Primary cultures of adult rat hepatocytes were used to study the cytotoxicity of D-galactosamine. Hepatocytes were isolated by a collagenase perfusion technique and maintained as monolayers in serum-free medium on collagen-coated culture dishes. Treatment of galactosamine to the culture markedly inhibited the uptake of ${\alpha}$-aminoisobutyric acid (AIB) inducible with glucagon and dexamethasone. At0.1 mM of galactosamine, AIB uptake was inhibited significantly when treated for 12 hr. At higher doses (0.25, 0.5 and 1.0mM), a significant inhibition was noticed after 1 hr exposure. Generally the magnitude of the inhibition was related to the dose and treatment time of galactosamine. Treatment of galactosamine also produced a dose- and treatment time-related suppression of the tyrosine aminotransferase (TAT) induction caused by dexamethasone. Meanwhile, uptake of ouabain was not affected by the treatment of galactosamine. The viability of the hepatocytes was decreased only slightly by the treatment of galactosamine; more than 87% of the cells excluded tryphane blue when treated 1 mM galactosamine for 12 hr. Galactosamine induced depressions of AIB uptake and TAT activity were prevented by the simultaneous addition of uridine to the culture. D-Galactosamine, cytotoxicity, hepatocytes culture, ${\alpha}$-aminoisobutyric acid uptake, tyrosine aminotransferase.
The anti-hepatotoxic activity of Panax ginseng was studied using galactosamine (GalN)-induced cytotoxicity in primary cultured rat hepatocytes. Panax ginseng was fractionated into dammarane glycosides and protein fractions. The dammarane glycosides was further fractionated into panaxadiol and panaxatriol glycosides fractions. The protein fraction was further fractionated into four groups according to the molecular weight; larger than 10,000 dalton, between 5,000 and 10,000 dalton, between 1,000 and 5,000 dalton and between 500 and 1,000 dalton. A significant lowering action on the elevated glutamicpyruvic transaminase (GPT) activity in the culture medium of hepatocytes treated with 1.5 mM GalN was noticed with all four protein fractions studied at the concentration of both $50\;{\mu}g/ml$ and $100\;{\mu}g/ml$. However, the effect of dammarane glycosides fractions was not significant. It was noted that the addition of $100\;{\mu}g/ml$ of protein fractions smaller than 5,000 dalton significantly enhanced the syntheses of protein and RNA in the damaged hepatocytes induced by the treatment of 1.5 mM GalN. Dammarane glycosides fractions significantly enhanced protein synthesis at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$ in the damaged hepatocytes by treatment of 1.5 mM GalN.
kim, Sun-Yeou;Kim, Young-Choong;Byun, Soon-Jung;Kim, Eun
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.22
no.4
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pp.219-224
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1991
Liver protective effects of ginsenosides as well as fractions of dammarane glycosides of Panax ginseng were studied using galactosamine (GalN)-induced cytotoxicity in primary cultured rat hepatocytes. Preventing effects on GalN-induced hepatotoxicity were found both microscopic observation and determination of GPT level with total dammarane glycosides fraction and $20(S)-ginsenoside-Rb_1$ as well as $20(S)-ginsenoside-Rg_1$ at the concentration of $50{\mu}g/ml$. The syntheses of both protein and RNA were significantly increased by the treatment of $50{\mu}g/ml$ of total dammarane glycoside fraction, $20(S)-ginsenoside-Rb_1$, -Rc, -Re and $-Rg_1$, respectively in both normal and GalN-induced cytotoxic hepatocytes.
The antihepatotoxic activity of Bezoar Bovis and Moschus was investigated by in vitro assay method using galactosamine and carbon tetrachloride-induced cytotoxicity in primary-cultured rat hepatocytes. The antihepatotoxic activity was evaluated by measuring the level of glutamate pyruvate transaminase and sorbitol dehydrogenase which were released from the necrotic hepatocytes to the culture medium. In galactosamine-intoxicated hepatocytes, the chloroform fraction of Bezoar Bovis reduced the level of glutamate pyruvate transaminase and sorbitol dehydrogenase resulting in 65% and 59% protection, respectively. The n-Hexane fraction of Moschus resulted in 45% and 40% protection, respectively in this system. In the case of carbon tetrachloride-intoxicated rat hepatocytes, Bezoar Bovis did not have significant effect and only the aqueous fraction of Moschus showed 42% and 40% protection, respectively.
This study was carried out to investigate physiological activities of chicory root (Cichorium intybus L. var. sativus). The anti-hepatotoxic activity of roasted chicory was studied using primary cultured rat hepatocytes where cytotoxicity was induced by galactosamine. The water extract of roasted chicory did not induced of cytotoxicity in primary cultured rat hepatocytes. Treatment with 5 mM galactosamin for 5.0 hr showed maximum increase in activity of lactic dehydrogenase (LDH) released in the medium. The water extract of roasted chicory inhibited significantly and dose-dependently the release of LDH activity increased by galactosamine-induced cytotoxity. The antidiabetic activity of water extract of roasted chicory was examined in streptozotocin induced diabetic rats. The increased blood glucose level in the streptozotocin induced diabetic rats was significantly decreased by the administration of chicory extract (800 mg/kg). Chicory water extract (800 mg/kg) prevented weight losses in streptozotocin induced diabetic rats. The antimutagenic activities of chicory water extract were tested using Salmonella thyphimurium YG 1024 as tester strains and 2-aminofluorence as a potent carcinogen in the presence of S-9 mix. No mutagenic activities of the water extracts of roasted chicory were observed on all the tested strains at dose $10{\sim}5,000$${\mu}/g$ per plate. Water extract of roasted chicory did not inhibit the mutagencities of Salmonella thyphimurium YG 1024 induced by 2-aminofluorene.
$\alpha$-Linolenic acid ethylester, $C_{19}$ spiroketalenolether polyyne, herniarin and steroid were isolated from the leaves of Artemisia selengensis (Compositae). The structures of the compounds were elucidated on the basis of spectroscopic evidence. Liver protective effects of these constituents were studied using galactosamine and CCI$_{4}$-induced cytotoxicity in primary cultured rat hepatocytes.
Kim, Young-Choong;Park, Mi-Jung;Byun, Soon-Jung;Song, Jin-Ho
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.21
no.1
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pp.92-99
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1990
Effects of the methanol extract of Bupleuri Radix on primary cultured chicken embryonic brain cells, dorsal root ganglia (DRG) and rat hepatocytes were studied. The methanol extract of Bupleuri Radix at the concentration ranging from $10{\;}{\mu}g/ml\;to\;100{\;}{\mu}g/ml$ significantly recovered the cytotoxicity of rat hepatocytes induced by the treatment of galactosamine; at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$, values of GOT and GPT in the culture medium were reduced by the 60% and 75%, respectively of those in the absence of the methanol extract of Bupleuri Radix. The addition of the methanol extract of Bupleuri Radix. into chicken embryonic brain cells which were cultured with a deficient medium significantly increased the number of cells promoting the neurite outgrowth. However, the methanol extract of Bupleuri Radix showed no effect on the activities of PDHC and acetylcholinesterase in primary cultured brain cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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