Purpose: The purpose of this study was to evaluate the clinical efficacy of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) in detecting rotaviral gastroenteritis in children comparing with that of commercial immunoassays. Methods: Stools from 79 children admitted Korea University Hospital due to diarrhea were collected from December 1999 to February 2000. Immunoassays were done using commercial rotavirus Latex kit and Rotatec (ELISA) kit. RT-PCR was performed to amplify group A rotavirus, most commonly pathogenic to human, using VP4- and VP7-specific primers. The detection rates of immunoassays and RT-PCR were compared. Results: ELISA assay was superior to LA assay and moderately concordant with RT-PCR in detecting rotaviral gastroenteritis. Conclusion: Although RT-PCR is known very sensitive, it does not have significant advantage over immunoassay in detecting rotaviral gastroenteritis.
Eight monoclonal antibodies(MAbs) against the transmissible gastroenteritis virus (TGEV) were produced and characterized. Four of the MAbs were produced against a reference TGEV, Purdue strain(P115) and the others were produced against the Korean vaccine virus, Pyungtaek strain. Only one MAb(5C8) produced against P115 had neutralizing activity and was found to be E2 protein-specific. The other seven MAbs(4E2, 4G8, 5H6, 1F8, 2C6, 5H5, and 3A6) had specificity of nucleocapsid protein and no neutralizing activity. All MAbs reacted with different strains of TGEV, but none of the MAbs was reactive with porcine enteropathogenic viruses such as rotavirus, epidemic diarrhea virus and enterovirus by fluorescence antibody(FA) test.
Purpose: Viral gastroenteritis is a common disease in infants and children. Seizures can be associated with viral gastroenteritis as benign convulsions with mild gastroenteritis (CwG). After the development of the rotavirus vaccination, norovirus has become inreasingly significant in children. We retrospectively analyzed the clinical features in a pediatric population presenting with seizures and confirmed enteral viral infections, especially norovirus infections. Methods: We retrospectively reviewed the medical records of pediatric patients aged <15 years admitted due to convulsions and gastroenteritis to the Department of Pediatrics of Myongji Hospital between July 2014 and June 2016. Results: A total of 46 patients (24 male and 22 female) were included. Norovirus was detected in 21 (45.7%) patients, adenovirus in three (6.5%), rotavirus in two (4.3%), astrovirus in one (2.2%), and none of agents were detected in 19 (41.3%) patients. Patients in the norovirus gastroenteritis (NGE) group had a higher incidence of diarrhea than that among in the non-norovirus gastroenteritis (NNGE) group (61.9% vs 28.0%; P<0.05). Twelve patients experienced status epilepticus, including five (23.8%) in the NGE group and seven (33.0%) in the NNGE group (P=0.837). Seizures were effectively terminated by intravenous benzodiazepines in 8 (66.7%) of 12 patients. Additional long-acting antiepileptic drugs such as fosphenytoin or levetiracetam were required in three (25%) of 12 patients. Conclusion: Patients with CwG with and without noroviurs infection did not differ in terms of clinical features. However, status epilepticus was not uncommon among patients with CwG by definition.
Claas, Eric C.;Burnham, Carey-Ann D.;Mazzulli, Tony;Templeton, Kate;Topin, Francois
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.7
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pp.1041-1045
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2013
The xTAG$^{(R)}$ Gastrointestinal Pathogen Panel (GPP) is a multiplexed molecular test for 15 gastrointestinal pathogens. The sensitivity and specificity of this test were assessed in 901 stool specimens collected from pediatric and adult patients at four clinical sites. A combination of conventional and molecular methods was used as comparator. Sensitivity could be determined for 12 of 15 pathogens and was 94.3% overall. The specificity across all 15 targets was 98.5%. Testing for the pathogen identified was not requested by the physician in 65% of specimens. The simultaneous detection of these 15 pathogens can provide physicians with a more comprehensive assessment of the etiology of diarrheal disease.
Ahn, Seung Hee;Lim, Hyun Chul;Kim, Hwang Min;Uh, Young;Seok, Won Seok
Pediatric Infection and Vaccine
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v.15
no.2
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pp.138-145
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2008
Purpose : Acute gastroenteritis is a frequent childhood disease. The purpose of this study is to determine if certain pathogens are related to more severe clinical disease in children with acute gastroenteritis. Methods : Two hundred seventy one stool samples were obtained from pediatric patients with acute gastroenteritis that was associated with virus, bacteria and protozoa infection between January 2006 and December 2006. The clinical severity was assessed by using the 24 point scale Clark score. We evaluate the Clark score according to the pathogens. Results : One hundred thirty seven children were noted to have virus, bacteria or protozoal infection. Rotavirus was the most common pathogen found in the children with gastroenteritis (20.6%). Other frequent pathogens were norovirus (10.7%) and E. coli (12.9%). Vomiting (P=0.049) and diarrhea (P=0.003) symptoms were more frequent in the rotavirus group than that in the rotavirus negative group. There were no statistical differences in the Clark score between the virus positive group and the virus negative group. Conclusion : We concluded that rotavirus was the most common pathogen in children with gastroenteritis, yet the clinical severity was not dependent on the presence of viral or bacterial pathogens.
Porcine transmissible gastroenteritis (TGE) has been a significant cause of economic losses in pig farming industry since 1950s. Although transmissible gastroenteritis virus (TGEV) has declined in recent years, it should not be excluded because of its characteristics; the frequency of gene mutation, the mortality in piglets, and the possibility for sudden incidence. Therefore, the herd-level monitoring of the virus is important to prevent further circulation of TGE. The aim of this study is to develop a large-scale sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with high specificity to rapidly detect TGEV in feces by using monoclonal antibodies (Mabs). The TGEV specific Mabs were produced in hybridoma cells. Among the Mabs belonged to the IgG class developed by this study, the final selected 8H6, 1B7, 4G3, and 1F8 were identified to have the neutralization ability against TGEV. The sandwich ELISA was established using 8H6 as a reporter antibody and 1B7 and the reported 5C8 as a capture antibody. The developed sandwich ELISA was able to distinguish TGEV from other pathogenic diarrheal agents (porcine rotavirus, porcine reovirus, porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), E. coli, and C. perfringens) in tissue culture as well as fecal samples. And the detection rate of TGEV in feces was 80% compared with RT-PCR. The results suggested that the developed sandwich ELISA may be useful in the herd-level monitoring for effective preventive measures due to the early diagnosis of TGEV using a large amount of samples.
Purpose: To assess the effect of combination probiotic Saccharomyces boulardii CNCM-I 3799 and Bacillus subtilis CU-1 in outpatient management of acute watery diarrhea in children. Methods: A randomized double-blind placebo-controlled study was conducted in 180 participants aged six months to five years with acute mild to moderate diarrhea. All were enrolled from six centers across India and centrally randomized to receive S. boulardii CNCM-I 3799 and B. subtilis CU-1 or a placebo along with oral rehydration salts and zinc supplementation. Each participant was followed up for three months to assess recurrence of diarrhea. Results: The mean duration of diarrhea in the probiotic and placebo groups were 54.16 hours and 59.48 hours, respectively. The difference in the duration of diarrhea in those administered with probiotic or placebo within 24 hours of diarrhea onset was 25.21 hours. Furthermore, the difference in duration of diarrhea was 13.84 hours (p<0.05) for participants who were administered with probiotics within 48 hours. There were no significant differences in the stool frequencies between the two arms. After three months, 15% in the probiotic group and 18.5% in the placebo group reported episodes of diarrhea. The mean duration of diarrhea was considerably lower in the probiotic group, 31.02 hours versus 48 hours in placebo (p=0.017). Conclusion: S. boulardii CNCM-I 3799 and B. subtilis CU-1 combination was effective in reducing the duration of diarrhea when administered within 48 hours of diarrhea onset. Similarly, it reduced recurrence of diarrhea and its intensity in the subsequent three months.
The purpose of this study was to investigate protective effects against transmissible gastroenteritis virus (TGEV) infection in piglets by administration of the TGEV antiserum orally at 2hrs, 24hrs and 36hrs after birth. Five piglets administered with the TGEV antiserum were experimentally challenged with TGEV at four-day-old. Control group was four piglets challenged with TGEV only. Clinical signs and gross, histopathological and immunohistochemical findings were examined. In clinical signs, piglets of the control group appeared the typical signs such as severe watery diarrhea, depression and anorexia but piglets of the TGEV antiserum adminstered group recovered progressively. In clinical signs, piglets of the control group appeared the typical signs such as severe watery diarrhea, depression and anorexia but piglets of the TGEV antiserum adminstered group recovered progressively. In mortality, control group showed 75%, but TGEV antiserum adminstered group showed 20.0 %, respectively. In gross findings, piglets of the control group appeared the typical findings of congestion, distension of lumen, contaning curdes of undigested milk in stomach. But gross findings of piglets of the TGEV antiserum adminstered group appeared milder than them of control group. In histopathological findings, piglets of the control group appeared the typical findings of villous atrophy and fusion, congesion, exfoliation, vacuolation, squamation, loss of cilia and proliferation of crypt. But histopathological findings of piglets of the TGEV antiserum adminstered group appeared milder than them of control group. In immunohistochemical findings, piglets of the TGEV antiserum adminstered group showed more intensive in reaction for IgA and IgG than them of control group. The recation for IgA was stronger than that of IgG. It was concluded that oral administration of TGEV antiserum to piglets was effective to prevent TGEV infection and reduce their mortality.
Purpose: Acute gastroenteritis (AGE) is a major cause of morbidity and remains a major cause of hospitalization. Following the Syrian refugee crisis and insufficient clean water in the region, this study reviews the etiological and epidemiological data in Lebanon. Methods: We prospectively analyzed demographic, clinical and routine laboratory data of 198 children from the age of 1 month to 10 years old who were admitted with the diagnosis of AGE to a private tertiary care hospital located in the district of Nabatieh in south Lebanon. Results: Males had a higher incidence of AGE (57.1%). Pathogens were detected in 57.6% (n=114) of admitted patients, among them single pathogens were found in 51.0% (n=101) of cases that consisted of: Entamoeba histolytica 26.3% (n=52), rotavirus 18.7% (n=37), adenovirus 6.1% (n=12) and mixed co-pathogens found in 6.6% (n=13). Breast-fed children were significantly less prone to rotavirus (p=0.041). Moreover, children who had received the rotavirus vaccine were significantly less prone to rotavirus (p=0.032). Conclusion: Our findings highlight the high prevalence of E. histolytica infection as the major cause of pediatric gastroenteritis in hospitalized children, during the summer period likely reflecting the insanitary water supplies and lack of hygiene. Moreover the 42.4% of unidentified causative pathogens should prompt us to widen our diagnostic laboratory arsenal by adopting new diagnostic technologies.
In the present study, methods of the reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) were evaluated for the rapid detection and differentiation of transmissible gastroenteritis virus(TGEV), porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) and rotavirus in piglets suffering from diarrhea. For the purposes, the PCR conditions were first confirmed for the amplification of VP7 gene of rotavirus and N gene of TGEV and PEDV using each specific primers and their annealing temperature. Multiplex RT-PCR methods were further determined to distinguish these viral infections and the results are as follows. For the specific amplification of these viral genes, the reliable PCR condition was determined as 30 cycles of reaction consisting each 1 min of denature at $94^{\circ}C$, annealing at $42^{\circ}C$ and polymerization at $72^{\circ}C$ with 1.0 mM $MgCl_2$. It was able to differentiate these viral infections in the intestines and feces of piglets suffering from diarrhea by duplex PCR for TGEV and PEDV and single PCR for rotavirus with a primer-annealing temperature of $42^{\circ}C$. When the multiplex RT-PCR were undertaken for the field samples, 17 cases of PEDV and 5 cases of rotavirus infections were differential diagnosed in a total of 92 samples of intestines and feces of the piglets with diarrhea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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