). HBeAg과 anti-HBe는 통계학적으로 의미는 없었으나 치료 전 혈청 ALT값이 높을수록 음전(p=0.18) 및 양전(p=0.079)이 증가되는 경향을 보였다. 기타 치료 전 혈청 HBV-DNA값과 연령은 B형간염 표지자의 반응에 미치는 영향은 통계학적으로 의미가 없었다. IFN 치료 후 총 82례의 반응군 중 11례(13.4%)에서 재발하였다. 이중 3례에서 lamivudine 치료를 시행하였으며, 2례에서 치료에 반응하였다. 3례에서는 IFN를 재치료하여 이 중 1례에서 치료 효과가 있었으며, 나머지 3례는 특별한 치료 없이 표지자들이 혈청변환(seroconversion)되었다. IFN 치료에 반응을 보이지 않거나 재발된 총 9례에서 lamivudine 치료를 시행하였으며, 이 중 3례(33%)에서 혈청변환이 있었다. 결 론: 소아 만성 B형간염에 대한 IFN의 치료효과를 10년간 장기 추적한 결과 B형간염 표지자의 혈청 변환율이 72.6%로 높은 치료 반응률을 보이고, 또한 재발률이 13.4%로 비교적 낮은 훌륭한 치료제로 확인되었다. 그러나 HBsAg 음전율은 5.3%에 불과하기 때문에 향후 IFN 치료가 소아 만성 B형간염의 간질환 합병증, 간세포암 발생률 및 생존율에 미치는 영향에 대한 장기적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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