Inulin fructotransferase from Enterobacter sp. S45 was purified with DEAE-cellulose column chromatography and fast protein liquid chromatography. The purified enzyme gave a single band on polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was estimated to be 42,800 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The optimal pH and temperature for the enzyme reaction were pH 5.5 and $55^{\circ}C$, respectively. $Mg^{2+}$ activated the enzyme activity, but $Fe^{3+}$, $Cu^{2+}$, $Hg^{2+}$ significantly inhibited. After exhaustive digestion of inulin by the enzyme, DFA III, sucrose, 1-kestose and nystose were produced. Sucrose, 1-kestose, raffinose and melezitose can't be used as substrates by the enzyme, but nystose and 1-F-fructofuranosyl nystose were hydrolysed. The Km and Vmax for inulin of the enzyme were 1.4 mM and $0.196\;{\mu}mole/min$, respectively.
To control blood glucose level as close to normal is a major goal of treatment of diabetes mellitus. Hyperglycemia and hyperlipidemia are the major risk factors for cardiovascular complications, the major cause of immature death among the patients with type 2 diabetes. The purpose of this study is to determine the hypoglycemic and hypolipidemic effects of Salicornia herbacea in animal model of type 2 diabetes and to investigate the possible mechanisms for the beneficial effects of S. herbacea. S. herbacea was extracted with 70% ethanol and desalted with 100% ethanol. Three week-old db/db mice (C57BL/KsJ, n=16) were fed AIN-93G semipurified diet or diet containing 1% desalted ethanol extract of S. herbacea for 6 weeks after 1 week of adaptation. Fasting plasma glucose, triglyceride, and total cholesterol were measured by enzymatic methods and blood glycated hemoglobin ($HbA_{1C}$) by the chromatographic method. Body weight and food intake of S. herbacea group were not significantly different from those of the control group. Fasting plasma glucose and blood glycated hemoglobin levels tended to be lowered by S. herbacea treatment. Consumption of S. herbacea extract significantly decreased plasma triglyceride and cholesterol levels (p<0.05). The inhibition of S. herbacea extract against yeast ${\alpha}$-glucosidase was 31.9% of that of acarbose at the concentration of 0.5 mg/mL in vitro. The inhibitory activity of ethanol extract of S. herbacea against porcine pancreatic lipase was 59.0% of that of orlistat at the concentration of 0.25 mg/mL in vitro. Thus, these results suggest that S. herbacea could be effective in controlling hyperlipidemia by inhibition of pancreatic lipase in animal model of type 2 diabetes.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.4
no.2
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pp.93-100
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2002
Cocoon production, which is a representative of traditional sericulture shifted into silkworm powder production in the spring of 1995. This, infect, signifies the change from the dress-centered textile business to the bio-industry and the functional resource industry. One of the most outstanding shifting is utilization of silkworm larvae for anti-diabetic agent. In Asian countries including Korea, silkworm powder derived from the domestic silkworm (Bombyx mori L.) has long been favored for anti-diabetic agent, but its efficacy was not tested until last decade by modern scientific methods. In this article, we reviewed the major researches on the silkworm powder as a blood glucose-lowering substance. After the beginning test of the efficacy of silkworm powder by a cooperative research between Department of Sericulture and Entomlogy, NIAST, RDA and Kyung Hee University, substantial data have been accumulated so far, In a serial experiment to select best condition, the fifth instar larvae prepared by freeze dry method turned out to have the best blood glucose-lowering effect. In the pharmacological experiment to understand the mechanism of silkworm powder in small intestine, the silkworm powder turned out to inhibit the activity of ${\alpha}$-glucosidase, by competitively binding to $\alpha$-type disaccharides. The animal experiment showed that the extract of silkworm powder prevents a rapid increase of blood glucose level after meal and prevents hunger and law blood glucose level during empty stomach. In the experiment to isolate the major component of silkworm powder, which exerts blood glucose-lowering effect, 1-deoxynojirimy-cin (DNJ) was eventually mass-purified, and it turned out that DNJ isolated from silkworm powder was excellent in its blood glucose-lowering effect. In the experiment to understand the personal difference of the efficacy of the silkworm powder, clinical candidates were divided on the basis of the criterion of traditional Chinese medicine: Tae-Yang, Tae-Um, So-yang, and So-Um. The result showed that silkworm powder has a tendency to reduce blood glucose level at fasting and at 2 hours after meal, and this trend was somewhat obvious in the Tae-Um body type. In summary, we reviewed scientific papers on the efficacy of silkworm powder and its purified DNJ as a blood glucose-lowering agent. These suggest that silkworm powder truly possesses blood glucose-lowering effect as documented in the traditional Chinese medicine, although further researches will be required to develop them as "medical" resource instead of functional food.
Aronia (Black chokeberry, Aronia melanocarpa) belonging to the Rosaceae family, is native to eastern North America. Aronia contain high levels of flavonoids, mostly anthocyanins and proanthocyanidins, which are known as condensed tannins. The dominant proanthocyanidins in aronia are (-)-epicatechin and (+)-catechin. The concentration of proanthocyanidins in aronia is higher than in other berries, however due to the astringent taste it is not desirable for consumption. Therefore, the purpose of this study is to evaluate the effect of aronia on the reduction in tannins by yeast isolated from regional Jeotgal. We isolated strains of yeast with high ${\beta}$-glucosidase activity from Jeotgal, with the MTY2 strains exhibiting a reduction in final tannin concentration according to thin layer chromatography (TLC) analysis. MTY2 was confirmed as Kazachstania servazzii using an 18S rDNA sequence and named as K. servazzii MTY2. K. servazzii MTY2 showed most significant growth when K. servazzii MTY2 was cultured in a solution of 10% (w/v) glucose, 3% (w/v) tryptone and 0.1% (w/v) sodium chloride. According to the high performance liquid chromatography (HPLC) analysis, the (+) - catechin peak is present, but (-) - epicatechin peak was reduced at culture condition added with 10% glucose in medium.
In order to investigate the properties of enzymes from two strains of mold, reported in the previous paper, (1) studies have been made concerning the characteristics of cellulase of Aspergillus niger-SM6 and Trichoderma viride-SM10, and summarized as follows. 1. In the semi-purification the recovery of ${\beta}-glucosidase$ was the highest when 80-90% ethanol was used and 0.8 saturation of $(NH_4)_2SO_4$. 2. The characteristics of the semi-purified enzyme were as follows. Aspergillus niger-SM6 Trichoderma viride-SM10 Optimum pH 3.5 4.0 pH stability 3.0-6.0 3.0-6.0 Optimum temperature $60^{\circ}C$$60^{\circ}C$ Heat stability below $60^{\circ}C$ below $50^{\circ}C$ Optimum reaction time 30 min. 60 min. Optimum CMC concentration 3% 3% 3. The Km values of CMCase were 0.8% and 1.01 for Aspergillus niger-SM6 and Trichoderma viride-SM10, respectively. 4. In the strain of Aspergillus niger-SM6, there were high activity of xylanase and pectinase.
Kim, Jin-Kwang;He, Dan;Liu, Qing-Mei;Park, Hye-Yoon;Jung, Mi-Sun;Yoon, Min-Ho;Kim, Sun-Chang;Im, Wan-Taek
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.4
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pp.444-450
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2013
A Gram-negative, strictly aerobic, non-motile, non-spore-forming, and rod-shaped bacterial strain designated FW-$6^T$ was isolated from a freshwater sample and its taxonomic position was investigated by using a polyphasic approach. Strain FW-$6^T$ grew optimally at $10-42^{\circ}C$ and at pH 7.0 on nutrient and R2A agar. Strain FW-$6^T$ displayed ${\beta}$-glucosidase activity that was responsible for its ability to transform ginsenoside $Rb_1$ (one of the dominant active components of ginseng) to Rd. On the basis of 16S rRNA gene sequence similarity, strain FW-$6^T$ was shown to belong to the family Sphingomonadaceae and was related to Novosphingobium aromaticivorans DSM $12444^T$ (98.1% sequence similarity) and N. subterraneum IFO $16086^T$ (98.0%). The G+C content of the genomic DNA was 64.4%. The major menaquinone was Q-10 and the major fatty acids were summed feature 7 (comprising $C_{18:1}{\omega}9c/{\omega}12t/{\omega}7c$), summed feature 4 (comprising $C_{16:1}{\omega}7c/iso-C_{15:0}2OH$), $C_{16:0}$, and $C_{14:0}$ 2OH. DNA and chemotaxonomic data supported the affiliation of strain FW-$6^T$ to the genus Novosphingobium. Strain FW-$6^T$ could be differentiated genotypically and phenotypically from the recognized species of the genus Novosphingobium. The isolate that has ginsenoside converting ability therefore represents a novel species, for which the name Novosphingobium ginsenosidimutans sp. nov. is proposed, with the type strain FW-$6^T$ (= KACC $16615^T$ = JCM $18202^T$).
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.1
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pp.41-48
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2000
A bacterial strain, designated as JK-43, producing extracellular cyclodextrin glucanotransferase (CGTase)[EC 2.4.1.19] was isolated from kimchi. The CGTase from isolated strain JK-43 showed the transglucosylation activity from soluble starch to L-ascorbic acid(AA) compared to those obtained from other strains. A main product formed by this reaction was identified as $2-O-{\alpha}-glucopyranosyl$ L-ascorbic acid(AA-2G) by testing its susceptibility to ${\alpha}-glucosidase$ hydrolysis, the HPLC profiles, and through the elementary analysis. the ${\beta}-CD,\;{\gamma}-CD$, potato starch and corn starch were identified to be suitable glucosyl donor for transglucosylation reaction on AA by CGTase. Acceptor specificity on AA-2G production was examined by use of AA, Iso-AA and AA-2P. Transglucosylation was observed toward AA-2P as well as AA and Iso-AA. The microorganism isolated from kimchi was identified as a strain of Bacillus sp. JK-43 based on the morphological, cultural, biochemical characteristics and partial 16SrDNA sequence analysis. The maximal CGTase production was observed in a medium containing 1.0% soluble starch, 1.0% yeast extract, 1.0% $Na_2CO_3\;0.1%\;K_2HPO_4,\;and\;0.02%\;MgSO_4{\cdot}7H_2O$ with initial pH 7.0. The strain was cultured at $37^{\circ}C$ for 26 hrs with reciprocal shaking.
To raise the added value of the fruits of Cudrania tricuspidata, Cudrania tricuspidata vinegar was produced and examined for its fermentation conditions. Forty nine acetic acid bacteria with resistance against acetic acid, ethanol, and sulfide as high acetic acid producers were isolated from fermented foods and identified as Acetobacter indonesiensis, A. cerevisiae, A. orientalis, A. tropicalis, A. fabarum, A. pasteurianus, and A. syzygii based on the results of the analysis of the 16S rRNA gene sequences. Among them, two GRAS strains, A. pasteurianus SCMA5 and SCMA6, were finally selected for the production of acetic acid. Optimal vinegar productions were obtained from the medium containing 40% (v/v) fruit juice of Cudrania tricuspidata and 5% (v/v) ethanol at $25^{\circ}C$ for 72 hr. The sensory panel preferred the vinegar fermented with the SCMA06 to that with the SCM05 strain. The radical scavenger capacity of DPPH was 53% higher than that of the control in the vinegar fermented with the SCMA06 strain. The ${\alpha}$-glucosidase inhibitor activity as an index of the antidiabetic drug showed 91% inhibition, which is higher than that of acabose. This study will be helpful for the scale-up production of vinegar with the fruit of Cudrania tricuspidata.
Ginsenosides have been regarded as the principal components, responsible for the pharmacological and biological activities of ginseng. Absorption of major ginsenosides at the gastrointestinal tract was extremely low, when ginseng taken orally. In order to improve the absorption and bioavailability, transformation of major ginsenosides into more active and valuable minor ginsenoside is much required. In this present study, We isolated a lactic acid bacteria Leuconostoc fallax LH3 from the Korean fermented food Kimchi, which have higher ${\beta}$-glucosidase activity. Using the ethanol precipitated curd enzyme of Leuconostoc fallax LH3, we investigated the biotransformation of ginsenoside Rd at different experimental condition to increase transformation. The maximum convertion was supported at 30 $^{\circ}C$ and decreased when temperatures increased. In order to optimize the effect of pH, the curd enzyme was mixed 20 mM sodium phosphate buffer (pH 3.5 to pH 8.0). Ginsenoside Rd was almost hydrolyzed between pH 7.0 and pH 9.0, but not hydrolyzed above pH 10.0. Ginsenoside Rd was hydrolyzed after 24 hrs incubation, but whereas the ginsenoside F2 was appeared from 36 hrs, and all ginsenoside Rd was transformed to F2 after the 60 hrs incubation. Based on this study, the curd enzyme of Leuconostoc fallax LH3 transformed the ginsenoside Rd at the 30$^{\circ}C$ and the pH optimum of 7.0 to 9.0 after the 60 hrs incubation time.
The present study was undertaken to compare the effects exerted by different extraction solvents on the extraction of active components, such as polyphenols and flavonoids, from the dried leaves of Artemisia annua L. Different extracts were prepared using a heating mantle. The extraction solvents used were distilled water, and 20, 40, 60, 80, and 99.5% ethanol solution. It was observed that the 40% ethanol solution yielded the most significant results in the extraction of various phytochemicals with phenol concentration of 154.8±0.28 mg of gallic acid equivalent/g and flavonoid content of 25.28±0.01 mg quercetin equivalent/g. However, based on the extraction solvent used, varying trends were observed in the antioxidant, enzyme inhibition, and bacterial inhibition analyses. It was concluded that the extraction solvent should be selected based on the purpose of use of the dried leaves of A. annua L.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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