북방전복에서 난자형성과정 동안 생식세포는 조직학적 특징에 따라 난원세포 (oogonium), 난황형성전기 난모세포(previtellogenic oocyte), 난황형성개시기 난모세포 (initial vitellogenic oocyte), 난황형성초기활성기 난모세포 (early active vitellogenic oocyte), 난황형성후기활성기 난모세포(late active vitellogenic oocyte) 및 완숙기 난모세포 (ripe oocyte)로 구분할 수 있다. 난자형성과정 동안 난모세포, 핵 및 인의 크기는 증가하는 경향을 보였으나 핵에 대한 인의 크기 비율은 감소하였다. 난모세포 세포질의 염색성은 H-E 염색에서 호염기성에서 호산성으로 변하였다. 난자형성과정 동안 난모세포에서 난병과 젤리층의 외막이 발달되었다. 이러한 조직학적 변화는 난모세포의 난황축적 및 산란준비과정으로 판단된다.
본 연구는 저염분에 의한 둥근전복, Haliotis discus discus의 생리학적 변화를 조사하기 위하여 실시하였다. 생리학적 변화를 조사하기 위하여 생존율, 혈림프수, 항산화효소, Respiratory burst, Phenoloxidase, Lysozyme의 활성 및 HSP 70 mRNA 발현을 측정하였다. 둥근전복은 우선, 급격한 염분 스트레스에 따른 둥근전복의 생존율에서는 25, 30 psu 실험구에서만 48 h 째에 폐사된 개체가 발견되었다. 혈림프 수의 변화는 실험구 대부분이 시간의 경과에 따라 점차 감소하는 경향을 나타내었으나, 3 h째 30 psu에서 급격한 증가가 나타난 후 다른 실험구간의 수치와 유사한 수치로 회복되는 경향을 나타내었다. 항산화 효소인 Superoxide Dismutase (SOD)와 Catalase (CAT) 효소는 25 및 30 psu에서 높은 수치를 나타내어 저염분으로의 변화가 둥근전복의 SOD 및 CAT의 증가를 유발시키는 것으로 나타났다. 한편, Respiratory burst 활성은 실험 기간 동안 큰 변화를 나타내지 않았다. 그러나 면역활성을 나타내는 Phenoloxidase은 염분 감소 의존적으로 감소하는 경향을 나타내어, 면역력의 저하를 유발하는 것으로 나타났다. Lysozyme의 활성에 있어서도 Phenoloxidase 활성의 변화와 같은 저염분 정도에 의존하는 경향은 나타내지 않았으나, 25 psu 48 h째에 급격한 저하를 나타내었다. 저염분의 스트레스를 가하여 나타난 HSP 70 mRNA의 염색성은 가장 낮은 염분농도인 25 psu에서는 지속적으로 관찰되었으나, 33 psu에서는 염색성이 낮게 나타났다. HSP 70 mRNA에 대한 $\beta$-actin mRNA의 발현량은 33 psu에서는 실험기간 중 거의 일정하여 스트레스를 받지 않은 것으로 나타났으며, 25 psu에서는 시간의 경과에 따라 증가하다가 다시 감소하여 회복되는 결과를 나타내었다 이상의 결과로, 저염분 현상은 둥근전복에 있어서 주로 Phenoloxidase 및 Lysozyme의 면역계 활성을 낮추는 작용을 통하여 생존에 악영향을 미칠 가능성이 있는 것으로 추정된다. 또한 저염분에 의해 발생되는 항산화효소는 스트레스의 지표로 써 활용할 수 있을 것으로 여겨진다.
Karyotype analysis is a major work in the process of triploid abalone production for the purpose of productivity and quality improvement. However, the metaphase spreads for karyotype analysis have been prepared just from the larvae at trochophore stage, which has restricted the spectrum of sample correction inhibiting more efficient analysis. Here, we investigated the feasibility of preparing metaphase spreads from the larvae at veliger stage that is the next developmental stage of trochophore. For this, diploid and triploid larvae at trochophore and veliger stages from Pacific abalone (Haliotis discus hannai) were subjected to metaphase spread preparation and its efficiencies were measured and compared each other. As the results, although the efficiencies of metaphase spread preparation were significantly lower in the larvae at veliger stage compared to the ones at trochophore stage regardless of ploidy status, we found that the preparation of metaphase spreads, which showed the clear chromosomal images containing the normal number of chromosomes, was possible from the veliger stage larvae. On the other hands, all larvae used in this study regardless of developmental stage and ploidy did not show colchicine sensitivity. Moreover, no significant difference was observed in cell cycle distribution of the cells comprising larvae between two developmental stages regardless of ploidy status. These suggested that the details of protocol to prepare metaphase spreads from abalone larvae should be optimized depending on its developmental stages. Taken together, we demonstrated the feasibility of preparing metaphase spreads from H. discus hannai veliger stage larvae for karyotype analysis.
An 8-week feeding experiment was conducted to determine the influence of dietary distillers dried grain (DDG) on the growth and body composition of juvenile abalone Haliotis discus hannai. Five diets were formulated to contain 0% (DDG0), 15% (DDG15), 30% (DDG30), 45% (DDG45), and 60% (DDG60) DDG, and three replicate groups of abalone (average body weight: $3.6{\pm}0.21$ g) were fed one of the experimental diets at a feeding rate of 5% body weight per day once daily (17:00 h) for 8 weeks. Survival, shell length, and shell width of juvenile abalone were not affected by dietary DDG levels (P > 0.05). Weight gains of juvenile abalone fed DDG15 and DDG30 diets were not different compared to DDG0, but abalone fed DDG45 and DDG60 diets gained less weight than those fed DDG0 (P < 0.05). Soft body weight/body weight ratio of juvenile abalone fed the DDG60 diet was lower than that of those fed the DDG0 diet (P < 0.05), but proximate composition of the soft body was not affected by dietary DDG levels (P > 0.05). The results of this experiment suggest that DDG is a good replacement for wheat flour and soybean meal, and can be used up to 30% in the diet to maintain the growth performance of the juvenile abalone.
In 2006, we studied herbivore consumption rate and preference for algal species using laboratory experiments. In the no-choice feeding experiment, three herbivores (two sea urchins, Stronglyocentrotus nudus and Stronglyocentrotus intermedius and an abalone, Haliotis discus hannai) showed significantly (P<0.05) distinct preferences for four algae (Laminaria japonica, Undaria pinnatifida, Costaria costata and Ecklonia stolonifera). The alga preferred by S. nudus was L. japonica followed by U. pinnatifida, C. costata and E. stolonifera with respective daily feeding rates of $5.7{\pm}:0.85\;g,\;4.4{\pm}0.89\;g,\;3.1{\pm}0.39\;g\;and\;2.1{\pm}0.32\;g(mean{\pm}SE)$. A similar trend was found for S. intermedius. Interestingly, the herbivore consumption rates for the algae differed with or without competition. The competition stimulated the feeding activity for S. nudus, but lowered the activity for S. intermedius. The multi-choice feeding experiment confirmed that L. japonica was significantly preferred by two herbivores: S. nudus and H. discus hannai (Duncan's multiple range test, ANOVA, p<0.05).
본 연구는 북방전복 육상 수조 내 고밀도 중간양성 방법을 모색하기 위해 부착면적 확대를 위해 다단식 shelter 설치와 수조 내 중층 이상의 가두리를 설치하여 성장을 비교하고 아울러 전복류 육상 양성방법인 'shallow race way' 국내 도입 가능성을 조사하였다. Shelter 실험구는 PE (polyethylene) 재질의 shelter ($63{\times}98cm$) 1층형 (the single layer shelter, SLS), 2층형 (the double layer shelter, DLS), 3층형 (the triple layer shleter, TLS) 과 육상 가두리 양성방식 (the single layer shelter and net cage culture, SLSNC), 그리고 'shallow race way' 방식을 polyvinyl chloride (PVC)로 제작하여 고랑수로양성 (culture of the ditch raceway tank, CDRT)과 편평한 수로양성 (culture of the floor raceway tank, CFRT) 방식을 설정하였으며, 실험구는 모두 2반복으로 실시되었다. 각 실험구별 SLS 기준 60%밀도로 수용한 실험 전복 (최초 수용 시 평균각장 $25.19{\pm}0.50mm$, 중량 $1.93{\pm}0.14g$), 성장에서 각장의 절대성장율 (absolute growth rate, ARG), 일간성장율 (daily growth rate, DGR) 및 순간성장율 (specific growth rate, SGR) 과 중량의 증중률 (weight gain, WG), 일간증중률 (daily weight gain, DWG) 에서 SLSNC 제외한 모든 실험구가 유의적인 차이가 없었다. 그리고 생존율에서는 CDRT와 CFRT가 유의적으로 낮았다 (P < 0.05). 따라서 shelter를 이용하여 부착면적을 확대한 고밀도 전복치패 육상 중간육성 사육 시 단층과 다단층에서 성장과 생존율에서 차이가 없으며, 호주 등에서 사용되는 shelter 없는 'shallow race way'의 얇은 수심사육은 국내 북방전복 육상 중간양성 방식으로 도입하기에 적합하지 않는 것으로 판단된다.
전복속에 속하는 종은 아시아를 포함한 세계에 광범위하게 서식한다. 전복속 종은 한국과 중국에서는 식용뿐만 아니라 약용으로도 이용된다. 한국내 전복속(genus Haliotis)에 속하는 분류군에 대해 ITS에 의한 계통관계를 조사하였다. 전복속 전체 종에서 5.8S exon은 160 핵산서열로 일정하였다. ITS1은 종에 따라 다양하였는데, 오분자기(H. diversicolor aquatilis)에서 272 핵산서열인 반면, 시볼트전복은 294 핵산서열이었다. ITS2 핵산서열 역시 종에 따라 다양하였다. 전체 서열은 오분자기는 722 핵산서열인 반면, 시볼트전복은 752 핵산서열이었다. ITS 전체 서열은 763 핵산서열에서 78개는 절약법에 정보적이었고, 57개는 변이로 비정보적이였고, 459는 일정하였다. 오분자기는 다른 전복속 종과 다른 분지를 나타내었다. ITS 서열로 한국내 분류군과 유럽종간 구분이 잘 되었다. ITS 서열로 종 동정에 이용할 수 있었으며, 종의 보전이나 생식질 보전에 기초로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Two species of fish and five species of marine invertebrate showed different tolerances to the toxicity of composite slag and bituminaus coal. Especially, Hemicentrotus pulcherrimus and young Haliotis discus hannai displayed marked differences in tolerance from. H. pulcherrimus and young H. discus hannai showed lethal effects at higher concentrations than those concentrations of the composite slag in the 1.0 and $0.4\%$ range, respectively. H. pulcherrimus showed no lethal effects at a lower concentration of $1.0\%$ composite slag and some differences in the rate of oxygen consumption with this concentration of composite slag. The lethal effects of bituminous coal on marine and fisheries organisms, even with higher concentrations, were not observed. At a higher concentration than that of 500 mg/L (ppm) of bituminous coal, decrease effects appeared in the rate of oxygen consumption of the experimental organisms. Taking into consideration that the experimental concentration of composite slag and bituminous coal were impracticable in the ocean, the results of this experiment suggest that composite slag and bituminous coal pose no real threat to marine or fisheries organisms.
In present study, attempts were made to preserve abalone (Haliotis discus hannai) sperm in liquid form at low temperature, to evaluate the effect of various diluents in short-term storage on sperm, and cryopreservation procedures were optimized for the cryoprotectants as well as freezing rates, in terms of the motility and survival rate, and the ultrastructural changes of sperm after short-term storage and cryopreservation were observed. The abalone sperm reached maximum motility until about 4min after activation. The motility was constant for about 16min, after which it dropped gradually, and about 50min later all motility ceased. Threshold activation of sperm was found in 40% artificial seawater (ASW), and motility increased as the concentration of ASW increased. In Hanks balanced salt solution without calcium (Ca-Free HBSS, 300 and 400 mOsmol/kg) and 10%, 20%, and 30% ASW the sperm was immotile, and motility once again restored incompletely only in HBSS of 300 and 400 mOsmol/kg, 20% and 30% ASW after 100% ASW was added. Sperm motility was extended following 20 days of cold storage only in 70% and 100% ASW. A high motility index of 3.5-4.5 was observed for the first 8 days in 70% and 80% ASW. In other diluents sperm motility was constant less than 10 days, and the motility index was obviously lower than that of sperm in 70% and 100% ASW. After 20 days of cold storage survival rates of 10.2%-20.7% were obtained in ASW and 300 mOsmol/kg HBSS, and that in 400 HBSS (65.3%) was significantly higher than others. The constant period of sperm motility stored in 70% ASW was longer obviously than that in 100% ASW after 6 days of storage, and the time to maximum motility of sperm stored in 70% increased gradually, while the difference in which of sperm in 100% ASW was not significant. The sperm plunged into liquid nitrogen all died except that sperm using 15% glycerol as cryoprotectant restored 10.4% of motility. The highest motility index (3.4) was obtained with 5% glycerol and freezing procedure: $50^{\circ}C$/min from $20^{\circ}C$ to $-80^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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