표고버섯균사체 고체배양물 분말과 액체배양물 분말을 2:1 (w/w)로 혼합한 시료 (LED로 명명)가 $CCl_4$로 유발된 숫컷 쥐의 간독성을 보호하는 효과에 대해 연구하였다. Vehicle 처리군(0.2 ml 증류수), Control 처리군(0.2 ml 증류수), LED 처리군(LED 100, 200, 300, 400 mg/kg BW을 0.2 ml 증류수에 각각 혼합), 그리고 Silymarin 처리군(200 mg/kg을 0.2 ml 증류수에 용해)의 각 처리군(군당 여섯 마리)에 매일 2주간 투여한 다음, Vehicle 처리군을 제외한 모든 군에 $CCl_4$ ($CCl_4$:corn oil, 1:1 v/v; 0.5 ml/kg BW)를 복부에 주사하였다. 하루가 지난 후에 생화학적 지표성분을 분석하기 위해 혈액과 간 시료를 채취하였다. 모든 LED 처리에 의해 간 SOD, catalase, 그리고 GSH peroxidase의 활성이 증가하였으며, TBARS, tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) 그리고 interleukin-6 (IL-6)가 감소하였다. 그 결과, 혈청중의 GOT, GPT, 그리고 LDH의 활성이 감소하였다. LED의 간 기능 보호효과가 가장 효과적으로 나타난 처리농도는 200 mg/kg BW였다. 이러한 결과로 보아 LED는 $CCl_4$로 유발된 SD 쥐의 간 손상을 보호하며, 이는 LED의 항산화능과 cytokine의 감소에 의한 것이다. 따라서, LED는 사람의 간독성보호를 위해 효과적으로 사용할 수 있을 것으로 생각된다.
본 연구에서는 한방에서 약용으로 사용하고 있는 미나리 재비과에 속하는 다년생 초본으로 백작약의 열수 추출물을 이용하여 LPS로 유발된 급성 간독성에서의 간 보호효과를 나타내는지 살펴보고자 하였다. 간독성이 유발된 쥐의 혈청에서의 GOT, GPT 그리고 LDH의 감소는 백작약 추출물이 간독성으로부터 간을 보호하였음을 보여주며, 간조직에서의 MDA 감소 및 SOD, CAT, GPx의 활성도 증가 역시 백작약 추출물이 간독성으로부터 간의 기능이 회복됨을 볼 수 있었다. 이러한 결과는 백작약 추출물이 LPS로 유발된 급성 간손상에 대한 보호물질로서의 가능성을 확인할 수 있었다.
본 연구에서는 산화적 스트레스로 유도한 시신경 세포사멸에 대한 차조기 물 추출물(PFE)의 효과를 확인하였다. Staurosporine으로 분화된 ssdRGC-5 세포에 buthionine과 glutamate(B/G)로 산화적 스트레스를 유도하였으며, LDH release assay, MTT reduction assay를 통하여 PFE가 농도 의존적으로 B/G에 의한 세포사멸을 억제함을 관찰하였다. 세포사멸의 기전을 연구하기 위해 caspase 활성, 세포 내 ROS 생성량, 세포고사 관련 단백질 발현을 관찰한 결과, B/G에 의해 증가한 ROS 생성량, caspase 활성을 PFE가 억제하였고, 세포질로 방출된 cytochrome c와 미토콘드리아로 이동한 Bax도 감소함을 확인하였다. 이상의 결과로부터 차조기는 산화적 스트레스로 유도된 시신경 세포사멸 과정에서 항산화 효과와 미토콘드리아성 세포사멸을 완화함으로써 세포 보호 작용을 나타냄을 확인하였다.
본 연구 해역에서의 동물성 부유 생물에 의한 NH$_{4}$ 분비율은 0.90에서 2.32$\mu\textrm{g}$ atoms NH $_{4}$ -N.m$^{-3}$.h$^{-1}$의 범위를 보이며, 이에 의해 해 양 기초생산에 필요한 총질소요구량의 3내지 15%을 공급함을 밝혀졌다. 동물성 부 유생물의 습중량 및 단백질량의 정량결과, 외부연안수로 갈수록 그 양이 증가되는 경향을 나타내었다. 동물성 부유생물의 가장 중심적인 생화학적 단위인 GDH의 활 성도를 측정한 결과, 전형적인 Michaelis-Menten 효소기작을 보였다. 단백질 단위 GDH활성도는 본 연구 해역에서 1.5에서 3.2$\mu\textrm{g}$ atoms NH $_{4}$ -N mg$^{-1}$protein h$^{-1}$의 범위를 보였다. 외해수에서 동물성 부유생물의 GDH활성도가 높게 나타난 것은 조사당시의 외해수에서의 높은 기초 생산량을 포식하는 동물성 부유생물의 활발한 질소대사가 이루어지고 있음을 암시 한다. 본 연구를 통하여 한국 동남해역의 동물성 부유생물의 GDH활성도와 NH $_{4}$ 분비율 사이에 매우 높은 상관계가 밝혀졌으며 그 평균 GDH 활성도/ NH $_{4}$ 분비율의 비율은 18.8$\pm$2.6(n=6) 이었다. 차후 GDH활성도 측정등을 통 한 생화학적 효소연구방법은 여러 해양 환경에서 생물활동에 의하여 영향를 받는 비보전적인 해수원소의 동적 변화 및 해양생태계내에서의 각 생물군의 여러 생화학 적 역할을 규명하는데 중요하게 이용될 것으로 판단된다.
인진추출물의 LPS에 의한 흰쥐 간의 염증반응에 미치는 영향을 혈청학적, 조직병리학적, 면역조직화학적으로 분석하였다. 혈청 GOT, GTP, LDH 는 LPS에 의해 증가하며 이는 인진추출물의 전처리에 의해 저해되며 특히 150 mg/kg 투여군의 GOT와 50 mg/kg 투여군의 LDH가 대조군에 비해 유의성을 보였다. 조직병리학적으로 보아 인진추출물의 전처리는 LPS에 의해 나타나는 혼탁종창, 수포성변성, 염증성 세포침윤, Kupper세포반응 등을 저해하였다. 염증관련 인자에 대한 면역조직화학적 분석으로 보아 인진추출물의 전처리는 LPS주사군의 NF-kBp65, TNF-$\alpha$, COX-2 면역반응보다 약한 반응을, I-kB$\alpha$는 LPS주사군보다 강한 세포질내 면역반응을 보였다. 이로 보아 인진추출물은 LPS에 의한 간손상에 대해 유효한 기능을 가지며 이에 NF-kB를 비롯한 염증관련 단백질의 발현이 작용함을 알 수 있다.
Jeong, Jin Young;Kim, Min Seok;Jung, Hyun Jung;Kim, Min Ji;Lee, Hyun Jeong;Lee, Sung Dae
농업과학연구
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제45권3호
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pp.455-461
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2018
Deoxynivalenol (DON), a Fusarium mycotoxin, causes health hazards for both humans and livestock. Therefore, the aim of this study was to investigate the metabolic profiles of the liver, serum, and urine of piglets fed DON using proton nuclear magnetic resonance ($^1H-NMR$) spectroscopy. The $^1H-NMR$ spectra of the liver, serum, and urine samples of the piglets provided with feed containing 8 mg DON/kg for 4 weeks were aligned and identified using the icoshift algorithm of MATLAB $R^2013b$. The data were analyzed by multivariate analysis and by MetaboAnalyst 4.0. The DON-treated groups exhibited discriminating metabolites in the three different sample types. Metabolic profiling by $^1H-NMR$ spectroscopy revealed potential metabolites including lactate, glucose, taurine, alanine, glycine, glutamate, creatine, and glutamine upon mycotoxin exposure (variable importance in the projection, VIP > 1). Forty-six metabolites selected from the principal component analysis (PCA) helped to predict sixty-five pathways in the DON-treated piglets using metabolite sets containing at least two compounds. The DON treatment catalyzed the citrate synthase reactions which led to an increase in the acetate and a decrease in the glucose concentrations. Therefore, our findings suggest that glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, citrate synthase, ATP synthase, and pyruvate carboxylase should be considered important in piglets fed DON contaminated feed. Metabolomics analysis could be a powerful method for the discovery of novel indicators underlying mycotoxin treatments.
Pseudomonas syringae의 intact cell에서 에틸렌 생성을 극대화 하기 위한 전환조건은 $30^{\circ}C$. pH7.5로 조사되었고, 다양한 기질의 전환효과를 검초한 결과, Asn>Gln>Asp>Glu>$\alpha$-KG>citrate>oxalacetate의 순으로 많은양의 에틸렌을 생성하였다. 또한, arginine과 histidine을 상기 유기산과 함께 넣었을 때 에틸렌 생성에 현저한 상승효과를 나타냈다. Cell-free system 에서는 $\alpha$-KG>Glu>citrate>Gln>Ser순으로 0.5mM $\alpha$-KG에서 310.8(nl.mg $protein^[-1}.h^[-1}$)로 가장 많은 에틸렌을 생성하였고, aminotransferse 억제제인 AOA를 사용해 본 결과, Glu는 glutamate dehydrogenase에 의하여 $\alpha$-KG를 거쳐서 에틸렌으로 전환된 것이라 생각된다.
The objective of this study was to genetically characterize isolates of Giardia duodenalis and to determine if zoonotic potential of G. duodenalis could be found in stray cats from urban and suburban environments in Guangzhou, China. Among 102 fresh fecal samples of stray cats, 30 samples were collected in Baiyun district (urban) and 72 in Conghua district (suburban). G. duodenalis specimens were examined using light microscopy, then the positive specimens were subjected to PCR amplification and subsequent sequencing at 4 loci such as glutamate dehydrogenase (gdh), triose phosphate isomerase (tpi), ${\beta}$-giardin (bg), and small subunit ribosomal RNA (18S rRNA) genes. The phylogenetic trees were constructed using obtained sequences by MEGA5.2 software. Results show that 9.8% (10/102) feline fecal samples were found to be positive by microscopy, 10% (3/30) in Baiyun district and 9.7% (7/72) in Conghua district. Among the 10 positive samples, 9 were single infection (8 isolates, assemblage A; 1 isolate, assemblage F) and 1 sample was mixed infection with assemblages A and C. Based on tpi, gdh, and bg genes, all sequences of assemblage A showed complete homology with AI except for 1 isolate (CHC83). These findings not only confirmed the occurrence of G. duodenalis in stray cats, but also showed that zoonotic assemblage A was found for the first time in stray cats living in urban and suburban environments in China.
It is well known that oxidative stress of reactive oxygen species (ROS) may be a causative factor in the pathenogenesis of bone disorder on osteoblast or osteoclast. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of oxidative stress, protective effect of glutamate receptor antagoinst against ROS-induced osteotoxicity, secretion of tumor necrosis factor $(TNF)-\alpha$ and the expression of c-fos gene in the cultured rat osteoblasts and osteoclasts. Cell viability by MTS assay or !NT assay, activity of glutathione peroxidase (GPx), lipid peroxidation (LPO) activity, protein synthesis by sulforhodamine B (SRB) assay, alkaline phosphatase (ALP) activity, lactate dehydrogenase (LDH) activity, MTS assay for NMDA (N-methyl-D-aspartate) receptor antagonist or AMPA/kainate receptor antagonist, measurement for $TNF-\alpha$, and c-fos gene expression were performed after these cells were treated with or without various cocentrations of xanthine oxidase (XO), hypoxanthine (HX), D-2-amino-5-phosphonovaleric acid (APV), 7-chlorokynurenic acid (CKA), 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione (CNQX) and 6,7-dinitroquinoxaline-2,3-dione (DNQX), respectively. In this study, XO/HX showed decreased cell viability and glutathione peroxidase (GPx) activity, but it showed increased LPO activity, $TNF-\alpha$ secretion and c-fos expression. APV and CKA incresed protein sythesis and ALP activity. While, CNQX or DNQX did not show any protective effect in LDH activity or cell viability. From these results, XO/HX showed cytotoxic effect in cultured rat osteoblast or osteoclast, and also NMDA receptor antagonist such as APV or CKA was effective in blocking XO/HX-induced osteotoxicity in these cultures.
Objective : 6R-Tetrahydrobiopterin(BH4) is a cofactor for the aromatic amino acid hydroxylases which is essential for the biosynthesis of catecholamines and serotonin. It also acts as a cofactor for nitric oxide synthase, and stimulates the release of some neurotransmitters such as dopamine, serotonin, acetylcholine and glutamate. Recently, it has been reported that BH4 could induce cellular proliferation and enhance neuronal survival. This study was performed to investigate the antioxidative effect of BH4 on the various oxidative insults in mouse cerebral cortical cell cultures. Methods : Iron ion(FeCl2), zinc ion(ZnCl2), sodium nitroprusside(SNP) and buthionine sulfoximine(BSO, a glutathione depletor) were used as oxidants. Cell death was assessed by measurement of lactate dehydrogenase efflux to bathing media at the end of exposure. Result : All 4 oxidants induced neuronal cell death associated with cell body swelling, which was markedly inhibited by trolox($100{\mu}M$), a vitamin E analog. BH4($10-100{\mu}M$) markedly inhibited the neuronal cell death induced by all 4 oxidants($20{\mu}M\;Cu^{2+}$, $20{\mu}M\;Zn^{2+}$, $1{\mu}M$ SNP or 1mM BSO). However, BH4 failed to inhibit the neuronal cell death induced by 24hr exposure to $20{\mu}M$ NMDA. Conculsion : These results suggest that BH4 has antioxidative action independently of any actions of enzyme cofactor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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