Having idea to develop more effective anti-diabetic agent from ginseng root, we comprehensively assessed the anti-diabetic activity and mechanisms of ginsam in C57BL/KsJ db/db mice. The db/db mice were divided into 4 groups; diabetic control (DC), ginsam at a dose of 300 or 500 mg/kg (GS300 or GS500) and metformin at a dose of 300 mg/kg (MT300). Ginsam was orally administered for 8 weeks. GS500 reduced the blood glucose concentration and significantly decreased an insulin resistance index. In addition, GS500 reduced the plasma non-esterified fatty acid, triglyceride, and increased high density lipoprotein-cholesterol as well as decreased the hepatic cholesterol and triglyceride. More interestingly, ginsam increased the plasma adiponectin level by 17% compared to diabetic control group. Microarray, quantitative-polymerase chain reaction and enzyme activity results showed that gene and protein expressions associated with glycolysis, gluconeogenesis, and fatty acid oxidation were changed to the way of reducing hepatic glucose production, insulin resistance and enhancing fatty acid $\beta$-oxidation. Ginsam also increased the phosphorylation of AMP-activated protein kinase and glucose transporter expressions in the liver and skeletal muscle, respectively. These changes in gene expression were considered to be the mechanism by which the ginsam exerted the anti-diabetic and anti-dyslipidemic activities in C57BL/KsJ db/db mice.
Acyl-coenzyme A (CoA):diacylglycerol acyltransferase 2 (DGAT2) catalyzes the last stage of triacylglycerol (TAG) synthesis, a process that forms ester bonds with diacylglycerols (DAG) and fatty acyl-CoA substrates. The enzymatic role of Dgat2 has been studied in various biological species. Still, the full description of how Dgat2 channels fatty acids in skeletal myocytes and the consequence thereof in glucose uptake have yet to be well established. Therefore, this study explored the mediating role of Dgat2 in glucose uptake and fatty acid partitioning under short interfering ribonucleic acid (siRNA)-mediated Dgat2 knockdown conditions. Cells transfected with Dgat2 siRNA downregulated glucose transporter type 4 (Glut4) messenger RNA (mRNA) expression and decreased the cellular uptake of [1-14C]-labeled 2-deoxyglucose up to 24.3% (p < 0.05). Suppression of Dgat2 deteriorated insulin-induced Akt phosphorylation. Dgat2 siRNA reduced [1-14C]-labeled oleic acid incorporation into TAG, but increased the level of [1-14C]-labeled free fatty acids at 3 h after initial fatty acid loading. In an experiment of chasing radioisotope-labeled fatty acids, Dgat2 suppression augmented the level of cellular free fatty acids. It decreased the level of re-esterification of free fatty acids to TAG by 67.6% during the chase period, and the remaining pulses of phospholipids and cholesteryl esters were decreased by 34.5% and 61%, respectively. Incorporating labeled fatty acids into beta-oxidation products increased in Dgat2 siRNA transfected cells without gene expression involving fatty acid oxidation. These results indicate that Dgat2 has regulatory function in glucose uptake, possibly through the reaction of TAG with endogenously released or recycled fatty acids.
Platinum is a well known element which shows a significant electrocatalytic activity in many important applications. In glucose sensor, because of the poisoning effect of reaction intermediates and the low surface area, the electrocatalytic activity towards the glucose oxidation is low which cause the low sensitivity. So, we fabricate a nanoporous PtZn alloy electrode by deposition-dissolution method. It provides a high active surface and a large enzyme encapsulating space per unit area when it used for an enzymatic glucose sensor. Glucose oxidase was immobilized on the electrode surface by capping with PEDOT composite and PPDA. The composite and PPDA also can exclude the interference ion such as ascorbic acid and uric acid to improve the selectivity. The surface area was determined by cyclic voltametry method and the surface structure and the element were analyzed by Scanning Electron Microscope (SEM) and Energy Dispersive X-ray spectroscopy (EDX), respectively. The sensitivity is $13.5{\mu}A/mM\;cm^2$. It is a remarkable value with such simply prepared senor has high selectivity.
In this study, we synthesized a new biocatalyst consisting of glucose oxidase (GOx), polyethyleneimine (PEI) and carbon nanotube (CNT) with addition of terephthalaldehyde (TPA) (TPA/GOx/PEI/CNT) for fabrication of glucose sensor that shows improved sensing ability and stability compared with that using other biocatalysts. Main bonding of the new TPA/GOx/PEI/CNT catalyst is formed by Aldol condensation reaction of functional end groups between GOx/PEI and TPA. Such formed bonding structure promotes oxidation reaction of glucose. Catalytic activity of TPA/GOx/PEI/CNT is evaluated quantitatively by electrochemical measurements. As a result of that, large sensitivity value of $41{\mu}Acm^{-2}mM^{-1}$ is gained. Regarding biosensor stability of TPA/GOx/PEI/CNT catalyst, covalent bonding formed between GOx/PEI and TPA prevents GOx molecules from becoming leaching-out and contributes improvement in biosensor stability. With estimation of the biosensor stability, it is found that the TPA/GOx/PEI/CNT catalyst keeps 94.6% of its initial activity even after three weeks.
In this study, an anthracene cross-linker is introduced to enhance the catalytic activity of glucose oxidase (GOx) based catalysts and to increase the amount of enzyme loading. The crosslinked GOx is bonded with the CNT/PEI support using the electrostatic interaction (AC[CNT/PEI/GOx]). Electrochemical evaluations are done to evaluate the performance of this catalyst and the performance of CNT/PEI/GOx catalyst is also measured as a control. According to the measurements, it is confirmed that the amount of loaded GOx increases, while $K_m$ value calculated by Lineweaver-Burk plot shows that AC[CNT/PEI/GOx] ($K_m$ : 0.73 mM) is superior to CNT/PEI/GOx ($K_m$ : 1.71 mM) without cross-linking reaction. Based on these effects, it is demonstrated that the maximum power density of the enzymatic biofuel cell using AC[CNT/PEI/GOx] increases from $21.2{\mu}W/cm^2$ to $57.4{\mu}W/cm^2$.
The present study investigates the effect of oxidation-reduction potential (ORP) and organic compounds on specific anaerobic ammonium oxidation activity (SAA) using batch experiments. The batch tests were based on the measurement of nitrogen gas production. The relationship between ORP and dissolved oxygen (DO) concentration was found to be ORP (mV) = 160.38 + 68 log [$O_2$], where [$O_2$] is the DO concentration in mg/L. The linear relationship obtained between ORP and SAA ($R^2$ = 0.99) clearly demonstrated that ORP can be employed as an operational parameter in the Anammox process. At ORP value of -110 mV, the SAA was $0.272{\pm}0.03\;g\;N_2-N\;(g\;VSS)^{-1}\;d^{-1}$. The investigation also revealed inhibitory effect of glucose on the SAA while acetate concentration up to 640 mg COD/L (corresponding to 10 mM) had stimulating effect on the SAA. However, acetate concentration beyond 640 mg COD/L had inhibitory effect on the Anammox activity. The results indicated that nitrogen rich wastewaters containing low level organic matter could be better treated by Anammox microorganisms in real-world conditions after some acidification process.
A ISFET-based glucose sensor has inherent problems such as low sensitivity, drift effect and long response time. For that reason, a amperometric actuation technique was introduce to make a highly sensitivity of the ISFET glucose sensor with a Pt actuator, which electrolyzes $H_2O_2$, one of the by a by-products of the oxidation reaction of glucose. Moreover, a potential-step measurement method detecting response by only the electrolysis of $H_2O_2$ was developed for eliminating a drift problem. The operation characteristics of ISFET-based glucose sensor was improved by using the amperometric actuation and a measurement techniques. The fabricated ISFET glucose sensor is shown good operation such as characteristics(30mM PBS, about 26mV/decade) and linearity. A portable glucose meter with a highly resolution by using the fabricated ISFET-based glucose sensor with Pt actuation was developed and its characteristics investigated.
For the synthesis of various pharmaceuticals, chiral alcohols are useful intermediates. Among them, (R)-ethyl-4-chloro-3-hydroxybutanoate ((R)-ECHB) is an important building block for the synthesis of L-carnitine. (R)-ECHB is produced from ethyl-4-chloro-3-oxobutanoate (ECOB) by a reductase-mediated, enantioselective reduction reaction. The Saccharomyces cerevisiae YOL151W reductase that is expressed in Escherichia coli cells exhibited an enantioselective reduction reaction toward ECOB. By virtue of the C-terminal His-tag, the YOL151W reductase was purified from the cell-free extract using Ni2+-NTA column chromatography and immobilized onto Ni2+-magnetic microparticles. The physical properties of the immobilized reductase (Imm-Red) were measured using electron microscopy, a magnetic property measurement system, and a zeta potential system; the average size of the particles was approximately 1 μm and the saturated magnetic value was 31.76 emu/g. A neodymium magnet was used to recover the immobilized enzyme within 2 min. The Imm-Red showed an optimum temperature at 45℃ and an optimum pH at 6.0. In addition, Bacillus megaterium glucose dehydrogenase (GDH) was produced in the E. coli cells and was used in the coupling reaction to regenerate the NADPH cofactor. The reduction/oxidation coupling reaction composed of the Imm-Red and GDH converted 20 mM ECOB exclusively into (R)-ECHB with an e.e.p value of 98%.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.1
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pp.123-131
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2004
The effect of reactive oxygen species (ROS) on the formation of $N^{\varepsilon}$-(carboxymethly)lysine (CML). one of the endproducts in the Maillard reaction of protein (or glycation), was investigated. Glyoxal, a main precursor of CML formation, was produced from both glucose and fructose during their autoxidation. The transition metal ion showed to involve in the formation of glyoxal by the metal catalyzed oxidation, suggesting that ROS accelerated the reducing sugar autoxidation. The stimulative effect of ROS on the autoxidation was more prominent in glucose than in fructose. Polyunsaturated acids (PUFAs) were shown to form glyoxal by peroxidation in proportion to the degree of unsaturation, but ROS did not affect on PUFA peroxidation. Ascorbic acid also lysine (CMHL) in the model system using hippuryl lysine and glucose had a significant effect on ROS, whereas it had no effect on ROS using glyoxal as a reactant. Almost the same trend was obtained by the analysis of antigen coated indirect noncompetitive ELISA using monoclonal antibody (6D12). These data indicated that ROS affected glucose autoxidation as well as mediated both CML and glyoxal formation, but did not affect the reactive compounds such as fructose, PUFAs and ascorbic acid.
In the browning reaction of Korean ginseng, it appears that enzymatic and non-enzymatic browning reaction occurred In initial stage of steaming fresh ginseng at low temperature, and then non-enzymatic browning reaction followed in the drying period after steaming. Browning reaction of red ginseng occurred between $60{\sim}90$ min of steaming at $100^{\circ}C$, and browning pigments of red ginseng were mostly water soluble substances. The structural characteristics of water soluble browning reaction products(WS-BRPs) isolated from Korean red ginseng were showed the presence of hydroxyl, amide carbonyl and aliphatic methane groups. From sugar analysis it was identified that L and S-1, melanoidins isolated from red ginseng, contained two kinds of sugars, glucose and xylose, and the other melanoidin S-2 contained the previous and fructose. In order to find out pertinent methods for the acceleration of browning during ginseng processing, various treatment were made on fresh ginseng with sugars, amino acids and inorganic nitrogenous compounds and the extent of browning was measured. Among sugar tested, maltose resulted in the greatest acceleration of browning followed in decreasing order by glucose and lactose, whereas pentoses, fructose, sucrose and raffinose had negligible effect. A marked browning occurred in ginseng treated with basic amino acids, while the extent of browning was not greatly increased when ginseng was treated with aliphatic amino acids, hydroxyl amino acids, or acidic amino acids. The brown color intensity gradually increased with an increase of glucose concentration far up to 0.5M. L, S-1, and S-2 were found to have an ability to donate hydrogen to DPPH, and also they had anti-oxidative activity in the experiments of hydrogen peroxide scavenging, inhibitory activity in the formation of MDA from linoleic acid, auto oxidation of ok-brain homogenates, lipid peroxidation by the enzymatic and non-enzymatic system in liver microsome fraction, and mitochondrial fraction etc. The amounts of acidic polysaccharide(AP) in red ginseng were higher than those of wild and cultured Panax quinquefolius, Panax notoginseng as well as white ginseng (Panax ginseng). In white ginseng, the AP amount is no difference in root ages or sizes, also, the AP amount of ginseng body was similar to that of rhizome, but was higher than that of leaf and epidermis. Addition of red ginseng acidic polysaccharide(RGAP) increased production of nitric oxide(NO) and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ in the rodent macrophage cultures, and treatment of RGAP in vivo stimulated tumoricidal activities of natural killer (NK) cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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