본 연구에서는 포도박이 고지방식이를 섭취한 흰쥐의 효소 활성과 지질과산화 수준에 미치는 영향을 조사함으로써 포도박의 생리활성과 자원화에 필요한 기초자료를 얻고자하였다. 고지방식이를 섭취한 흰쥐에게 포도박 실험식이를 급여한 후 혈청, 간조직 중의 지질과산화물 함량, glutathione 함량과 간조직 효소 활성을 측정하였다. 포도박 첨가군의 식이섭취량은 대조군에 비하여 감소하였고, 체중증가량의 실험군 간 유의적인 차이는 없었다. 식이효율은 고지방식이군이 정상식이군 보다 유의적으로 증가하였다. 지질과산화물 함량은 혈청의 경우 정상식이군에서는 포도박 첨가에 의한 변화가 없었으나 고지방식이군에서 함량이 증가되었고 포도박 첨가에 의해 감소되었다. 간조직과 간 microsome에서는 포도박을 첨가한 군이 각각의 대조군에 비하여 유의적으로 감소하였다. 간조직 내의 총glutathione 함량과 GSH/GSSG 비는 포도박 첨가군이 대조군에 비하여 모두 유의적으로 증가하였다. 간조직의 SOD 활성은 정상식이군에서는 차이가 없었으나 고지방식이에 포도박을 첨가한 군이 고지방대조군에 비하여 활성이 유도되었다. 간조직의 catalase 활성은 대조군에 비하여 포도박 첨가군이 유의적으로 증가하였다. G6Pase 활성은 포도박의 첨가로 인하여 대조군보다 활성이 증가하였지만 실험군간 유의적인 차이는 없었다. GST와 GSH-Px 활성은 정상 식이군에서는 변화되지 않았으나 고지방식이에 포도박을 첨가한 군이 고지방대조군 보다 효소 활성이 유의적으로 증가되었다. 이상의 결과를 종합해 보면 식이섬유와 폴리페놀 성분을 다량 함유한 포도박 식이는 체내 항산화계를 활성화함으로써 지질 산화와 관련성이 높은 심혈관계 질환의 예방효과를 가져올 수 있는 것으로 기대되었다. 포도박의 이러한 생리활성에 대한 연구결과는 향후 포도 가공 중에 얻어지는 포도박 폐기물을 자원화 할 수 있는 기초자료로 이용될 것으로 사료된다.
Glutathione S-transferase (GST) is a multigene family of phase II detoxifying enzymes that metabolize a wide range of exogenous and endogenous electrophilic compounds. GSTM1 and GSTT1 gene polymorphisms may account for inter-individual variability in coping with oxidative stress. We investigated the relationships between the level of lymphocyte DNA and antioxidative parameters and the effect on GST genotypes. GSTM1 and GSTT1 were characterized in 301 young healthy Korean adults and compared with oxidative stress parameters such as the level of lymphocyte DNA, plasma antioxidant vitamins, and erythrocyte antioxidant enzymes in smokers and non smokers. GST genotype, degree of DNA damage in lymphocytes, erythrocyte activities of superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase (GSH-Px), and plasma concentrations of total radical-trapping antioxidant potential (TRAP), vitamin C, ${\alpha}$- and ${\gamma}$-tocopherol, ${\alpha}$- and ${\beta}$-carotene, and cryptoxanthin were analyzed. Lymphocyte DNA damage assessed by the comet assay was higher in smokers than that in non-smokers, but the levels of plasma vitamin C, ${\beta}$-carotene, TRAP, erythrocyte catalase, and GSH-Px were lower than those of non-smokers (p < 0.05). Lymphocyte DNA damage was higher in subjects with the GSTM1- or GSTT1-present genotype than those with the GSTM1-present or GSTT1- genotype. No difference in erythrocyte antioxidant enzyme activities, plasma TRAP, or vitamin levels was observed in subjects with the GSTM1 or GSTT1 genotypes, except ${\beta}$-carotene. Significant negative correlations were observed between lymphocyte DNA damage and plasma levels of TRAP and erythrocyte activities of catalase and GSH-Px after adjusting for smoking pack-years. Negative correlations were observed between plasma vitamin C and lymphocyte DNA damage only in individuals with the GSTM1-present or GSTT1- genotype. The interesting finding was the significant positive correlations between lymphocyte DNA damage and plasma levels of ${\alpha}$-carotene, ${\beta}$-carotene, and cryptoxanthin. In conclusion, the GSTM1- and GSTT1-present genotypes as well as smoking aggravated antioxidant status through lymphocyte DNA damage. This finding confirms that GST polymorphisms could be important determinants of antioxidant status in young smoking and non-smoking adults. Consequently, the protective effect of supplemental antioxidants on DNA damage in individuals carrying the GSTM1- or GSTT1-present genotypes might show significantly higher values than expected.
본 연구는 카드뮴으로 유발된 생쥐 간중독에 대한 키토산올리고당의 효과를 알아보기 위하여 시도되었다. Mouse를 대상으로 카드뮴 (5.0 mg/kg; i.p.) 단독투여군(group Cd), 카드뮴과 키토산올리고당 (0.5% solution) 동시투여군 (group Cd+Chi) 그리고 키토산올리고당 1주일 전처치군 (group Chi7+Cd)으로 구분한 후 간손상 억제효과를 알아보기 위해 혈청중 효소활성도와 glutathione peroxidase (GSH-Px)의 활성도 그리고 glutathione reductase (GR)의 활성도를 비교측정하였다. 또한 간조직의 형태학적 손상을 확인하기 위해 조직학적 관찰을 실시하였다. 혈청 효소활성결과, AST, ALT 그리고 LDH의 활성도는 키토산올리고당을 처치한 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 Cd군보다 감소되었다. 그러나 TP와 Alb의 활성도는 키토산올리고당을 처치한 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 Cd군보다 증가되었다. GSH-Px활성은 Cd군에 비해 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 현저하게 증가되었다. GR활성은 Cd군에 비해 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 현저하게 감소하였다. 광학현미경적 관찰 결과, Cd군은 카드뮴 독성에 의한 간세포의 괴사가 관찰되었다. Cd+Chi군과 Chi7+Cd군은 정상군과 유사한 소견을 보였다. 이상과 같은 결과로, 키토산올리고당이 생쥐 간조직에 미치는 카드뮴의 독성을 감소시킴을 알 수 있었다.
댑싸리하고초 약침액을 이용하여 phase II detoxification 효소인 quinone reductase (QR 및 GST) 유도, GSH 생성량, phase I 효소 cytochrome P4501A1 활성억제, 발암물질 B[a]P-DNA adduct 형성의 저해효과 등을 측정하였다. QR 생성 유도를 Hepa1c1c7로 실험한 결과, 댑싸리하고초 약침액및 열수추출액 모두에서 유도 되었으며, 농도가 높아질수록 유도율이 더 높게 나타났으며, GSH와 GST의 유도율도 약침액에서 나타났다. 댑싸리하고초 약침액 $5{\times}$에서 45.2%의 cytochrome P4501A1 효소활성 저해효과를 측정할 수 있었다. 또한 B[a]P-DNA binding 저해효과를 실험한 결과, 약침액 $3{\times}$ 농도에서 45.0%의 저해효과가 있었다. 이상의 결과에 의하면 댑싸리하고초 약침액은 암억제 물질로서의 기능을 충분히 발휘할 것으로 사료된다.
1. Objectives This study was carried out to investigate the effects of Gunyuljejo-tang on the $CCl_4$-induced Liver Damage in Rats. 2. Methods Sprague-Dawley rats were devided into 5 experimental groups : Normal, $NS+CCl_4$(Solid extract of $CCl_4$ injection group after Normal Saline feed), $GYJJT+CCl_4$(Solid extract of $CCl_4$ injection group after Gunyuljejo-tang feed), $CCl_4+NS$(Normal Saline feed group after $CCl_4$ injection), $CCl_4+GYJJT$(Solid extract of Gunyuljejo-tang feed group after $CCl_4$ injection). Biochemical assays for serum enzyme activities such as AST, ALT, ALP, BUN, Creatinine, Uric Acid, Total Protein, Albumin, Total Cholesterol, Triglyceride, Glucose, and mRNA Revelation of Cytochrome p450 and activities such as LPO, GSH, GST, Glutathione Reductase, Glutathione Peroxidase, SOD, Catalase, Hydroxyproline, and ${\beta}$-Glucuronidase were performed. 3. Results (1) $GYJJT+CCl_4$ showed lower revelation of Cytochrome p450. (2) $GYJJT+CCl_4$ showed higher GSH activity than $NS+CCl_4$, $CCl_4+GYJJT$ showed higher GSH activity than $CCl_4+NS$ injection significantly. (3) $GYJJT+CCl_4$ showed higher GST activity than $NS+CCl_4$. $CCl_4+GYJJT$ showed higher GST activity than $CCl_4+NS$ significantly. (4) $GYJJT+CCl_4$ showed higher Glutathione Peroxidase activity than $NS+CCl_4$, $CCl_4+GYJJT$ showed higher Glutathione Peroxidase activity than $CCl_4+NS$ significantly. (5) $CCl_4+GYJJT$ showed higher SOD activity than $CCl_4+NS$ significantly. (6) $CCl_4+GYJJT$ showed higher Catalase activity than $CCl_4+NS$ significantly. (7) $GYJJT+CCl_4$ showed lower Hydroxyproline than $NS+CCl_4$ significantly, $CCl_4+GYJJT$ showed higher Hydroxyproline than $CCl_4+NS$ significantly. (8) $GYJJT+CCl_4$ showed higher ${\beta}$-Glucuronidase activity than $NS+CCl_4$, $CCl_4+GYJJT$ showed higher ${\beta}$-Glucuronidase activity than $CCl_4+NS$ significantly. 4. Conclusions Gunyuljejo-tang has the recovering effects on the $CCl_4$-induced Liver Damage significantly.
This study aimed to evaluate the effects of vitamin E (VE), ferulic acid (FA) and their combination supplementation on meat quality and antioxidant capacities of finishing pigs. Sixty barrows were randomly allocated to four experimental diets using a $2{\times}2$ factorial arrangement with 2 VE supplemental levels (0 or 400 mg/kg) and 2 FA supplemental levels (0 or 100 mg/kg) in basal diets. After 28 days, six pigs per treatment were slaughtered. The results showed that VE supplementation increased loin eye area of pigs (p<0.05) and FA supplementation increased $pH_{45min}$ value (p<0.05). The interaction of $FA{\times}VE$ was observed in shear force of longissimus dorsi muscle (p<0.05). Moreover, supplementation with VE decreased hepatic and sarcous malondialdehyde (MDA) content, increased hepatic glutathione (GSH) content and sarcous glutathione peroxidase (GSH-Px) activity (p<0.05). Additionally, supplementation with FA increased hepatic GSH-Px activity and decreased sarcous MDA content (p<0.05). However, dietary treatment did not affect the expression of genes related to nuclear factor, erythroid 2-like 2 (NFE2L2) pathway. These results suggest that dietary FA and VE could partially improve meat quality and antioxidant capacity of finishing pigs, but not by activating NFE2L2 pathway under the normal conditions of farming.
Effects of oral taurine supplementation (6g/day)for 2-4 weeks on activities of red blood cell(RBC)total superoxide dismutase (SOD) and plasma glutathione peroxidase(GSH-Px) and the level of malondialdehyde(MDA) were evaluated in healthy female adults (23.6$\pm$0.3 years old). Compared to the value for 0 week plasma GSH-Px activity of the subjects was significantly lower after 2 weeks of taurine supplementation(p<0.05) and recovered to the value similar to 0 week after 4 weeks of taurine supplementation. RBC total SOD activity tended to be decreased after 2 weeks of taurine supplmentation compared to the values for 0 week although the difference between the means of the two group was not statistically significant. Plasma MDA level was not significantly decreased by taurine supplementation most probably due to the fact that the subjects participated in the present study were healthy and their antioxidant defense system had been in the 'normal' range. Plasma MDA concentration was negatively correlated with plasma taurine concentration(r=-0.2003m p<0.05) but tended to be positively correlated with plasma cholesterol concentration(r=0.2465, p=0.0645) as expected Plasma GSH-Px activity was positively associated with the percentage of 22:0 (r=0.2892, p<0.05) or 20:4w6(r=0.2939, p<0.05). On the other hand plasma MDA concentration was positively correlated with the percentage of 20:5w3 in plasma total lipids(r=0.2635 p<0.05) and negatively correlated with $\Delta$5 desaturation index of w6 fatty acids(20:3w6⇒20:4w6) in plamsa total lipids(r=-0.2714, p<0.05) as well as in phospholipids(r=-0.2864, p<0.05). From these results protective effect of taurine supplementation against lipid peroxidation and antioxidant defense system in humans appears to be minimal when the subjects are in a relatively healthy state. Further studies concerning the antioxidant efficacy of taurine should be conducted in human subjects under various disease states related to oxidative stress such as diabetes and artheroxclerosis.
The study was designed to observe antioxidant activities of conjugated linoleic acid (CLA) by determining antioxidant enzyme protein levels [cytochrome P4502 El (CYP2E1), Copper, Zinc-superoxide dismutase (CuZn-SOD), glutathione peroxidase (CSH-Px), glutathione S-transferase (GST)] by Western blot analysis and the levels of ${\alpha}$-tocopherol and 2-thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) in the liver of chronically ethanol-treated rats. Sixty Sprague Dawley male rats were divided into 3 groups (Control, EtOH, EtOH+CLA). All rats were fed Lieber-DeCarli liquid diet for 4 weeks by pair-feeding against the EtOH group. The liquid diet was supplemented with 1.77g CLA mixture per kg diet in the EtOH+CLA group. Isocaloric maltose dextrin was added in replace of 50g ethanol (36%kcal) for the Control group. Ethanol ingestion significantly increased the levels of CYP2E1 protein and TBARS, but significantly reduced CuZn-SOD protein level and increased GST protein level. There was no significant effect on the level of GSH-Px protein and ${\alpha}$-tocopherol in the liver by ethanol. CLA supplementation with ethanol significantly increased the levels of CuZn-SOD, GSH-Px and GST and also significantly attenuated TBARS level, whereas there was no significant effect on the levels of CYP2E1 protein and ${\alpha}$-tocopherol by CLA. Overall, the CLA supplemented to ethanol could significantly increase the levels of CuZn-SOD, GSH-Px and GST proteins and reduce the level of TBARS in the liver of chronically ethanol-treated rats.
Objective : Citri Unshius Pericarpium is the dried peel of mature fruit of Citrus unshiu Markovich and has been used to treat indigestion, vomiting, and removal of phlegm. This study investigated the hepatoprotective and antioxidant effect of CEE (Ethanol extract of Citri Unshius Pericarpium) in cadmium (CdCl2)-treated HepG2 cells. Methods : Component analysis of Citri Unshius Pericarpium was analyzed by UPLC with C18 column. Cell viability was determined by MTT assay. The enzyme activity of superoxide dismutase (SOD) and the level of reactive oxygen species (ROS) and reduced glutathione (GSH) were analyzed using commercially available kits. Results : Cadmium caused severe HepG2 cell death. Cadmium also increased ROS production, consistent with depletion of GSH and inhibition of the SOD enzyme. However, CEE treatment reduced cell death and relieved oxidative stress caused by cadmium toxicity. CEE lowered ROS levels and improved depletion of GSH levels. CEE also enhanced the enzymatic activity of SOD. In component analysis, hesperidin was the most abundant of the five marker compounds (Narigenin, Narigin, Narirutin, Hesperidin and Hesperidin), which assumes that hesperidin partially contributed to the antioxidant activity of CEE. Conclusion : These results suggested that CEE could be a potential substance to solve heavy metal-related health problems. In particular, inhibition of oxidative stress by CEE can be a way to treat liver damage caused by cadmium.
Inhibitory effect on DNA topoisomerase-I, rate of glutathione conjugation and cytotoxicity of naphthoquinone derivatives were correlated. During 5 min exposure of the derivatives to glutathione (GSH), it was found that 14% of 5,8-dimethoxy-1,4-naphthoquinone(DMNQ) was converted into a GSH-conjugate, whereas 5,8-dihydroxy-1,4-naphthoquinone(DHNQ) did not interact with GSH, implying that DMNQ exerted higher electrophilicity than DHNQ. However, DHNQ (IC$\_$50/, 0.15 ${\mu}$M) showed stronger cytotoxicity in L1210 cells than DMNQ(IC$\_$50/, 0.45 ${\mu}$M). The stronger cytotoxicity of DHNQ, compared to DMNQ, could be ascribed to more rapid redox cycling. Both naphthoquinones (IC$\_$50/, 60-65 ${\mu}$M) exhibiting about the same inhibitory effect on DNA topoisomerase-I were more potent than 1,4-naphthoquinone(1,4-NQ, IC$\_$50/, 134 ${\mu}$M). Thus, 5,8-oxy groups in the structure seem to be important for the inhibition of the enzyme. DMNQ showed a broader dose range while maintaining a good antitumor activity against S-180 fluid tumor. For these reasons, DMNQ was taken as useful pharmacophore for structural modification. Introduction of 1-hydroxyalkyl groups at C-2 of DMNQ lowered all of the activities mentioned above, while acetylation of 1-hydroxyalkyl moiety enhanced the activities by 4-5 times. Introduction of the same side chains at C-6 exhibited stronger activities than 2-substituted ones. Based on these results it was suggested that the quinonoid moiety in 6-substituted DMNQ was more exposed to cellular nucleophiles such as DNA, thiols of enzymes and so on. The synthesis of DHNQ or DMNQ derivatives are going on, and the corelationship between structure-activity will be discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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