Objective: Selenium-independent glutathione peroxidase (GPx5) is specifically expressed in the mammalian epididymis and plays an important role in protecting sperm from reactive oxygen species and lipid peroxidation damage. This study investigates GPx5 expression in the epididymis of Small Tail Han sheep. Methods: GPx5 expression was studied in three age groups: lamb (2 to 3 months), young (8 to 10 months), and adult (18 to 24 months). The epididymis of each age group divided into caput, corpus and cauda, respectively. Analysis the expression quantity of GPx5 in epididymis and testis by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction and Western blot. Finally, GPx5 protein locating in the epididymis by immunohistochemical. Results: The results demonstrate that in the lamb group, the GPx5 mRNA, but not protein, can be detected. GPx5 mRNA and expressed protein were detected in both the young and adult groups. Moreover, both the mRNA and protein levels of GPx5 were significantly higher in the young group than in other two groups. When the different segments of epididymis were investigated, GPx5 mRNA was expressed in each segment of epididymis regardless of age. Additionally, the mRNA level in the caput was significantly higher than that in corpus and cauda within same age group. The GPx5 protein was in the epithelial cells' cytoplasm. However, GPx5 mRNA and protein were not detected in the testis. Conclusion: These results suggest that GPx5 is mainly expressed in the epididymis of Small Tail Han sheep, and that the expression level of GPx5 is associated with age. Additionally, GPx5 was primarily expressed in the epithelial cells of the caput. Taken together, these studies indicate that GPx5 is expressed in the epididymis in all age grades.
동진벼 유묘 뿌리에 환원제인 ascorbic acid, 신호전달물질인 salicylic acid와 methyl jasmonic acid, 중금속인 $NiCl_2$와 $CuSO_4$ 및 NaCl를 다양한 농도로 처리한 후 항산화효소인 glutathione peroxidase(GPX)의 활성과 동위효소의 패턴 변화를 살펴보았다. Ascorbic acid 처리에 의한 GPX의 총활성은 ascorbic acid 농도 증가에 의존적으로 증가하였으며 이러한 GPX활성 증가는 GPX1 동위효소의 현저한 활성증가에 기인하였다. GPX는 신호전달물질인 salicylic acid와 methyl jasmonic acid에 대하여 서로 다른 반응성을 보였다. GPX의 활성은 0.1 mM salicylic acid에 의해 증가하였다가 이후 감소하였다. 이에 비해 GPX는 methyl jasmonic acid의 농도증가에 의존하여 점진적으로 증가하여 1 mM methyl jasmonic acid에 의하여 약 3배의 활성증가를 보였다. 뿐만 아니라 GPX1 동위효소는 salicylic acid 농도가 증가할수록 활성이 감소한 반면 methyl jasmonic acid 농도가 증가할수록 현저하게 증가하였다. GPX의 총활성은 $NiCl_2$ 농도 증가에 따라 점진적으로 증가되었으나, $CuSO_4$ 처리군의 경우 GPX의 총비활성도는 0.5 mM $CuSO_4$에 의하여 약 2배 증가한 이후 점차 감소하였다. $NiCl_2$와 $CuSO_4$ 처리에 의한 GPX 활성증가도 주로 GPX1 동위효소의 활성증가에 기인하였다. NaCl 처리에 의한 GPX 총활성은 300 mM NaCl 처리군에서 약 1.7배 증가되었다가 이후 감소하였다. 특이하게도 NaCl 농도가 증가함에 따라 GPX2 동위효소 활성이 점차 증가하였다.
본 연구에서는 개에서 일반 개흉술을 통한 폐엽절제술과 흉강경을 이용한 폐엽절제술에서 심폐기능 및 생체 내 산화스트레스 상태에 미치는 영향을 비교 연구 하였다. 10 마리의 건강한 혼혈종을 사용하였고 일반 개흉술을 통한 폐엽절제술군 (group 1, n=5)과 흉강경을 이용한 폐엽절제술군 (group 2, n=5)으로 분류하였다. 심혈관계 측정 항목 및 superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx)의 농도를 측정하였다. 두 군에서 동맥혈액 가스의 유의적인 변화를 관찰 할 수 있었다. 총 마취 및 수술 시간은 개흉수술군에 비해 흉강경 폐엽 절제술군에서 유의하게 짧았다. 혈장 SOD와 CAT 수준의 증가, 그리고 GPX 수준의 감소는 수술 후 두 군 모두에서 관찰되었다. 두 군을 비교했을 때 GPX 수준에서 유의한 차이가 발견되었다. GPX 수준은 개흉 수술 군과 비교 흉강경 폐엽 절제술 군에서 유의하게 낮았다.
The cDNAs encoding glutathione peroxidase (GPx) were cloned and sequenced from the liver of three Chinese carps with different tolerance to hepatotoxic microcystins, phyto-planktivorous silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) and bighead carp (Aristichthys nobilis), and herbivorous grass carp (Ctenopharyngodon idellus). Using genome walker method, a 750 bp 5'-flanking region of the silver carp GPx gene was obtained, and several potential regulatory elements were identified in the promoter region of the GPx gene. The silver carp GPx gene was widely expressed in all tissues examined. Despite phylogenetic analysis, assigning this newly described carp GPx to the group of mammalian GPx2, the carp GPx seems more similar to GPx1 from a physiological point of view. The constitutive expression pattern of the three carp liver GPx gene, shows a positive relationship with their tolerance to microcystins.
분리된 무 자엽 조직에 산화질소 (nitric oxide: NO) 공여체인 sodium nitroprusside (SNP) 처리 시 농도 의존방식으로 부정근의 발달을 증진시켰다. 그러나 이러한 NO 증진 효과는 세포외 칼슘 chelator인 0.5 mM EGTA 또는 세포막 칼슘채널 차단제인 0.1 mM $LaCl_3$를 각각 $50\;{\mu}M$ SNP와 함께 혼합처리 시 반전되었다. 또한, 뿌리 발생에서 중심적 역할을 수행하는 것으로 알려진 guaiacol peroxidase (GPX)와 syringaldazine peroxidase (SPX)의 활성도가 SNP 단독 처리된 자엽에서 부정근이 형성되는 동안 현저히 증가하였다. 그러나, SNP와 $LaCl_3$ 혼합처리 시 SNP에 의해 유도된 GPX와 SPX 활성도 증가가 거의 증류수 대조구 수준으로 억제되었다. calmodulin의 anatagonist인 trifuoperazine 역시 SNP로 처리된 자엽에서 부정근 형성을 억제하여 발생된 뿌리의 개수와 길이를 감소시켰으며 동시에 GPX와 SPX를 불활성화 하였다. 결론적으로, 이들 결과는 칼슘이 GPX와 SPX 활성도 조절을 통해 부정근 유도를 이끄는 NO 반응에 포함되어 있음을 나타내는 것이다.
The present investigation was undertaken to examine the anticancer activity of the methanol extract from Houttuynia cordata on ICR mouse with induced abdominal cancer and L1210 cancer cells. When the methanol extract of Houttuynia cordata (10∼200 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) was administered orally to ICR mouse with abdominal cancer, 47.8% of the best life prolonging effect was obtained. In case of cytotoxicity study (inhibition of cell proliferation) of Houttuynia cordata extract against L1210 cells, $IC_{50}$/ was found to be 62.8 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$. In contrast to such considerable toxicity against cancer cell line, the toxicity demonstrated by the identical extract against normal lymphocytes was very meagre as shown to be < 5% compared with 86.5% in case of L1210 cells at the same condition. To get an insight into the reaction mechanism undelying the anticancer activity, $O_2$ion quantity and antioxidant enzyme activities such as superoxide dismiutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) of L1210 cells in the presence of Houttuynia cordata extract were measured. The increased values of SOD and GPx enzyme activities in addition to the augmented generation of $O_2$ ion in L1210 cells implied that the reactive oxygen species induding $O_2$ion which were presumably induced by Houttuynia cordata extract might have participated in the process of L1210 cells cytotoxicity.
Yayeh, Taddesse;Jeong, Ha Ram;Park, Yoon Soo;Moon, Sohyeon;Sur, Bongjun;Yoo, Hwan-Soo;Oh, Seikwan
Biomolecules & Therapeutics
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제29권1호
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pp.52-57
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2021
Fumonisin B1 (FB1) structurally resembles sphingolipids and interferes with their metabolism leading to sphingolipid dysregulation. We questioned if FB1 could exacerbate liver or kidney toxicities in glutathione peroxidase 1 (Gpx1) and catalase (Cat) knockout mice. While higher serum levels of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and sphinganine (Sa) were measured in Gpx1/Cat knockout mice (Gpx1/Cat KO) than wild type mice after 5 days of FB1 treatment, serum levels of alanine aminotransferase (ALT), sphingosine-1 phosphate (So-1-P), and sphinganine-1 phosphate (Sa-1-P) were found to be relatively low. Although Sa was highly elevated in Gpx1/Cat KO mice and wild mice, lower levels of So and Sa were found in both the kidney and liver tissues of Gpx/Cat KO mice than wild type mice after FB1 treatment. Paradoxically, FB1-induced cellular apoptosis and necrosis were hastened under oxidative stress in Gpx1/Cat KO mice.
돈육의 pH가 5.0에서 7.0으로 증가할수록 저장중 산패치는 유의차 있게 감소하였다. 본 실험 결과 고 pH 돈육의 낮은 유리철 함량과 높은 GPx 활성은 저장중 돈육의 산패 억제에 관여하는 중요한 요인들인 것으로 밝혀졌다. 그러나 pH 조절에 의한 산패 억제에 관여할 수 있는 그 밖의 다른 가능한 인자들을 찾는 연구 또한 중요하다고 하겠다. 나아가서 유리철 ion의 방출 억제나 불활성화 방안, GPx의 또 다른 활성화 방안 및 천연항산화제로서의 활용 가능성등이 계속 연구, 검토되어야 할 것이다. 본 연구의 결과는 돈육의 저장성 증진은 물론, 규명된 항산화 기작들을 다른 작품 system에 응용하는 데에도 이용될 수 있을 것으로 본다.
본 연구는 고온기 복합생균제(L. plantarum, B. subtilis, Saccharomyces cerevisiae) 급여가 육계의 항산화 방어작용에 미치는 영향을 조사하기 위하여 대조군(CON), 0.25% 생균제 급여군(LPB) 및 0.5% 생균제 급여군(HPB) 등 3 처리군으로 설정하여 혈장, 소장 점막 및 간 조직에서 항산화 지표를 분석하였다. 실험 결과, 혈장 total protein, albumin, bloodurea nitrogen(BUN) 및 glutathione(GSH) 수준 등 질소화합물은 처리군 간 차이가 없었다. 혈장에서 조사한 항산화 효소 superoxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GPX)와 glutathione S-transferase(GST) 및 지질과산화(MDA) 역시 생균제 급여에 따른 유의적 차이가 없었다. 소장점막조직에서 SOD 활성도는 0.5% 생균제 급여군(HPB)에서 대조군과 LPB군 보다 유의하게(P<0.05) 증가하였다. 소장 점막조직의 MDA 수준은 대조군보다 HPB군에서 현저하게(P<0.05) 감소하였다. 그러나 소장 점막조직의 GPX와 GST 활성도는 생균제 급여에 따른 차이는 없었다. 간 조직에 존재하는 SOD, GPX, GST 활성도 및 MDA 수준은 생균제 급여와 급여 수준에 따른 영향을 받지 않았고 모든 군에서 비슷한 수준을 보였다. 따라서 HPB군의 소장 점막조직에서 SOD 활성도가 증가하고 지질과산화도가 감소하는 결과로 보아 고온기에 0.5% 생균제 급여는 육계 소장 점막조직의 항산화 방어작용에 긍정적인 효과를 미치는 것으로 나타났다.
SD-994 was prepared from methanol extract of Artemisia argyi by stepwise purification of solvent partioning and silica gel chromatography. In the course of this purification, fractions obtained at each step were investigated for their cytotoxicities against L1210 cells. Fractions A~G prepared from chloroform fraction showed considerable cytotoxicities raging 40~90% against L1210 cells. Subfractions I~IX obtained from fraction A exhibited various cytotoxicities and subfraction I (SD-994) was found to be the most effective compound. $IC_{50}$ values of SD-994 were measured to be $0.5{\;}{\mu\textrm{g}}/ml and less than $0.05{\;}{\mu\textrm{g}}/ml against L1210 cells and normal lymphocytes, respectively: When SD-994 was added to L1210 cell as cytotoxic agent, significantly increased amount of superoxide ($O_2^-$) and dramatically augmented activities of superoxide dismutase (SOD), specially MnSOD and glutathione peroxidase (GPx) were observed according to the concentration and incubation time. Whereas, in case of normal lymphocytes under the same condition, cytotoxicities were not apparent and the generation of superoxide ($O_2^-$) or the activity changes of SOD and GPx were insignificant. These results together indicate that the cytotoxic action of SD-994 against L1210 cell may be achieved via necrosis and/or apoptosis induced by reaction oxygen species which could not probably be completely abolished even by drastically increased antioxidant enzymes, SOD and GPx activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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