This study aimed to recover the ovarian function through in vitro culture of preantral follicles from aged mice. First, we isolated the preantral follicles from ovaries of sixty-seven-week old B6D2F1 mice with decreased fecundity to know how many follicles were present in them, which was 6 preantral follicles including 2 primary, 2 early secondary and late secondary follicles from 8 aged mice. It was confirmed that a few follicles (~2) were present in aged mice through histological analysis compared to adult mice as control. The 9 days of in vitro culture of preantal follicles showed in vitro growth and induced maturation after treatment with hCG (2.5 IU/mL) and EGF (5 ng/mL). Cumulus cells in the cumulus-oocyte complexes (COCs) were removed using hyaluronidase and oocytes at the germinal vesicle (GV) and GV breakdown (GVBD) were obtained from preantral follicle culture of aged mice in vitro. In conclusion, these observations demonstrated that there still were a few preantral follicles in the ovaries of 67 week-old mice, which we were able to culture in vitro and oocytes were obtained from them. This study proposed an in vitro culture system using preantral follicle as a therapeutic strategy for fertility preservation in humans for assisted reproductive medicine.
Kimura's Disease is a very rare, chronic inflammatory disorder with an unknown etiology, and this illness is primarily seen in young Asian males. The typical clinical features consist of painless subcutaneous masses in the head or neck region, and especially in the salivary gland and submandibular region. It is often accompanied with a regional lymphadenopathy, peripheral blood eosinophilia and elevated serum IgE levels. Histologically, it is characterized by prominent germinal centers in the involved lymph nodes, together with eosinophilic infiltration in these lymph nodes. The treatment modalities for this disease are steroid therapy, radiation therapy and surgical excision. Its clinical course is of a benign nature. We report here on a case of a 28 year old man who had a soft tissue mass in his left arm. We excised this mass and the microscopy confirmed that he suffered from Kimura's disease on microscopic examination in his left distal arm.
Park, Hong-Jai;Kim, Do-Hyun;Lim, Sang-Ho;Kim, Won-Ju;Youn, Jeehee;Choi, Youn-Soo;Choi, Je-Min
IMMUNE NETWORK
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v.14
no.1
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pp.21-29
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2014
Follicular helper T ($T_{FH}$) cells are recently highlighted as their crucial role for humoral immunity to infection as well as their abnormal control to induce autoimmune disease. During an infection, na$\ddot{i}$ve T cells are differentiating into $T_{FH}$ cells which mediate memory B cells and long-lived plasma cells in germinal center (GC). $T_{FH}$ cells are characterized by their expression of master regulator, Bcl-6, and chemokine receptor, CXCR5, which are essential for the migration of T cells into the B cell follicle. Within the follicle, crosstalk occurs between B cells and $T_{FH}$ cells, leading to class switch recombination and affinity maturation. Various signaling molecules, including cytokines, surface molecules, and transcription factors are involved in $T_{FH}$ cell differentiation. IL-6 and IL-21 cytokine-mediated STAT signaling pathways, including STAT1 and STAT3, are crucial for inducing Bcl-6 expression and $T_{FH}$ cell differentiation. $T_{FH}$ cells express important surface molecules such as ICOS, PD-1, IL-21, BTLA, SAP and CD40L for mediating the interaction between T and B cells. Recently, two types of microRNA (miRNA) were found to be involved in the regulation of $T_{FH}$ cells. The miR-17-92 cluster induces Bcl-6 and $T_{FH}$ cell differentiation, whereas miR-10a negatively regulates Bcl-6 expression in T cells. In addition, follicular regulatory T ($T_{FR}$) cells are studied as thymus-derived $CXCR5^+PD-1^+Foxp3^+\;T_{reg}$ cells that play a significant role in limiting the GC response. Regulation of $T_{FH}$ cell differentiation and the GC reaction via miRNA and $T_{FR}$ cells could be important regulatory mechanisms for maintaining immune tolerance and preventing autoimmune diseases such as systemic lupus erythematosus (SLE) and rheumatoid arthritis (RA). Here, we review recent studies on the various factors that affect $T_{FH}$ cell differentiation, and the role of $T_{FH}$ cells in autoimmune diseases.
Ko, Duck Sung;Lee, Sun-Hee;Park, Dong-Wook;Yang, Kwang Moon;Lim, Chun Kyu
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.42
no.3
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pp.118-125
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2015
Objective: The goal of this study was to evaluate the pregnancy potential of immature (metaphase I or germinal vesicle stage) oocytes retrieved in intracytoplasmic sperm injection (ICSI) cycles. Methods: A total of 1,871 couples with infertility underwent 2,984 ICSI cycles. Cycles in which three or fewer oocytes were retrieved were included in this study in order to evaluate the pregnancy potential of immature oocytes. Cycles were divided into five groups (group I-V), according to the maturation status of the oocytes at the time of cumulus cell removal and ICSI. The fertilization and pregnancy rates after ICSI were analyzed and compared among the study groups based on the maturation status of the retrieved oocytes. Results: The retrieval of only immature oocytes was associated with a significant decrease in the fertilization rate ($76.1%{\pm}37.3%$ vs. $49.0%{\pm}49.1%$, $66.7%{\pm}48.7%$; group I vs. group II, group III, respectively) and the average number of transferred embryos ($1.5{\pm}0.7$ vs. $1.1{\pm}0.4$, $1.1{\pm}0.6$). The cycle cancellation rate was significantly higher when only immature oocytes were retrieved. The clinical pregnancy rate decreased significantly when the transferred embryos had originated from immature oocytes (16.9% vs. 10.3%, 1.2%). Conclusion: In ICSI cycles, the fertilization potential and pregnancy potential of the immature oocytes retrieved in ICSI cycles were inferior to those of mature oocytes. Therefore, increasing the number of injectable oocytes and transferrable embryos by using immature oocytes after their spontaneous in vitro maturation does not necessarily improve pregnancy outcomes.
Oqani, Reza K.;Zhang, Jin Yu;Lee, Min-Gu;Diao, Yun Fei;Jin, Dong-Il
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.25
no.6
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pp.789-793
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2012
Fertilization of the oocyte commences embryogenesis during which maternally inherited mRNAs are degraded and the embryonic genome is activated. Transcription of embryonic mRNA is initiated by embryonic genome activation (EGA). RNA polymerase II (RNA Pol II) is responsible for the synthesis of mRNAs and most small nuclear RNAs, and consists of 12 subunits, the largest of which characteristically harbors a unique C-terminal domain (CTD). Transcriptional activity of RNA Pol II is highly regulated, in particular, by phosphorylation of serine residues in the CTD. Here, we have shown the presence of RNA Pol II CTD phosphoisoforms in porcine oocytes and preimplantation embryos. The distribution pattern as well as phosphorylation dynamics in germinal vesicles and during embryogenesis differed in developmental stages with these isoforms, indicating a role of RNA Pol II CTD phosphorylation at the serine residue in transcriptional activation during both oocyte growth and embryonic genome activation. We additionally examined the effects of the RNA Pol II inhibitor, ${\alpha}$-amanitin, on embryo development. Our results show that inhibition of polymerase, even at very early stages and for a short period of time, dramatically impaired blastocyst formation. These findings collectively suggest that the functionality of maternal RNA Pol II, and consequently, expression of early genes regulated by this enzyme are essential for proper embryo development.
Pestechian, Nader;Safa, Ahmad Hosseini;Tajedini, Mohammadhasan;Rostami-Nejad, Mohammad;Mousavi, Mohammad;Yousofi, Hosseinali;Javanmard, Shaghayegh Haghjooy
Parasites, Hosts and Diseases
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v.52
no.4
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pp.413-418
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2014
Hydatid cyst caused by Echinococcus granulosus is one of the most important parasitic diseases around the world and many countries in Asia, including Iran, are involved with this infection. This disease can cause high mortality in humans as well as economic losses in livestock. To date, several molecular methods have been used to determine the genetic diversity of E. granulosus. So far, identification of E. granulosus using real-time PCR fluorescence-based quantitative assays has not been studied worldwide, also in Iran. Therefore, the aim of this study was to investigate the genetic diversity of E. granulosus from center of Iran using real-time PCR method. A total of 71 hydatid cysts were collected from infected sheep, goat, and cattle slaughtered in Isfahan, Iran during 2013. DNA was extracted from protoscolices and/or germinal layers from each individual cyst and used as template to amplify the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 gene (cox1) (420 bp). Five cattle isolates out of 71 isolates were sterile and excluded from further investigation. Overall, of 66 isolates, partial sequences of the cox1 gene of E. granulosus indicated the presence of genotypes G1 in 49 isolates (74.2%), G3 in 15 isolates (22.7%), and G6 in 2 isolates (3.0%) in infected intermediate hosts. Sixteen sequences of G1 genotype had microgenetic variants, and they were compared to the original sequence of cox1. However, isolates identified as G3 and G6 genotypes were completely consistent with original sequences. G1 genotype in livestock was the dominant genotype in Isfahan region, Iran.
The time of seed collection is regarded as one of major concerns to obtain sound seeds. The physical and germinal aspects of Cryptomeria japonica D. Don (Taxodiaceae) seeds were analyzed to determine the optimum harvesting time in Korea. Cones were picked every 10 days from the $30^{th}$ of July to the $30^{th}$ of October in both 2005 and 2006. Seeds were collected from picked cones. Seed size and weight were not significant in two consecutive years. The 1,000-seed weight was 3.3 g for cones picked at the $18^{th}$ of August and 5.3 g for cones picked at the $30^{th}$ of September. The size of seeds was increased as the time of collection from the $18^{th}$ of August to the $30^{th}$ of September: from 19.3 mm to 21.3 mm in length and from 15.8 mm to 18.5 mm in width. Average germination rates in 2005 was 18.3% and 19.6% in 2006. The highest germination rate was 34.3% from seeds collected at the $30^{th}$ of September in 2005. In 2006, the highest germination rate was 31.7% for seeds collected at the same date as the 2005 seeds. After the end of September, germination rate was decreased in both years. The results implied that the best cone picking time for Korean C. japonica seeds is around the end of September.
Embryonic genome activation (EGA) is the first major transition that occurs after fertilization, and entails a dramatic reprogramming of gene expression that is essential for continued development. Although it has been suggested that EGA in porcine embryos starts at the four-cell stage, recent evidence indicates that EGA may commence even earlier; however, the molecular details of EGA remain incompletely understood. The RNA polymerase II of eukaryotes transcribes mRNAs and most small nuclear RNAs. The largest subunit of RNA polymerase II can become phosphorylated in the C-terminal domain. The unphosphorylated form of the RNA polymerase II largest subunit C-terminal domain (IIa) plays a role in initiation of transcription, and the phosphorylated form (IIo) is required for transcriptional elongation and mRNA splicing. In the present study, we explored the nuclear translocation, nuclear localization, and phosphorylation dynamics of the RNA polymerase II C-terminal domain in immature pig oocytes, mature oocytes, two-, four-, and eight-cell embryos, and the morula and blastocyst. To this end, we used antibodies specific for the IIa and IIo forms of RNA polymerase II to stain the proteins. Unphosphorylated RNA polymerase II stained strongly in the nuclei of germinal vesicle oocytes, whereas the phosphorylated form of the enzyme was confined to the chromatin of prophase I oocytes. After fertilization, both unphosphorylated and phosphorylated RNA polymerase II began to accumulate in the nuclei of early stage one-cell embryos, and this pattern was maintained through to the blastocyst stage. The results suggest that both porcine oocytes and early embryos are transcriptionally competent, and that transcription of embryonic genes during the first three cell cycles parallels expression of phosphorylated RNA polymerase II.
Purpose: This study aimed to investigate the clinical features of macrocephaly at birth in Korea using ultrasonography. Methods: We retrospectively investigated the medical records of full-term birth neonates in Cheil General Hospital & Women's Healthcare Center from January 2000 to June 2012. The following parameters were recorded and analyzed: gestational age, sex, birth weight, height, occipitofrontal circumference (OFC), physical examination, perinatal problems, and ultrasonography results. Macrocephaly was diagnosed when the OFC was greater than two standard deviations, based on the 2007 Korean National Growth Charts. Results: There were 75 neonates with macrocephaly at birth (52 boys and 23 girls), with a mean OFC of $38.1{\pm}0.49cm$. A comparison of the birth weight and height with the OFC value showed that height was correlated with OFC (r=0.35) but birth weight was not correlated with OFC (r=0.06). There were no remarkable findings in 56 cases (75%). Germinal matrix hemorrhage was identified in 10 cases (13%). An enlarged cerebrospinal fluid space was found in 5 cases (6.7%). There were 3 cases of mega-cisterna magna (4%), 1 case of ventriculomegaly, and 1 case of an enlarged interhemispheric space (6 mm) among these patients. In addition, a choroid plexus cyst was seen in 1 case. Mineralizing vasculopathy in both basal ganglia with no evidence of congenital infection was found in 2 cases and an asymptomatic subarachnoid hemorrhage was found in 1 case. Conclusion: Our results indicate that macrocephaly at birth has benign ultrasonography findings and shows a pattern of male dominance.
Kim, Hyun-Jung;Lee, Hyun-Seo;Kim, Eun-Young;Lee, Kyung-Ah
Development and Reproduction
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v.16
no.1
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pp.59-67
/
2012
Previously, we found that $Zap70$ (Zeta-chain-associated protein kinase) expressed in the mouse oocytes and played significant role in completion of meiosis specifically at MI-MII (metaphase I-II) transition. Microinjection of $Zap70$ dsRNA into the cytoplasm of germinal vesicle oocyte resulted in MI arrest, and exhibited abnormalities in their spindles and chromosome configurations. The purpose of this study was to determine the mechanisms of action of $Zap70$ in oocyte maturation by evaluating downstream signal networking after $Zap70$ RNAi (RNA interference). The probe hybridization and data analysis were used by Affymetrix Gene Chip Mouse Genome 430 2.0 array and GenPlex 3.0 (ISTECH, Korea) software, respectively. Total 1,152 genes were up (n=366) and down (n=786) regulated after $Zap70$ RNAi. Among those genes changed, we confirmed the expressional changes of the genes involved in the regulation of actin cytoskeleton and MAPK (mitogen-activated protein kinase) signaling pathway, since the phenotypes of $Zap70$ RNAi in oocytes were found in the changes in the chromosome separation and spindle structures. We confirmed the changes in gene expression in the actin skeletal system as well as in the MAPK signaling pathway, and concluded that these changes are main cause of the aberrant chromosome arrangement and abnormal spindles after $Zap70$ RNAi.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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