• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제6권4호
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• pp.180-186
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• 2003

The full-length cDNA encoding the pre-protein growth hormone (sfGH) from spotted flounder (Verasper variegatus) was amplified by the rapid amplification of cDNA ends (RACE) using degenerated oligonucleotide primers derived from conserved growth hormone sequences. It consists of 901 nucleotides in length, including the coding region of 609 nucleotides, 111 nucleotides of a 5' untranslated region, and 181 nucleotides of a 3' untranslated region. The conserved polyadenylation signal (AATAAA) lies 12 bases upstream from the poly (A) tail. The deduced amino acid sequence shows an open reading frame encoding a pre-protein of 203 amino acids and a putative signal peptide of 17 amino acids, suggesting that the mature hormone consists of 186 amino acids. The analyses of sfGH reveal some unique structural features. The repetitive sequences are located in the 5' untranslated region of sfGH cDNA and consist of tandem arrays of imperfect direct repeat monomers. Moreover, sfGH contains six Cys residues, as opposed to four or five in other GHs, and it is clearly distinguishable from olive flounder (Paralichthys olivaceus) GH, which lacks a region corresponding to residues 175-188 in alignment positions. It has important implications from an evolutionary standpoint, suggesting possible divergence among flatfishes.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제6권4호
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• pp.306-308
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• 2001

A recombinant human growth hormone(hGH) was expressed as a secretory product in the yeast Saccharomyuces cerevisiae. There different leader sequences derived from the mating fac-tor $\alpha$1(MF$\alpha$1) inulinase and invertase were used to direct the secretion of hGH into the extracel-lular medium. Among three leader sequences tested, the inulinase leader sequence was found to be the most efficient in the secretory expression of hGH. In contrast, no hGH was detected in the ex-tracellular medium with the invertase leader sequence. After 48 h shake-flask culture, the yields of hGH secreted into th emedium by the invertase. MF$\alpha$1 inulinase and invertase leader sequences were approximately 0, 0.3 and 0.9 mg/L, respectively. The secretion efficiencies were also found to be 0, 3.8 and 13% for the invertase , MG$\alpha$1 and inulinase leader sequences, respectively.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제15권7호
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• pp.1045-1050
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• 2002

The aims of this study were to detect spontaneously occurring apoptosis in cultured porcine ovarian cells, to examine the role of growth hormone (GH), tyrosine kinase (TK), protein kinase G (PKG) and cyclin-dependent kinase (CDK) in the control of this process, and to determine whether the effect of GH on apoptosis is mediated by TK-, PKG- and cdc2-dependent intracellular mechanisms. We studied the action of pGH (10 ng/ml), blockers of TK (genistein, lavendustin, both 100 ng/ml), PKG (Rp-Br-PET-cGMPS, 50 nM; KT5823, 100 ng/ml) and CDK (olomoucine, $1{\mu}g/ml$), as well as combinations of GH with these blockers, on the onset of apoptosis in cultured granulosa cells isolated from antral (3-6 mm) porcine follicles. The functional characteristics of an early apoptotic event, DNA fragmentation, were determined using terminal deoxynucleotidyltransferase (TdT)-mediated dUTP nick end labelling (TUNEL), whilst morphological signs of advanced apoptosis such as pyknosis, chromatin marginalization, shrinkage and fragmentation of nucleus, were detected using routine light microscopy. After culture, some ovarian granulosa cells exhibited DNA fragmentation, which in some cases was associated with morphological apoptosis-related changes (pyknosis, shrinkage and fragmentation of the nucleus). GH significantly reduced the proportion of TUNEL-positive cells. Neither TK nor CDK blockers when given alone, significantly affected the percentage of TUNEL-positive cells although both PKG blockers significantly increased this index. Furthermore, TK and PKG blockers given together with GH, prevented or reversed the inhibitory effect of GH on apoptosis, whilst the CDK blocker olomoucine promoted it. These observations demonstrate apoptosis in porcine ovaries and suggest the involvement of GH, TK, PKG and CDK in the control of this process. They also suggest that the effect of GH on ovarian apoptosis is mediated or regulated by multiple signalling pathways including TK-, PKG- and CDK-dependent intracellular mechanisms.

• 대한치과교정학회지
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• 제30권4호
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• pp.441-452
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• 2000

본 실험은 사람의 치주인대세포에서 에스트로겐과 growth hormone(GH)이 상호 어떠한 작용을 하는지를 규명하는 것이 목적이다. 교정치료를 받고자 내원한 환자중에서 건강한 20대 여자환자들의 상하악 제1소구치를 발거하여 치근의 중간1/3부위에서 긁어모은 치주인대 조직을 배양하여 치주인대세포를 얻었다. 사람의 치주인대세포의 분열증식에 대한 $17{\beta}$-estradiol과 hGH의 효과를 평가하고, 치주인대세포에 $17{\beta}$-estradiol을 전처리한 후 치주인대세포의 분열증식에 미치는 hGH의 효과 변화를 평가하였으며, 치주인대세포에 $17{\beta}$-estradiol을 전처리 하였을 경우 치주인대세포에 서 hGH receptor치 발현 양상의 변화를 평가하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. $17{\beta}$-estradiol이나 humangrowth hormone의 단독처리는 사람의 치주인대세포의 분열종식에 큰 영향을 주지 않는다. 2. $17{\beta}$-estradiol $10^{-12}M$로 전처리한 후 hGH를 투여한 경우 hGH의 농도에 관계없이 사람의 치주인대세포의 분열증식을 증가시킨다. 3. 사람의 치주인대세포에는 hGH receptor가 없으나, $17{\beta}$-estradiol $10^{-12}M$로 5시간 이상 처리하면 hGH receptor가 발현된다. 4. hGH이 사람의 치주인대세포의 분열증식에 미치는 효과는 hGH receptor의 발현과 관련이 있으며 $17{\beta}$-estradiol의 전처리가 치주인대세포에서의 hGH receptor의 발현에 기여함으로써 hGH이 치주인대세포에 작용할 수 있도륵 해준다.비, 상악의 대구치간 너비, 구개정 높이가 상관관계가 있었다.에서 치 아이동은 정상상태보다 촉진될 가능성이 있음을 시사한다.따라 평균마찰력은 유의하게 증가하였다. 6. 브라켓간 거리의 변화에 대한 마찰력의 차이는 교정선의 재질에 따라 차이가 나며, 스테인레스 스틸 교정선은 브라켓간 거리가 감소할 때 마찰력이 유의하게 변화하지 않았으나, NiTi 교정선의 경우는 유의하게 증가하였다. 7. 브라켓내의 교정선의 이동속도에 따라 마찰력은 유의하게 변화하지 않았다. 이상의 결과로 볼 때 교정 치료동안 적정 교정력을 유지하기 위해 자가결찰브라켓, 스테인레스 스틸 교정선과 탄성모듈결찰법을 사용하는 것이 유리하며, 치료시기에 따라서 요구하는 마찰력이 다르므로 상황에 따라 재료를 선택하는 것이 중요할 것으로 사료된다.$, B군에서 $4.3\%$ 감소하였다. 7. 수술로 인한 얼굴폭의 변화는 무시할만한 것으로 판단되나 수술후 얼굴의 길이가 짧아져 상대적으로 얼굴의 폭이 넓어보일 수 있으므로 수술시 이에 대한 충분한 고려 및 환자에 대한 설명이 있어야 한다.로는 4-6세군 ($27.5\%$), 6-8세군 ($19.6\%$), 2-4세군 ($13.7\%$)이 $60\%$이상을 차지하여 초등학교 취학 전에 구순의 반흔을 제거하려 함을 알 수 있었다. 8. 비변형 교정수술시기로는 0-2세군 ($7.1\%$), 2-4세군 ($14.3\%$), 4-6세군 ($21.4\%$), 6-8세군 ($14.3\%$)으로 초등학교 취학이전이 $57.1\%$로서 최근의 조기 치료경향을 반영하는 것으로 보인다. 9. 인두피판술은 평균 6세에 시행되었으며, 수술 시행 시기별의 차이를 보이지 않고 고른 분포를

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제28권4호
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• pp.573-583
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• 2015

B-32 is one of a panel of monoclonal anti-idiotypic antibodies to growth hormone (GH) that we developed. To characterize and identify its potential role as a novel growth hormone receptor (GHR) agonist, we determined that B-32 behaved as a typical $Ab2{\beta}$ based on a series of enzyme-linked immunosorbent assay assays. The results of fluorescence-activated cell sorting, indirect immunofluorescence and competitive receptor binding assays demonstrated that B-32 specifically binds to the GHR expressed on target cells. Next, we examined the resulting signal transduction pathways triggered by this antibody in primary porcine hepatocytes. We found that B-32 can activate the GHR and Janus kinase (2)/signal transducers and activators of transcription (JAK2/STAT5) signalling pathways. The phosphorylation kinetics of JAK2/STAT5 induced by either GH or B-32 were analysed in dose-response and time course experiments. In addition, B32 could also stimulate porcine hepatocytes to secrete insulin-like growth factors-1. Our work indicates that a monoclonal anti-idiotypic antibody to GH (B-32) can serve as a GHR agonist or GH mimic and has application potential in domestic animal (pig) production.

• KSBB Journal
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• 제10권3호
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• pp.271-282
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• 1995

met-hGH로부터 고정화 ApM에 의해 전환된 천 연형 hGH를 등전위점, 소수성, 전하량의 차이에 따라 3회의 일련의 크로마토그래피를 수행하여 정제하고, 정제된 hGH의 특성을 조사하였다. 정제한 hGH의 비활성은 효소면역측정법으로 분석하였을 때 2 2.75IUjmg이었고, hGH 회수율은 14.1%이었다. 정제한 재조합 hGH는 아미노산 조성, 아미노 말단의 15개의 아미노산 서열 분석, 카르복시 말단의 아미노산 분석, 트럽신 가수분해 랩타이드들의 HPLC 분석등을 통해 아미노말단 에치오닌이 제거된 천연 형 hGH임을 알 수 있었고, SDS-PAGE, native­P PAGE, IEF, RP-HPLC, HSGF 등의 분석 결과 정제한 hGH는 상용품보다 순도가 높다는 것을 알 수 있었으며, 뇌하수체 제거 쥐의 체중 증가와 경골성 장폭의 증가를 통한 활성 측정 결과 정제한 hGH는 상용 hGH와 같은 정도의 활성을 냐타내었으며 우혈청 알부민을 주사한 대조군에 비해 뚜렷한 성장 효 과를 나타냈다. 따라서 본 연구에셔 정제한 hGH는 천연형이며, 높은 순도와 우수한 생리활성을 나타내는 것을 알 수 있었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제17권4호
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• pp.375-383
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• 1994

The human growth hormone (hGH) gene uder the control of the rat $\beta$-casein promoter gene was designed to produce transgenic mouse expressed hGH gene in only mammary gland. One hundred seventy two eggs microinjected were transferred to the oviducts of pseudopregnants and 43 offspring were delivered. By Southern blotting hybridization, 3 were transgenic with rat $\beta$-casein/hGH gene. The copy numbers of three transgenic founder were 1, 5, and 15, respectively. A radioimmunoassay was developed to quantitate the amount of expression of the hGH gene in mammary gland of transgenic mice. The amount of hGH was 13.3ng/ml in the lactating milk of one transgenic line, showing predominantly higher than 3.0ng/ml in milk of control mice. Therefore, our findings suggested that $\beta$-casein promoter may induce the tissue specific expression of structural gene.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제52권8호
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• pp.922-929
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• 2009

목 적 : 성장 장애는 영아 및 소아에서 성장 속도가 같은 성별, 연령 보다 현저히 작은 경우를 지칭하며 여러 가지 원인에 의해서 발생할 수 있다. 저신장을 주소로 내원한 환자 중 성장 장애를 보이지만 성장호르몬 자극검사가 정상인 환자들의 임상적 특성 및 성장호르몬 치료에 대한 반응을 알아보고자 하였다. 방 법 : 1990년 1월부터 2008년 6월까지 서울대학교 어린이병원 소아청소년과에 내원한 어린이 중에서 성장속도가 연간 4 cm 미만이면서, 2가지 서로 다른 약제로 성장호르몬 자극검사를 시행하였을 때 정상 소견을 보이는 환자를 대상으로 하였다. SGA군과 AGA군으로 나누어 임상적인 특성을 비교하였으며, 성장호르몬 투여군에 대한 분석을 시행하였다. 결 과 : 총 39명의 환자가 연구에 포함되었으며, 남자가 25명(64%), 여자 14명(36%)이었고, SGA군 11명(28%), AGA군 28명(72%), 성장호르몬 투여군 16명(41%), 비 투여군 23명(59%)이었다. SGA군과 AGA군 모두에서 골연령이 역연령에 비하여 지연되어 있었으나(P=0.028), 두 군간의 차이는 없었다. 모든 환자에서 성장호르몬 자극검사 후 성장호르몬의 최고 농도는 10 ng/mL 이상이었고, clonidine을 사용하였을 때 성장호르몬의 최고농도가 30.4 (6.2, 92.0) ng/mL로 다른 약제에 비하여 유의하게 높았다(P=0.03). 성장호르몬 치료받은 환자 16명의 1년간 성장 속도는 7.7 (4.9, 11.1) cm/yr, 치료 받지 않고 추적관찰 된 6명은 3.7 (2.7, 4.5) cm/yr으로 유의한 차이가 있었다(P<0.001). 또한 성장호르몬 투여군에서 치료 1년 동안 신장 SDS는 0.3 (-0.1, 0.9) 증가하였고(P<0.001), 성장 속도의 변화는 4.8 (2.1, 7.7) cm/yr로 의미있게 증가하였다(P<0.001). 성장호르몬으로 치료받은 환자 중, 치료 후 1년간 성장속도는 SGA군에서 7.1 (5.1, 8.5) cm/yr, AGA군에서 8.2 (4.9, 11.1) cm/yr로 두 군 모두에서 성장호르몬 사용 전 1년 간의 성장 속도보다는 유의하게 증가하였다. 성장호르몬 치료를 시작할 때의 신장의 SDS가 -3 이상인 군과 -3 미만인 군으로 나누어 분석해 보았을 때, 성장호르몬 자극검사시의 IGF-I 농도가 SDS가 -3 미만인 군에서 유의하게 낮게 측정되었다(P=0.023). 결 론 : 성장 속도가 연간 4 cm 미만으로 감소하였으나 성장호르몬 자극검사가 정상인 환자들이 단기간의 성장호르몬 투여로 성장 속도의 증가가 있었으나 이들에서의 장기적인 성장호르몬 효과에 대하여는 향후 더 추적관찰이 필요하다. 또한 이들에서 부분적 인 성장호르몬 저항성 증후군의 가능성이 있으므로, 추후 이러한 환자들을 대상으로 IGF-I 생성 검사를 포함한, GH-IGF-I 축에 대한 검사를 시행하여 성장 장애의 원인을 밝혀야 할 것이다.

• KSBB Journal
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• 제10권3호
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• pp.283-291
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• 1995

Aminopeptidase M(ApM)을 Cellufine Formyl 에 고정화시켜 고정화 효소의 반응특성을 고찰하고, 고정화 ApM을 충진한 column reactor를 이용하여 메치오닐 인간 성장 호르몬(met-hGH)으로부터 천연형 인간 성장 호르몬(hGH)의 연속 생산을 검토 하였다. Cellufine Formyl 19 gel당 2.3mg의 ApM 이 결합되었을 때 met-hGH의 hGH로의 전환능력이 가장 우수하였다. Soluble enzyme과 고정화 효 소의 반응 최적 pH는 7.0, 반응 최적 온도는 $55^{\circ}C$로 통일하였으나 고정화에 의해 pH 벙위가 보다 넓 어졌으며, column reactor에서 연속 운전시 최적온 도 역시 $55^{\circ}C$로 나타났다. Column reactor를 이용 한 천연형 hGH의 연속 생산시 met-hGH가 100% 전환되는 조건에서 hGH 수율과 생산성은 각각 약 77%와 약 0.8mg hGH/ml.h이었다. 반응기 크기 를 5배 증가시켰을 때 두 반융기에서 유속 SV 값이 통일하면 met-hGH 전환율과 hGH 수율이 통일하 였으며, 90일간의 연속 운전 결과로 예측한 column reactor의 반감기는 45t에서 228일, $55^{\circ}C$에서 81 일로 비교척 안정하였다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제15권1호
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• pp.43-47
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• 2012

Growth hormone (GH) transgenesis in fish has the potential to improve aquaculture efficiency and capacity. However, many fast-growing transgenic fish have experienced side effects caused by excess GH expression. To overcome this unwanted issue associated with several GH transgenic mud loach Misgurnus mizolepis lines carrying GH construct driven by a strong ${\beta}$-actin regulator ($pml{\beta}$-actGH), we performed an alternative version of GH autotransgenesis using a weaker but more stable regulator, the mud loach lectin promoter. GH transgenesis with a pmlectGH construct consisting of the mud loach GH gene driven by the 2.3-kb lectin promoter exhibited significant growth stimulation. However, the extent of the growth acceleration in pmlectGH transgenics (six times maximum when assessed 2 months post hatching) was much less than that in transgenic individuals carrying the $pml{\beta}$-actGH construct. Additionally, the extraordinary gigantism that was common in $pml{\beta}$-actGH-transgenic mud loaches was diminished in transgenic loaches harboring the pmlectGH construct. Transgenic founders (pmlectGH) successfully transmitted their transgene into the next generation with up to 41% frequency. Growth stimulation also persisted in the transgenic F1 strains, with a seven-fold increase in maximum body weight at 6 months of age.