Previously, a cytosolic trehalase (TreH) from the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus acidocaldarius was reported; however, the gene responsible for the trehalase activity was not identified. Two genes, saci_1816 and saci_1250, that encode the glycoside hydrolase family 15 type glucoamylase-like proteins in S. acidocaldarius were targeted and expressed in Escherichia coli, and their abilities to hydrolyze trehalose were examined. Recombinant Saci_1816 hydrolyzed trehalose exclusively without any help from a cofactor. The mass spectrometric analysis of partially purified native TreH also confirmed that Saci_1816 was involved in proteins exhibiting trehalase activity. Optimal trehalose hydrolysis activity of the recombinant Saci_1816 was observed at pH 4.0 and $60^{\circ}C$. The pH dependence of the recombinant enzyme was similar to that of the native enzyme, but its optimal temperature was $20-25^{\circ}C$ lower, and its thermostability was also slightly reduced. From the biochemical and structural results, Saci_1816 was identified as a trehalase responsible for trehalose degradation in S. acidocaldarius. Identification of the treH gene confirms that the degradation of trehalose in Sulfolobus species occurs via the TreH pathway.
Proceedings of the Korean Society of Postharvest Science and Technology of Agricultural Products Conference
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2003.10a
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pp.199.1-199
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2003
제주민속주인 좁쌀약주의 제조를 위하여 전국에서 수집된 35종의 누룩으로부터 우수 곰팡이와 효모를 분리하였다. 수집된 누룩의 균수는 곰팡이가 6.4$\times$105~107개, 효모는 1.4$\times$104~107개로 나타났고, 이 중에서 곰팡이 169균주, 효모 103균주를 분리하였으며 전분당화력이 좋은 곰팡이 16균주와 효모 1균주를 선발하였다. 이 중에서 전분당화 균주의 효소활성을 분석한 결과 Aspergillus속으로 동정된 A8-3이 glucoamylase 활성, 액화력, xylanase 활성이 가장 높았고, Rhizopus속으로 동정된 B23-3은 당화력이 가장 우수하였다. 우수효모를 선발하기 위하여 pH, 무게 감량, 내당성, 내알코올성 등을 측정한 결과, Saccharomyces속인 A10-4가 가장 우수하였다. 같은 원료비율로 만든 누룩에 우수균주를 접종하였을 때, 단일 균주를 처리할 때보다 A8-3과 B23-3인 두 균주를 혼합하여 처리한 경우가 당화력이 높게 나타났다. 누룩을 원반형의 누룩과 팰릿(개량형) 형태로 만들어 혼합종균 배양액을 접종한 후 당화력을 측정한 결과, 비슷한 당화력을 나타내었다. 개량형 누룩을 사용하여 양조하는 경우, 좁쌀주 양조에 발효효율을 높일 수 있을 것으로 판단되었다. 수집된 누룩은 수분이 10~13%, 총당은 55~70%, 조단백질은 10~18% 조지방은 0.2~l.0%, 회분은 1.8~2.1%이었다. 본 연구에서 제조한 누룩은 수분이 12~15%, 총당은 61~7l%, 조단백질은 15~20%, 조지방은 0.4~1.5%, 회분은 1.1~1.5%이었다.
Industrial strain Improvement is concerned with developing or modifying microorga-nisms used In production of commercially important fermentation products. The aim is to reduce the production cost by improving productivity of a strain and manipulating specific cilarafteristic such as the ability to utilize cheaper raw materials or resist bacteriophages. The traditional empiri-cal approach to strain improvement is mutation combined with selection and breeding techniques. It is still used by us to improve the productivity of organisms in amino acids. organic acids andenzymes production. The breeding of high L-lysine-producing strain Au112 is one of the outstanding examples of this approach. It is it homoserine auxotroph with AEC, TA double metabolicanalogue resistant markers. The yield reaches 100g/1. Resides, the citric acid-producing organism Aspergillus nuger, Co827, its productivity reches the advanced level in the world, is also the result of a series mutations expecially with Co Y-radiation. The thermostable a-amylaseroducing strain A 4041 is the third example. By combining physical and chemical multations. the strain ,A 4041becomes an asporogenous, catabolite derepressed mutant with rifamycin resistant and methionine, arginine auxotroph markers. The a-amylase activity reaches 200 units/ml. The fourth successful example of mutation in strain improvement is the glucoamylase-producing strain Aspergillus nigerSP56 its enzyme activity is 20,000 units/ml, 4 times of that of the parental strain UV_11. Recently recombinant DNA approach Provides a worth while alternative strategy to Industrial strain improve-ment. This technique had been used by us to increase the thermostable a-amylase production and on some genetic researches.
Effect of dry-heat treatment $(130{\sim}220^{\circ}C)$ on properties of corn starch was investigated. No significant changes of surface color and swelling power were observed. Blue value, water-binding capacity, solubility and degree of hydrolysis by acid or glucoamylase were increased; however, intrinsic viscosity and crystallinity were decreased as heating temperature was raised. Noticeable changes occurred between $170{\sim}190^{\circ}C$.
The optimal condition of the ethanol fermentation from raw cassava starch by simultaneous saccharification - fermentation (SSF) was studied using glucoamylase from Aspergillus sp. and a yeast strain. The rate and yield of ethanol production were optimum at pH 3.6 with shaking. The fine milling treatment was effective for both saccharification and SSF of raw cassava starch. The presaccharification at 6$0^{\circ}C$ for 1 hr before SSF increased the rate and yield of ethanol production, as well. To increase the ethanol concentration after fermentation the substrate concentration could be increased up to 2195 without the problem of viscosity. The use of high concentration ethanol tolerant yeast strains and high substrate concentration produced ethanol higher than 10%(W/V) after fermentation for 5 days.
Kim, Min-Seong;Jeon, Jin-A;Jeong, Seok-Tae;Choi, Ji-Ho;Choi, Han-Seok;Yeo, Soo-Hwan
Journal of the East Asian Society of Dietary Life
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v.21
no.6
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pp.897-904
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2011
For set up the processing method of Byeo-Nuruk, we investigated the quality characteristics of Byeo-Nuruk according to the mixture ratio of rice and wheat, as well as the addition rate of moisture. After 12 hours of incubation, the temperature of Nuruk increased dramatically and reached a maxium temperature at 36 hours. After 36 hours, the temperature decreased gradually and was maintained at about $31{\sim}38^{\circ}C$. The ranges of pH and titratable acidity of Byeo-Nuruk were 4.85 to 7.42 and 1.0 to 2.3, respectively. A higher content of wheat ratio in Byeo-Nuruk, was associated with higher enzyme activities of ${\alpha}$-amylase, glucoamylase, and acidic-protease. Further, at a 70% wheat ratio, a 25% addition rate of moisture showed the highest enzyme activity. In the mixture ratio between rice and wheat, the 50:50 and 30:70 treatments contained the highest levels of microorganisms.
In the current study, we investigated the inhibitory activity of water soluble ${\beta}-glucan$ from oat (Avena sativa) against various digestive enzymes such as ${\alpha}-glucosidase$, sucrase, maltase and glucoamylase. Inhibition of these enzymes involved in the absorption of disaccharide can significantly decrease the post-prandial increase of blood glucose level after a mixed carbohydrate diet. The ${\beta}-glucan$ had the highest documented rate of small intestinal sucrase inhibitory activity (2.83 mg/mL, $IC_{50}$) relevant for potentially managing post-prandial hyperglycemia. Furthermore, we evaluated the effects of ${\beta}-glucan$ on the level of post-prandial blood glucose in animal model. The post-prandial blood glucose levels were tested two hours after sucrose/starch administration, with and without ${\beta}-glucan$ (100, and 500 mg/kg-body weight). The maximum blood glucose levels (Cmax) of ${\beta}-glucan$ administration group were decreased by about 23% (from $219.06{\pm}27.82$ to $190.44{\pm}13.18$, p<0.05) and 10% (from $182.44{\pm}13.77$ to $165.64{\pm}10.59$, p<0.01) in starch and sucrose loading test, respectively, when compared to control in pharmacodynamics study. The ${\beta}-Glucan$ administration significantly lowered the mean, maximum, and minimum level of post-prandial blood glucose at 30 min after meal. In view of the foregoing, it is felt that our findings suggest that ${\beta}-glucan$ from oat serves to reduce post-prandial blood glucose rise secondary to slower absorption of glucose in the small intestine, via carbohydrate hydrolyzing enzymes inhibition.
A palatable paste-type lactic fermented rice (LFR) was prepared by lactic acid fermentation after liquefaction and saccharification of cooked rice. A mixed culture of Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus (1 : 1) produced the LFR of the best quality. A great improvement in quality of the LFR was achieved by 0.02% each ${\alpha}-amylase$ and glucoamylase treatment during the fermentation (simultaneous saccharification and fermentation), which resulted from the increased sourness and sweetness and the decreased size of solid particles contained in the LFR. The resulted LFR was superior in quality. Physical and chemical properties of the LFR were evaluated.
Several transglucosylated xylitols were synthesized using intermolecular transglucosylation reaction of cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) and their bifidogenic effects were investigated. The CGTase from Thermoanaerobacter sp. showed the highest transglycosylation activity on xylitol compared to those obtained from other strains. Extruded starch was identified to be the most suitable glucosyl donor for transglucosylation reaction on xylitol molecule by CGTase. The optimum reaction conditions for transglucosylation were also studied using extruded starch as a glucosyl donor. The transglucosylated xylitols were purified by activated carbon column chromatography with ethanol gradient elution from 0 to 18%, and their chemical structures were analyzed by fast atom bombardment mass spectrometer, $\^$13/C-nuclear magnetic resonance spectrometer, and enzyme digestion method. Two transglucosylated xylitol, F-I and F-II, which had one or two glucose molecules attached to maternal xylitol by ${\alpha}$-1,4-linkage, were mainly obtained. F-II showed increased stimulation effect on the growth of Bifidobacterium breve compared to xylitol, indicating the possibility utilized as a new functional alternative sweetners having bifidogenic effects.
The presence of bacterial strains showing antagonistic activity to common pathogens found in a variety of fermented foods in Korea was explored. A bacterium inhibiting the growth of pathogens such as Aspergillus terreus (KCTC6178), A. flavus (KCTC6984), Staphylococcus aureus (KCCM12214), Escherichia coli O157:H7 (KCCM40406), Bacillus cereus (KCTC1012), Cryptococcus neoformans (ATCC208821), Salmonella typhimurium (ATCC19430), and Listeria monocytogenes (KCTC3569) was isolated from Makgeolli, a Korean traditional rice wine. The strain showing high antipathogenic activity was identified as B. amyloliquefaciens based on the nucleotide sequence of the 16S ribosomal RNA gene. Compared with B. amyloliquefaciens KCTC1660, whose genome has been sequenced, the isolate exhibited significantly low activities of starch-degrading enzymes and high resistance to high temperature and low pH.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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